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다양성과 조직성과 이를 위해 노력해야하는 방안에 대한 보고서

[기술인사조직]다양성과 조직성과 이를 위해 노력해야하는 방안에 대한 보고서1. 서론2020년 경영흐름을 읽을 10대 핵심 키워드로 ‘다양성 포용 경영’이 거론되고 있다. 국적, 연령, 성별을 가리지 않고 포용하고 이를 기업의 전략적 성장에너지로 전환시키려는 노력의 일환이다. 국가 전체의 인구구조의 다양성과 기업 내 인력구조의 다양성이 일치해야 다양성이 존중되는 기업이라 할 수 있는데. 국내 기업의 다양성은 아직 초보단계라 말할 수 있다. 즉, 여성, 외국인, 핵심인재, 신세대 등 새로운 인적자원을 확보 활용하여 시너지를 창출하는 데 미흡하다.2. 본론다양성에 대해 조직이 취할 수 있는 행태는 저항, 동화, 분리, 통합 4가지 패러다임이 있다. 다양성의 차이를 거부하는 ‘저항의 패러다임’과 다양성의 차이를 무시하거나 동화시키려는 ‘동화의 패러다임’은 경영성과 창출에 마이너스로 작용한다. 경영성과를 향상시킬 수 있는 것은 ‘통합의 패러다임’이며, 차이를 핵심 업무나 그 프로세스에 통합시켜 감으로써 조직 변혁과 성과 향상을 도모한다. 차이를 인정하고 별개 집단으로 분리하는 ‘분리의 패러다임’은 그 차선책이다.다양성 관리가 사업성과 향상으로 연결된다는 직접적 인과 관계에 대한 실증적 검증 연구가 아직 없지만, 많은 기업 사례 및 관련 연구들은 앞으로 다양성 관리가 글로벌 사업전개 및 경쟁력 확보의 선택이 아닌 필수가 될 것이라는 전망을 보여준다. 모토로라 미국 본사에는 ‘다양성 전담 임원(Chief Diversity Officer)’이라는 독특한 직함이 있다. 부사장급 임원이 여성, 동성애자, 아프리카계 미국인 등 사내 소수그룹과 관련된 일을 전담한다. 펩시콜라는 조직 내 다양성을 높이는 일이 혁신의 원동력이라고 말한다. 회사의 CED 인드라 누이는 인도 출신 여성으로 항상 인도식 복장인 사리를 입는다. 회사의 경영진들은 한 사람씩 동종그룹에 대해 스폰서 역할을 해준다. 예컨대, 백인남성인 부사장이 유색인종 여성그룹의, 흑인여성 임원은 백인 남성그룹의 스폰서 역할을 성별 다양성이 기업 성과를 높인다는 보고가 있다. 여성은 고령화, 베이비붐 세대의 은퇴 등 정체된 성장 동력의 핵심카드다. 정부가 기업의 여성고용을 촉진하고 여성 근로자의 고용차별 해소 및 모성보호 강화를 위해 추진하고 있는 각종 제도에 여성 친화기업, 양성 평등한 조직문화 조성이 기업 경쟁력 확보의 해결방안이 될 수 있다. 유럽 젠더컨설팅 기업의 CEO인 아비바 위텐베르크 콕스는 세계적인 경제 위기 이후 차세대 경제 트렌드를 주도하는 키워드로 여성을 꼽았다. 여성이 미래성장의 주요 원동력으로 인력다양성을 높이고 기업의 경쟁력 제고에 기여할 것이라는 분석이다. 이를 위해 기업 문화조성과 사회 인프라를 마련해야 한다. 약간의 배려를 통해 서로 웃으며 소통하고, 남녀 모두 더 즐겁게 만족하며 일할 수 있는 기업에서 더 경쟁력 있는 성과가 창출될 수 있다.집단구성의 혼합방식에 관계없이 차이성은 우수한 성과를 낳는 지렛대 역할을 한다. 집단지성의 독창적 아이디어는 조직 구성원간의 타협이나 화해보다는 적절한 대립과 충돌 속에서 창출된다. 다양성이 갈등과 오해를 일으키고 생산성을 저해함에도 각양각색의 ‘색깔’이 혼합되어 어두워질 수 있는 원천을 오히려 더 밝은 ‘빛깔’이 되어 경쟁우위를 차지하도록 이끌어가는 것이 다양성 경영의 핵심이라 할 수 있다. 미국 미시간 대학교의 스콧E. 페이지 교수는 20여 년 간 수많은 사례 연구와 실험을 거쳐 ‘다양성이 능력을 이긴다’는 이론을 정립했다. 덜 똑똑해도 다양한 사람들로 구성된 조직이 경험과 배경이 비슷하면서 똑똑한 사람들로 채워진 조직보다 더 높은 성과를 낸다는 이론이다. 사회학자 마크 그라노베터 박사는 연구를 통해 가치 있는 정보와 아이디어는 배경과 경험이 다른 사람들(유대관계가 약한 사람들)로부터 얻어진다는 점을 보여주었다. 생각이 비슷한 사람들끼리 뭉쳐있으면 사고방식이 더욱 극단화되는 효과(Echo Chamber Effect; 반향 효과)를 낳는다. 강한 유대관계(순혈주의)가 계속돼 구성원들이 획일적인 사고와 고정관념에CEO는 “회사 운영에 대한 쟁점이 있을 때, 이를 덮어두지 않고 적극적인 토론을 통해 발전적으로 해소하도록 한 건설적인 대결 문화가 인텔 성공의 가장 큰 원동력”이라고 했다. 과거 절대 권력을 쥐던 왕들도 국정에 중대한 차질이 생길 때에는 구언(임금이 신하의 바른 말을 구한다)의 슬기를 발휘하여 왕의 잘못에 대해 신하들의 비판 내용을 의사결정에 반영하였다. 창조적 마찰 극대화를 통해 획기적 성과를 창출하기 위해 조직 리더들의 역할이 중요하다. 모자란 조장이나 반론이 제기되더라도 경청하고 포용하며, 도전적 시도에 따른 실패를 용인, 조직 관리자는 직원들의 창의적인 시도가 좌절되지 않도록 보호, 과업 갈등의 촉진이 감정적 갈등으로 변화하지 않도록 유의하는 것이 필요하겠다.도요타를 ‘생각의 다양성을 포용하는 회사’라 일컫는다. 즉, 각계각층에 있는 구성원들의 다양한 아이디어와 관점들을 창조적으로 통합함으로써 더 나은 가치를 지속적으로 창출해 낸다. 미국의 자동차 회사들은 1980년대 일본의 자동차 회사인 도요타의 고효율 생산 시스템 비결을 알아내기 위해 많은 벤치마킹을 했다. ‘최소의 노동 시간으로 최소의 결함을 가진 차를 생산하는 비결’을 알고자 했다. 그 결과 현장 구성원들의 아이디어 하나하나를 의미 있게 받아들이고 실제 경영에 포함 반영해 나가는 능력에 있다는 것이었다. 이를 ‘생각하는 사람 방식’이라고도 한다. 오늘 날처럼 경영 환경의 변화가 다양하고 급속하게 이루어지는 상황에서 대표만의 생각에 의지해 조직을 운영하는 것은 위험한 도박처럼 보인다. 다양한 구성원들의 지혜를 활용하는 모습이 반드시 필요해 보이는 이유이다.다양성을 인정하며 자율성을 보장한다는 것은 실패와 성공 가능성의 범위가 확대된다는 또 다른 표현이다. 즉, 정성적인 판단의 여지가 많아진다는 것이다. 다양성을 넓게 용인하기 위해서는 정량적 평가도 중요하지만 정성적 판단의 여지도 높일 필요가 있다. 정량적 평가는 구성원들로 하여금 목표를 ‘안전하게’ 달성하기 위해 조직 내 관행이나 선임자의 방(self-categorization theory) 및 사회정체성이론(social identity theory)에서는 구성원의 다양성이 가지는 부정적 영향을 강조한다. 나와 다르다는 이질성이 동료들 간 관계형성 및 업무태도에 부정적인 면을 보이면서 창의성 및 혁신을 저해한다. 현대자동차그룹이 지난 10년 동안 외국인 임원과 여성 관리자를 뽑았지만 상당수가 몇 년을 버티지 못했던 것이나, LG전자가 2007년부터 최고책임자급 외국인 임원을 5명이나 뽑았지만 몇 년 지나지 않아 모두 퇴사한 것은 인력 고용의 다양성만 추구한다고 해서 다양성경영이 이루어지는 것은 아니라는 점을 시사하고 있다. 다양성경영에도 전제가 있다. 공통된 기반 하에 다양성경영이 이루어져야 하며, 다양성에 대한 충분한 관리 및 통제가 선행돼야 할 것이다. 다양성을 장려하고 자율을 허용하다 보면, 기존 조직 체계에서 살아남기 힘든 생각들이 나오기도 한다. 다양성을 넓게 껴안으면서 기존의 획일화된 조직을 조금 더 유연하게 운영할 필요가 있다. 그렇다고 전체 조직을 대거 개편하는 등 크게 흔드는 것은 바람직하지 않다. 지족은 한번 흐트러지면 안정화 되는데 시간이 걸린다. 그런 만큼 가급적 기존의 조직 형태는 큰 변화 없이 유연성을 부여할 수 있는 방안을 찾아야 한다. 조직 운영 방식이란 ‘단 하나뿐인 최고의 대안’이 아니라 각자 처한 상황에 맞게 구조와 운영 시스템을 구축하여 천천히 움직이는 노력이 요구된다. 조직의 수많은 생각들을 함께 가지고 가는 것은 결코 쉬운 일이 아니다. 특히 기존의 위계질서에 익숙한 대표와 구성원들의 경우 그렇다. 사람들은 누구나 본인에게 익숙한 방식으로 일처리를 하고 관계를 맺기 때문이다. 그럼에도 변화하는 사회에서 장기적으로 튼튼하게 살아남는 기업이 되려면 다양한 사람들의 생각들을 포용하는 기업으로 변신하는 것이 무엇보다 시급한 과제이다.“금융의 해외진출은 힘들다. 그래서 현대캐피탈은 미국 금융이 되고, 영국 금융이 되고, 중국 금융이 된다. 진출하지 않는다. 그 나라의강조되는 다양성은 ‘낯선’ 것에 대한 이해에서 시작한다. 우리 것을 억지로 전파하려는 것이 아닌 그 나라 자체를 인정하고 장점을 승화하여 사업 성공의 요소로 바꾸겠다는 의지인 것이다. ‘비오는 날 화분에 물을 주고 있는 현지인을 질타하지 않고 그대로를 인정하며 이해하는 마음을 가지는 것’그것에 글로컬경영의 외소 하지만 강한 성공의 토대가 될 것이다. 광고카피와 같이 현대캐피탈의 성공 씨앗은 현지 나라와 조화롭게 어우러져 임직원의 행복감에서 비롯한다.다양성과 차이를 극복하기 위해 글로벌 장수기업들은 공유가치(shared value)와 경영원칙을 제정해 조직원들로 하여금 구심력과 일체감을 형성토록 노력한다. 예컨대, GE Value, Samsung Value, HP Way, Toyota Way, P&G Our credo가 있다. 핵심가치는 전 세계 시장에 진출한 글로벌 기업이 직면하게 되는 다양한 국가 및 지역의 문화나 가치, 규범 등의 차이를 넘어서 전 세계 직원들을 통합시키는 공통의 가치체계이다. 뚜렷한 방향성이 없는 상태에서 다양성을 강조할 경우 잘못하면 회사는 혼란에 빠질 수 있다. ‘사공이 많은 배는 산으로 간다.’는 속담이 있다. 목적지가 뚜렷해야 각자의 관점에 의거해 의견을 조율하며 같은 방향으로 나갈 수 있을 것이다. 핵심가치는 기업 탄생의 기반이 된 창업자의 가치나 새로운 경영환경에서 사업을 수행하기 위해 요구되는 가치들로 구성된다. 또한 명확한 행동규범을 제시함으로써 직원들이 일상 업무에서 직면하는 의사결정이나 일하는 방식을 직접적으로 안내하는 역할을 한다. 핵심가치는 글로벌 기업의 정신으로 전 세계 직원의 사고나 행동의 가이드가 될 뿐만 아니라, 기업의 바람직한 성과에 영향을 주는 행동양식을 형성한다. 진정한 글로벌 기업을 만들고자 한다면 다양성을 존중하는 가운데 핵심가치를 통해 조직 구성원을 하나로 통합하는 것이 필요하다. 대다수의 회사는 어떤 형태로든 핵심가치를 가지고 있다. 실제 경영 현장에서 적용되도록 액자 속에서 잠자고 있는 핵심가치를

경영/경제| 2014.12.24| 8페이지| 2,500원| 조회(166)

인사관리, 다양성, 조직성과

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초현실주의를 말한다.

초현실주의를 말한다초현실주의 창시자 앙드레 브르통 (1896 – 1966) 프랑스의 시인 , 수필가 , 평론가 , 편집자 , 초현실주의 운동의 주동자이자 창시자의 한 사람 ‘초현실’을 “꿈과 현실이라는 모순된 두 상태가 중첩된 절대적 현실성” 으로 규정 자동기술 (automatic handwriting) 목표 : 예술을 거부 , 동시에 새로운 예술 정의 : 자신을 외부와 분리시킨 상태에서 떠오르는 생각을 이성의 통제 없이 가능한 한 빨리 받아쓰는 것 의미 : 즉발적 행위의 가장 작은 요소도 어떤 형이상학보다 더 복잡하고 계시적초현실주의 (surrealism) ? 근거 – 프로이트 (1856 – 1939) 정신 분석학 “ 우리들의 깨어있는 사고가 마비되면 , 우리들 내부에 숨어있는 유아성과 야만성이 대신 지배하게 된다 ” 1919 년경 제 1 차 세계대전 직후 유행한 문학 및 회화운동 . 문학가 ‘ 앙드레 브르통 ’ 이 1924 년에 제 1 차 초현실주의 선언 을 작성 . 다다이즘 운동으로부터 유래된 초현실주의는 이성의 지배를 받지 않는 무의식의 세계 , 공상적인 꿈의 세계를 우선시 . 문화를 파괴하는 다다이즘과는 달리 , 초현실주의는 역사와 문학에 근거 . 초현실주의는 사회에서 소외됐거나 충격적인 사실들에서 출발 , 지성을 해방시키기 위한 움직임 . 이성의 간섭 , 미적 도덕적 목적으로부터 자유로운 진정한 사고의 과정을 표현하는 심리적 자동주의 (psychic automatism) 를 목표 대표 작가 – 살바도르 달리 , 호안 미로 , 막스 에른스트 , 르네 마그리트초현실주의 인위적 분류 호안 미로 , 막스 에른스트 의식의 통제에서 벗어나 즉흥적 화법 실현 자동 기술법 (automatic handwriting) 호안 미로 - 기호 , 상징 , 생물형태적 추상법 (biomorphic abstraction) 막스 에른스트 – 콜라주 , 데칼코마니 기법 살바도르 달리 , 르네 마그리트 주도 면밀한 사실주의적 기법으로 상식에 도전하는 환각적 장면 창조 꿈의 영상을 고정시키기 위해 ‘ 트롱프뢰유 ’ 사용 무의식의 흐름에 자신을 내맡기는 ‘ 자동기술 ’ 과는 달리 ‘ 트롱프뢰유 ’ 는 화가의 능동적 개입 살바도르 달리 – 편집증적 비평 방법 르네 마그리트 – 데페이즈망 ( depaysment ) 기법Joan Miro (1893 – 1983) 초기에 야수파 , 입체파적인 영향에 있었으나 이후 초현실주의에 편입 주제와 소재를 상징화하여 ( 기호와 상징 을 통해 ) 작품 속에 반복적으로 등장시키는 방법으로 자신의 무의식을 구체적 현실로 재구성 생물 형태적 추상법 (biomorphic abstraction) – 살아있는 생명체가 지닌 비정형적인 형태를 도입 , 유동적이고 곡선적인 구성방식 우연을 좇아서 자유자재로 모양을 그려나가는 ‘ 자동기술법 ’ 을 사용하여 추상에 가까운 작품을 제작 사물의 이미지를 가장 단순하게 표현하여 , 가장 명확한 특성만을 전달 아를캥의 사육제 가난 때문에 기아상태에 빠졌던 미로는 그때의 환각을 환상적으로 화폭에 옮김Joan Miro 아를캥의 사육제 1924Joan Miro 새의 날개에서 떨어진 한 방울의 이슬이 거미줄 그늘에서 잠자는 로잘린의 눈을 뜨게 한다 1939Max Ernst (1891 – 1976) 재현된 대상들이 비논리적으로 병렬된 것처럼 보이도록 하기 위해 콜라주 기법을 활용 , 불합리한 정신세계를 이끌어감 “ 부조리한 평면 위에서 전혀 관계없는 두 실재간의 우연한 상봉 ” - 엉뚱한 장소에서 비논리적인 만남 , 시적인 정화를 동반하는 사물을 일상적 이미지에서 이탈 다양한 기법 구사 · 콜라주 : 책 삽화 , 광고지 , 사진 등의 조각 사용 , 불안정한 이미지형성 · 프로타주 : 결이 있는 나무나 천 등에 종이를 대고 연필로 문지르는 기법 · 그라타주 : 뾰족한 도구로 캔버스 표면의 물감을 긁어 질감 표현 · 데칼코마니 : 두 면을 함께 눌러 한쪽 면에 바른 물감을 다른 면으로 전사 , - 우연성 효과Max Ernst 물 속으로 뛰어들기 1919Max Ernst 프랑스의 정원 1962Salvador Dali (1904 – 1989) 초기에 , 프로이트의 정신분석학 을 탐독 , 고전에서 ‘ 사실적인 기법 ’ 과 ‘ 입체파의 화면 구성 ’ 등 회화의 기술과 법칙 연구 1929 년 이후 , 초현실주의에 적극 참여 ‘ 편집증적 비평 방법 ’ – 구체적 비 논리성이 지배하는 정신착란의 세계를 그림으로 구체화할 수 있는 적극적이고 자발적인 방법 ( 무의식의 수동적 표출을 넘어서는 능동적 기획 ) 의식 밑에 숨어 있는 비합리적인 모습을 독자적인 해석으로 파헤쳐 보임 으로써 , 20 세기 이단적인 화가의 대표적 인물로 꼽힘 “ 달리의 예술은 우리가 보아온 것들 중에서 가장 환각적인 것으로 정말 가공할 정도로 놀랄만한 것이다 ” – 브르통 “ 달리의 등장과 더불어 의식의 창문이 최초로 활짝 열리게 되었으며 사람들은 덫에 미끄러져 거꾸로 매달린 느낌을 받았을 것이다 ” – 브르통 “ 어떤 신문이 초현실주의의 정의를 내게 물었다 . 그때 나는 다음과 같이 대답했다 . 초현실주의는 바로 나를 말한다 !! 라고 .” – 천재의 일기 , 달리S alvador Dali 기억의 고집 1931S alvador Dali 내란의 예감 1939Rene Magritte (1898 – 1967) 친숙한 일상의 대상들을 데페이즈망을 통해 낯설게 나타냄 관습적 사고의 거부 , 시각적 충격과 신비감을 불러일으킴 ‘ 친숙한 낯섦 ’ 은 무의식의 수단이라기보다는 의식의 수단 , 즉 논리적 - 철학적 성찰의 수단 데페이즈망 ( depaysement ) 기법 미술상의 초현실주의 기법 어떤 물건을 일상적인 환경에서 이질적인 환경으로 옮겨 , 그 물건으로부터 실용적인 성격을 배제하여 물체끼리의 기이한 만남을 현출시키는 기법 ‘ 환경의 변화 ’ 를 뜻 하는 말로써 , 보는 사람의 감각의 심층부에 강한 충격효과Rene Magritte 이것은 파이프가 아니다 1929Rene Magritte 빛의 제국 1954오브제 (objet ; 물건 , 물체 , 객체 ) 1924 년 브르통은 에세이에서 오브제를 “ 두 개의 경쟁하는 현실들 , 즉 내면의 현실과 외부의 현실을 매개하고 화해하는 도구로 규정 ” 1934 년 브르통은 ‘ 초현실주의란 무었인가 ’ 라는 강연에서 “ 오브제의 탐구가 초현실주의의 가장 첨예한 연구 중 하나 ” 라고 선언 ‘ 대립물의 통일 ’ 이라는 헤겔의 말처럼 , 오브제에서 ( 물리적 대상의 ) 지각과 ( 몽환적 이미지의 ) 상상은 서로 충돌하면서 동시에 하나로 결합 초현실주의는 오브제를 조각과 대등한 위치에 올려놓았고 , 현대조각은 오브제를 기초로 재 규정 현대 회화가 전통적 회화의 규약을 파괴하려 한 것처럼 오브제가 전통적 조각의 관념을 뒤흔듦 대표 작가 : 마르셀 뒤샹 (H.R. Marcel Duchamp ) , 만 레이 (Man Ray)Marcel Duchamp 샘 과 자전거 바퀴Man Ray 선물참고도서 진중권의 서양미술사 , 모더니즘 편 – 진중권 지음 ; Humanist 서양미술사 History of Art for Young People – H.W. 잰슨 A.F. 잰슨 지음 ; 미진사 청소년을 위한 서양미술사 – 박갑영 지음 ; 두리 미디어 논술세대가 알아야 할 서양미술사 – 넬리 브뤼넬레날 지음 ; 지엔씨 미디어 네이버 블로그{nameOfApplication=Show}

인문/어학| 2012.07.25| 20페이지| 2,500원| 조회(228)

초현실주의, 현실주의, 오브제, Salvador Dali, 앙드레 브르통, Joa..

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유전자적중법(gene targeting)의 3가지 평가A+최고예요

1. Team Logo : ex) 뜨랑스2. Definition :Gene targeting is a genetic technique that uses homologous recombination to change an endogenous gene. Also called replacement strategy based on homologous recombination (source : wikipedia)3. Contribution :The gene targeting or knockout mouse made it possible to reverse the genetic approach to elucidate gene function compared to the classical forward genetics.Thus, it is "reverse genetics" that allows us to conduct the "gene-driven mutagenesis" in the mosuegene targeting 혹은 knockout mouse는 유전자돌연변이 유발 생쥐를 인위적으로 만들어,교배와 표현형을 통해 생물학적 기능을 밝혀낸다.(source :Next-generation gene targeting in the mouse for functional genomicsYoichi Gondo*, Ryutaro Fukumura, Takuya Murata & Shigeru MakinoMutagenesis and Genomics Team, RIKEN BioResource Center, 3-1-1 Koyadai, Tsukuba, Ibaraki 305-0074, Japan)4. Type - Gene TargetingI) Knock out : homologous recombination 으로 endogenous gene 변형(특정 유전자 발현 제거) cf 1) flanking region 에 대해 알아야 할 것..!!cf 2) 2007 Novel PrizeII) Knock in : homologous recombination 으로 endogenous gene 변형(특정 유전자의 mutation이 도입)III) Knock down : short pieces(guide RNA, si RNA) of double-stranded RNAshort pieces=guide RNA=si RNA(short interfering RNA) 모두 동일한 단어i)si RNA는 RISC(RNA Induced Silencing Complex)형성ii)서열 특이적으로 mRNA분해iii)유전자 발현 억제(silencing)5. comparison of Knockout & Knock-inKnockout and Knock-in Mice.A gene-targeting vector (left panel) is constructed to delete a specific exon of a gene in embryonic stem cells. Several kilobases of DNA on either side of the target gene are cloned around a drug-selection marker. After the cloned DNA (targeting vector) is introduced into the stem cells,positive and negative drug selection occurs in culture. The left panel shows a targeting vector that was constructed with loxP sequences flanking the positive drug-selection gene. Cre recombinase can delete the DNA sequence between the loxP sites, thereby deleting a specific gene in the embryonic stem cells.Knock-in mice (right panel) are generated by replacement of an endogenous exon with one harboringa mutation of interest. The gene-targeting strategy is similar to that used for knockout mice, except that a replacement exon (indicated by a star) is exchanged with the endogenous exon. Cre?.loxP strategies can delete most traces of the targeting vector. Once the desired stem-cell clone is selected, it is injected into a blastocyst, which is implanted into the uterus of a foster mother. If the gene-targeted stem cells contribute to germ cells in the chimeric mice, subsequent offspring will harbor the gene-targeted mutation (germ-line transmission)(source : n engl j med 357;24 www.nejm.org december 13, 2007)6. Knock down (= RNAi) mechanism(source : RNA interference,2006 Novel Prize)7. The Review on KnockoutThe Nobel Prize in Physiology or Medicine 2007jointly toMario R. Capecchi, Martin J. Evans and Oliver Smithiesfor their discoveries of“principles for introducing specific gene modifications in mice by the use of embryonic stem cells”Step1.1. ES cell culture쥐 배반포의 배아줄기세포를 배양2. Construction of targeting vectori) 목표(target) 유전자와 상동 DNA조각 포함해야 함ii) 삽입DNA는 target gene을 바꿀(change) 수 있어야 함iii) 양성-음성 선택(positive-negative selection)이 가능해야 함3. ES cell transfection상동 재조합에 필요한 세포조작(machinery)으로 target vector가 target gene을(i)찾아(find)내어, (ii)재조합(recombination)을 가능케 함4. Proliferation of targeted ES cell"네오마이신내성유전자 존재, HSV-티미딘인산화효소유전자 부재" 유전자 선택(즉, positive-negative selection)으로 의도된(targeted) 배아줄기세포 배양(enrich)Step2.5. Injection of ES cells into blastocystsi) 표적화(targeted)된 배아줄기세포를 정상 쥐의 배반포에 주입ii) 정상 쥐의 내세포괴세포와 섞여(mix) 모자이크(mosaic) 형성iii) 대리모에 삽입하여 잡종(mosaic) 배아 성숙6. Birth and breeding of mosaic micei) 잡종(mosaic) 생쥐를 정상 쥐와 교배하여,ii) 유전자 표적화(targeted)된 쥐[Knockout mouse]와 정상 쥐[Normal mouse] 자손 생산iii) 이때 표적화 유전자(targeted gene)는 불활성화 됨Step1 . genes could be targeted by homologous recombination in cultured cellsStep2 . the necessary vehicle to the mouse germ line ? the ES-cellsThe next step was to combine the two. !!2007년 노벨생리 의학상은 step1과 step2의 조합(combine)으로 주어졌다. 즉 step3->포유동물에서 배아줄기세포, DNA재조합 관련 ground breaking(“매우” 놀라운) 발견Step1. 상동 재조합은 포유동물 세포 내 유전자를 특이적으로 변형시키는데 사용가능,즉 내부 유전자는 상동재조합에 의해 표적화(targeted) 될 수 있다.Step2. 마우스 생식선으로 유전물질을 전달케 하는 수단(vehicle)으로 배아줄기세포 사용,

공학/기술| 2012.06.03| 5페이지| 2,000원| 조회(585)

genetargeting, knockout, knockin, knockdown, nobelprize

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형질전환동물과 후성유전학

형질전환동물의 후성유전학Telomeres… Dolly is not the normContents Epigenetics ? Methylation ? Transgenesis ? Reprogramming ? Methylation dynamics ? De novo / active / passive methylation ? Aberrant(=hyper) methylation ? Genomic imprinting ? Enzymes involved ? Incomplete reprogramming offspring ?Epigenetics ? A heritable phenotype resulting from changes in a chromosome without alterations in the DNA sequence Epigenetic mechanisms are considered to play major gene-regulatory roles in development, differentiation and disease DNA methylation is an epigenetic mechanism in which the methyl group is covalently coupled to the C5 position of the cytosine residue of CpG dinucleotidesEpigenetic Mechanism for Repressing Transcription - Gene repression - Control of cellular differentiation and development ( 세포분화 및 발달의 조절 ) - Maintaining the conformation and integrity of the chromosome ( 염색체의 구조와 온전성 유지 ) - Imprinted genes - Inactivation of X chromosome - Genome defense against surreptitious mobile genetic elemthe methylated cytosine which recruits histone deacetylases (HDAC).Transgenesis The transmission of a mutation using the cloning technique. The fetal cells in which gene addition or replacement occurred are used to generate living embryos after transfer into enucleated oocytes. The mutation is transmitted to progeny .Causes of abnormalities Placental malformation Somatic cell reprogramming, DNA methylation Telomere length Incomplete reprogramming of epigenetic signals Epigenetic properties of clones and offspring Aberrant and variable patterns of global DNA methylation in clones: clones are epigenetically modified animals due to (reversible) genome reprogramming defectReprogramming ? Genome-wide demethylation occurs during early development, ‘erasing’ gamete-specific methylation patterns inherited from the parents This process may be a prerequisite for the formation of pluripotent stem cells that are important for the later development These epigenetic programs can be largely reversed ation of the maternal genome De novo methylation occurs at the blastocyst stage Differential methylation between the inner cell mass (ICM) and the trophectoderm (TE) In cloned embryos, some demethylation takes place by the blastocyst stage, after nuclear transfer but before de novo methylation , and there is aberrant methylation ( hypermethylation ) In cattle, there is active and passive demethylation followed by de novo methylation at the 8- to 16-cell stage. In cloned embryos, precocious de novo methylation takes place at the four cell stage, and the TE is hypermethylated .Reprogramming of DNA methylation patterns Active demethylation Passive demethylation by the failure to maintain methylation patterns after DNA replication Spurious de novo methylation Increased level (Hetero-) / comparable level ( Eu -) Inefficient passive demethylation in cloned embryosactive passive demethylations When half of the methyl groups are lost with every round of replication , full double-stranded demetramming 3. After fertilization , active and passive demethylations happen in parental specific manner 4. De novo methylation happens significantly during both roundsBypass reprogramming … Problems ? The frequency and severity of abnormal phenotypes increase after interfering with or bypassing essential steps of gametogenesis , early embryogenesis, or both. Nevertheless, it is plausible that normal fertilization, assisted reproduction, and embryo cloning are all susceptible to similar dysregulation of epigenetic components .Aberrant methylation Aberrant epigenetic phenomena in early cloned embryos indicate that parts of the somatic cell genome are unyielding to reprogramming forces, owing to their ‘knotty’ epigenetic features. Aberrant genome-wide DNA methylation in early embryos may be an important mechanism contributing to the high incidence of developmental failure in mammals. Similar to the situation in abnormally methylated embryos from nuclear transfer, it may cause a high incidenIncomplete reprogramming 원인 DNA methylation chromatin modification X-chromosome inactivation expression of imprinted and non-imprinted genes 결 과 higher rates of pregnancy loss difficult parturition ( 출산 ) higher rates of post-natal mortality some specific clone-associated phenotypes in adulthoodIncomplete reprogramming offspring Overall Growth Hill et al. 2000 Overall Growth Eggan et al. 2001Incomplete reprogramming offspring Placental Insufficiencies De Sousa et al. 2001 Cerebral Effects Lee et al. 2004Incomplete reprogramming offspring Health problem (Kidney) Shimozawa et al. 2006 Health problem http://www.geocities.com/uconnyanglabReference A Concise Review on Epigenetic Regulation: Insight into Molecular Mechanisms Epigenetic Reprogramming: How Now, Cloned Cow? Methylation Dynamics in the Early Mammalian Embryo: Implications of Genome Reprogramming Defects for Development Reprogramming DNA methylation in the preimplantation stage: peeping with Dolly’s eyes Aberrant Methylation Patt}

공학/기술| 2012.06.03| 23페이지| 3,500원| 조회(194)

염색체, 형질전환, 형질전환동물, 세포분화, methylation, 후성유전, re..

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줄기세포배양법

줄기세 포 배양 씨트 시즌 2 ( CCT Season2) 즐 기세 for culturing줄기세 포 , 그것의 메타 포Contents Intro Episode 1. 줄기세포 채취법 Episode 2. 배양준비 Episode 3. 계대배양 Episode 4. 배양환경 Episode 5. 줄기세포 증식 Episode 6. 동결 보존 ReferenceIntroEmbryonic stem cell ?? Self-renewal ( 자가 증식 능력 ) Pluripotency ( 전분화능 ) Normal karyotype ( 핵형 ) There are no major structural changes in the chromosomes Oct-4 protein and other unique markers on the cell surface. Oct-4 는 ESC 특유의 전분화능 조절인자Stem cells .. Where come from ?Blastocyst … What’s it ? How big ?Hierarchy of stem cells during differentiation줄기세포 얻는 3 가지 방법 거시적 방법Key for culturing Subculturing 어느 정도 증식되어 세포집단을 이루게 되면 분화가 시작되기 때문 Feeder layer 영양분 공급 배아줄기세포의 증식 도움 , 분화 억제 ‘05.5 황우석 박사 사람에서 유래한 feeder layer 로 배양 성공Episode 1. 줄기세포 채취법배아 파괴않고 줄기세포 채취 (ACT) 8 세포 배아에서 세포 하나를 채취 (PGD 기술 ) 분리된 1 개 할구세포 ( 화살표 ) 배양 배양액에 라미닌 첨가 , 성공률 : ‘08 20% = ‘06 2%ACT 사 방법 : 배아 파괴않고 줄기세포 채취배아 파괴않고 줄기세포 채취 (MIT) ANT ; Altered Nuclear Transfer 변형 체세포 핵 이식 방법 쥐의 난자에서 “DNA 가 담긴 핵 ” 을 제거하고 (cdx2-deficient), 쥐의 “ 체세포entiation into some specific cell typesSigns of differentiation Differentiation cause : i ) low feeder quality ii) inappropriate feeder density iii) low LIF concentration large colonies with necrotic centres , these appear as cells with defined boundaries colonies appear as individual cells rather than as social mass often cell nucleus is clearly visible these cells at the colony's edge appear dark and spiky flattened colonies that appear as single-cell layers surrounded by a circle-like boundaryhESC modeled as an unstable steady state Different factors maintain the steady state by preventing differentiation along different pathsStem cell SignalDifferentiation inhibitory factor (1/2) (source : wikipedia ) Leukemia inhibitory factor Removal of LIF pushes stem cells toward differentiation But they retain their proliferative potential or pluripotency Therefore LIF is used in mouse embryonic stem cell culture It is necessary to maintain the stem cells in an undifferentiated state others On form embryoid bodies, they begin to differentiate spontaneously. They can form muscle cells, nerve cells, and many other cell types. Although spontaneous differentiation is a good indication that a culture of embryonic stem cells is healthy, it is not an efficient way to produce cultures of specific cell types.Why … passaging cells (2/2) Over the course of several days, the cells of the inner cell mass proliferate and begin to crowd the culture dish. When this occurs, they are removed gently and plated into several fresh culture dishes. The process of replating the cells is repeated many times and for many months, and is called subculturing . Each cycle of subculturing the cells is referred to as a passage. After six months or more, the original 30 cells of the inner cell mass yield millions of embryonic stem cells. Embryonic stem cells that have proliferated in cell culture for six or more months without differentiating, are pluripotent , and appear genetically normal are referred tord xeno -free conditions (1/5) ECM ( extracelluar matrix) like Matrigel , laminin , fibronectin , collagen IV, human serum KO-SR (Knock Out-Serum Replacement) : bFGF 첨가 instead of FBS, FCS 인간유래 영양세포층 : mTeSR1 (e.g. foreskin, FS : 포피세포 /fetal muscle, FM : 태아근육 ) instead of MEF 인간 양수 세포 (human amniotic fluid cells) : 태아기형여부확인 산전진단 줄기세포 잠재능력 = 윤리적 문제 극복 Feeder-free : defined medium, conditioned medium( 영양세포배양액 : 영양세포층배양후 ) (e.g. MEF-CM : 생쥐배아섬유아세포 영양세포배양액 )Toward xeno -free conditions (2/5) Conditioned medium 영양세포층 사용 배제 영양세포층에서 생산되는 다양한 수용성 요소들이 인간 배아줄기세포의 생존과 성장에 중요함을 전제 CM + ECM MEF-CM + Matrigel CM + hES-dFs Defined medium 구성을 정확히 알 수 있는 배양액 X-Vivo 10 + bFGF +SCF + flt3 + LIF Activin A + bFGF TeSR1 : human-sourced recombinant ptns + purified material from humanToward xeno -free conditions (3/5) from FBS (Fetal Bovine Serum, 소 태아 혈청 )Toward xeno -free conditions (4/5) to mTeSR1xeno -free 배양의 문제 (5/5) xeno -free 를 위해 첨가되는 재조합 단백질 및 인간유래 정제 물질들의 비용 효율성 문제 새로 만들어진 환경에서 자가증식과 전분화능 같은 인간 배아til colonies float off when flicking the plate transfer trypsin /cell suspension to a sterile falcon trypsinize for a few more minutes at 37°C dissociate colonies into single cells by pipetting Step I 설 명 세포군을 물리적으로 Medium 과 분리 PBS 로 씻어 부유 단백질 제거 Trypsin /EDTA 첨가 , 부착세포 잘라냄 세포 배양기에 배양 (37°C) Trypsin /cell 현탁액을 멸균용기에 옮김 Trypsin 화 (37°C : enzyme 이기 때문 ) colonies 를 single cells 로 분리Process freezing ES cells (2/2) Step II add several ml of medium to inactivate the trypsin , pellet cells by low-speed centrifugation remove supernatant , resuspend cells in appropriate volume of pre-cooled freezing medium immediately transfer into freezing vials on ice Transfer vials into pre-cooled styrofoam box and then to a -80°C freezer. (quickly) transfer cells to a liquid nitrogen freezer Step II 설 명 medium 처리 후 원심분리 : trypsin , pellet 불활성화 ( competitive inhibition ) 상층액 제거 저온 medium (10%DMSO) 에 세포 재부유 즉시 , 얼음 위 저온 유리병에 옮김 유리병을 저온스티로폼박스에 옮긴 후 -80°C freezer 에 옮김 ( 빠르게 ) 세포를 액체질소냉동장치에 옮김Embryonic stem cellhow}

자연과학| 2011.05.26| 56페이지| 4,000원| 조회(394)

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