Scuba diving in terms of pressure목 차압 력 ( Pressure ) 이 란? - 압 력 의 종 류 - 수 심 과 부 피 인 체 와 압 력 - 체 내 압 착 의 종 류 - 폐 의 과 도 팽 창 * 폐의 과도 팽창으로 인한 현상 - 조심해야 할 질병 유 의 사 항압 력 ( Pressure ) 이 란?기체 혹은 액체에서 단위면적당 작용하는 힘 압력 = 단위는 N/m2 , mmHg , hpa SI 단위로는 파스칼(pa) [1pa = 1N/m2 ]힘(F)면적(A)대기압 : 지구대기의 무게에 의해 작용되는 힘( =압력) 표준대기압(=1atm) :0˚c, 해수면에서 정확히 수은기둥 760mm를 지탱하는 압력. 1atm = 760mmHg압 력 의 종 류압 력 의 종 류수 압 : 물이 누르는 힘 수면에서부터 다이버가 위치한 수심까지 누적된 물 분자의 무게 약 10m 수심마다 1대기압과 같은 압력이 추가된다. Ex) 물 밑으로 20m를 내려가면 이때 받는 수압은 2기압.절 대 압 : 실제로 다이버가 수중에 머 물때 영향을 받는 압력 절대압 = 대기압 + 수압 ex) 다이버가 수심 30m에 존재할 때, 수압 3기압 + 대기압 1기압 = 4기압압 력 의 종 류대기압수압다이버수 심 과 부 피보일의 법칙 : 일정한 온도에서 기체의 부피는 기체의 적용된 압력에 반비례한다. PV = k (상수)수 심기압부피0m1110m21/220m31/3수심과 부피는 반비례한다인 체 와 압 력인간은 그 주위를 둘러싸고 있는 압력과 거의 같은 압력의 공기가 아니면 호흡을 할 수 없다. Ex) 우리가 수중에서 받는 압력이 2기압이라고 할 경우, 빨대를 통해 수면에서 1기압의 공기를 마시려고 한다면 폐가 압착되어 숨을 쉴수가 없다.?압 착 증( Squeeze ) : 다이버가 수중하강을 시작할 때 다이버 체내에서 폐쇄된 공기공간이 외부의 압력변화에 의해 수축되는 현상. 압착된 부위의 압력이 주위의 압력과 같아지도록 추가적인 기체 공급이 필요. 압력평형( Equalizing )인 체 와 압 력체 내 압 착 의 종 류귀 압 착 해 결 방 법 : 팝 핑 ( Popping )수압공기++수압수압+체 내 압 착 의 종 류부비동비강부 비 동 압 착부 비 동 압 착 :감기, 알레르기, 축농증 등에 의해 코의 비강 개구부가 막히게 되면 팽창된 공기가 비강 개구부를 통해 빠져나가지 못하게 되어 발생한다.체 내 압 착 의 종 류증상 :부비동의 통증 출혈발생치 아 압 착 :치아압착은 치과에서 충치, 치아의 잘못된 치료로 치아내부에 공기공간이 만들어졌을 때, 스쿠버다이빙을 하게되면 발생합니다.체 내 압 착 의 종 류공기공간증상 : 치아에 통증, 출혈폐 압 착 : 하강 할 때, 수압으로 인해 폐의 부피가 평상시 공기 잔유량보다 작아지게 된 경우 발생한다. - 스쿠버 다이빙은 레귤레이터가 있어서 평소대로 숨을 쉴수가 있다. ☆폐압착은 상승하면 원상복귀 되기에 크게 문제 되지 않는다.체 내 압 착 의 종 류내 장 압 착 :어떤 음식물은 인체에 소화되는 동안 가스를 발생시키는데 이러한 음식물을 섭취하고 다이빙을 실시했을 경우에 발생한다. 증상 : 복부에 통증, 조직이 상할수 있음.체 내 압 착 의 종 류폐 의 과 도 팽 창내부공기팽창폐조직이상폐의 과도 팽창을 방지하기 위해서는... 1. 도중에 멈추지 말고 계속 호흡하기. 2. 위를 보고 기도를 개방한 상태로 상승하기. (“아”소리를 내면 쉽다.)비상 상승시기 흉 ( pneumothorax )폐의 과도 팽창으로 인한 현상심장심장늑막강공 기 색 전 증 :폐의 과도 팽창으로 인해 폐가 파열 되어 폐 속 공기가 혈관 속에 들어가게 되면 공기 색전을 일으켜 혈류를 멈추게 할 수 있다.폐의 과도 팽창으로 인한 현상질 소 마 취 : 질소는 높은 압력에서 환각작용이 일어나게 하기 때문에 판단력이 둔해지고, 엉뚱한 행동을 하게 된다. ☆수심 30m부터 발생할 가능성이 높다.조심해야 할 질병감 압 병 ( 잠 수 병 ) :압력의 영향을 받아 질소가 혈액 속에 용해되었을 때 너무 빠르게 상승하면 용해되어 있는 질소가 혈관 내에서 갑자기 기화되어 혈관을 차단하는 등의 심각을 초래할 수 있다. 증상 :관절에 통증이 오거나 숨쉬기 힘들어짐.조심해야 할 질병압력 평형 방법은 하강과 동시에 시작하여 자주 하는 것이 좋다. 숨은 일정하게 쉬며 절대로 참아서는 안된다. 너무 깊은곳에서 오랫동안 다이빙하지 않는다. 상승속도(9m/1min)는 반드시 지켜야 한다.유 의 사 항{nameOfApplication=Show}
PCR(Polymerase chain reaction)-PCR의 3단계-1. DNA의 변성(Denaturation)90~96℃로 가열하여 double strand DNA(dsDNA)를 single strand DNA(ssDNA)로 분리시킨 다. 높은 온도일수록 ssDNA로 잘 이행되지만 Taq DNA Polymerase로 온도가 아주 높은 상 태에서는 활성이 낮아질 수 있으므로 보통 94℃에서 한다. 첫 cycle에서는 확실한 변성을 위하여 약 5분간 지속시키도록 한다.2. Primer의 결합(Annealing)50~65℃에서 진행한다. 염기간의 결합은 G와 C에서는 세군데에서 수소결합이 일어나고 A 와 T에서는 2군데에서 수소결합이 일어나므로 G+C 비율에 따라 결합온도에 변화를 주는 것 이 좋다. annealing 온도는 반응의 정확성을 결정하는 중요한 요소인데 만약 온도를 너무 높게 하면 primer가 template에 너무 약하게 결합되어서 증폭된 DNA의 산물이 매우 적어진 다. 또 만약 온도를 너무 낮게 하면 primer가 nonspecific 하게 결합하기 때문에 원하지 않 는 DNA가 증폭될 수 있다.3. DNA의 합성(Polymerization)70~74℃에서 시행하며 열에 강한 DNA polymerase가 template DNA에서 새로운 DNA를 만 들게 된다. 원하는 PCR의 산물의 크기가 크거나 반응요소의 농도가 낮을 때에는 시간을 연 장하는 것이 좋다. Taq DNA Polymerase는 보통 1분에 2,000~4,000nucleotide를 합성할 수 있으므로 원하는 PCR 산물의 크기 1kb마다 1분정도의 시간을 배당하면 충분히 반응이 일어날 수 있다. cycle이 계속되면서 효소활성이 감소할 수 있고 DNA산물은 점점 많이 존재하게 된다.RT-PCR (Reverse transcription PCR)이 기술은 PCR을 위한 template로써 DNA가 아닌 RNA를 사용한다. 먼저 RNA template를 reverse transcriptase를 이용해 single strand의 cDNA(complementary DNA)로 reverse transcription시킨다. 그 후 PCR primer와 Taq polymerase를 첨가하고 일반 PCR의 방식대로 진행한다. RT-PCR은 크게 세 단계로 구분되는데RNA 분리 → cDNA 합성 → PCR amplification 이며, cDNA를 합성한 후 RNA-DNA strand에서 RNA는 제거되어야 한다.Real time PCRHermal cycler와 분광 형광 광도계가 일체와된 장치로, 실시간으로 PCR의 증폭산물의 생성과정을 모니터링하여 target DNA의 양을 분석하는 장비로 전기영동이 필요없고, 반응 cycle 도중에 증폭산물을 확인할 수 있으며, 정량적인 결과를 얻을 수 있는 이점을 가지고 있다.(1) Interchelating 법Double strand DNA에 결합하여 형광을 나타내는 시약 (Interchelator : SYBR Green I, EtBr 등)을 반응계에 첨가하여 증폭과 함께 발색하는 형광을 검출하는 방법이다. Polymerase반응으로 합성된 double strand DNA에 interchelator가 결합하면 형광을 나타 내는데 이 형광강도를 검출하여 정량 뿐 아니라 증폭 DNA의 융해온도를 측정할 수 있다.(2) TaqManTM probe법5’말단을 형광물질(FAM 등)로, 3’말단을 quencher 물질(TAMRA 등)로 수식한 oligonucleotide를 첨가한다. Anealing 조건하에서 Taq ManTM probe는 template DNA와 특이적으로 hybridization하지만 형광은 quencher 에 의해 억제되어 있다. Extension 반응 시 Taq DNA polymerase가 가진 5’→ 3’ exo-nuclease 활성에 의해 template가 분해되고 capture에 의한 억제가 해소되어 나타나는 형광을 검출하는 방법이다.(3) Molecular Beacon법양 말단을 형광물질(FAM, TAMRA등)과 quencher 물질(DABCYL등)로 수식한 헤어핀형 2차 구조를 만드는 oligonucleotide probe (Molecular Beacon probe) 반응계에 첨가한다.Molecular Beacon probe는 annealing 조건 하에서 template와 상보적인 영역에 특이적으 로 hybridization한다. 이때 형광물질과 quencher 물질과의 거리가 멀어져 quencher 물질 에 의한 억제가 해소되어 나타나는 형광을 검출하는 방법이다.또한 hybridize하지 않았던 Molecular Beacon probe는 2차 구조를 가지고 있어 quencher 물질에 의해 억제되어 있어 형광을 나타내지 않는다.Hybridization이중나선구조로 되어있는 DNA의 경우 온도를 높이면 두 가닥이 떨어지게 되는데 이를 Denaturation이라고 한다. 다시 온도를 낮추면 염기의 상보적인 결합 때문에 다시 서로 붙게 되는데 이것을 Nucleic acid hybridization이라고 한다. 위와 같은 원리는 실험적으로 특정 DNA 혹은 RNA의 일부를 이용하며 염기서열을 분석한다든지 하는 Nucleic acid characterization에 자주 이용된다.(1) Southern hybridization ⇒ DNA- DNA recombination, insertion, deletion 등을 검증- 원리 : Total cell DNA mixture는 95℃에서 denaturation되어 이중가닥이 단일가닥으로 변화.→ DNA single strand에 radioactive DNA probe를 부착.( specific한 cell DNA sequence가 존재시에 부착. )→ 온도를 65℃로 낮추면 renaturation됨.- 방법 : DNA 추출 및 제한효소 처리 → Agarose gel electrophoresis→ NC filter로 DNA 전이 → Hybridization → Autoradiography &X-ray film현상(2) Northern hybridization ⇒ RNA- RNA-mRNA, RNA-DNA(3) Western hybridization ⇒ 단백질- protein - Ab- 여러 단백질의 혼합물로부터 어떤 특정 단백질을 찾아내고 정량하는 기법.- 민감성이 큼 → 미량검출이 가능.- 유전자 발현의 정도, 특정단백질의 추적과 정량, 새로운 단백질 규명- 분석하고자 하는 단백질을 SDS, urea 또는 2-mercaptoethanol(환원제)로 용해→ SDS-PAGE에 걸어서 전기영동 (coomassie brilliant blue로 염색해서 봄.)→ nitrocellulose 또는 nylon membrane으로 옮긴 후, membrane에서 항원-항체반응 을 이용해서 단백질을 찾아냄.(항체는 방사성동위원소, 형광색소, 특정효소를 결합시킨 것을 사용)SSCP (Single Strand Conformation Polymorphism)어떤 입자들의 전기장 내에서의 이동속도는 그 입자의 크기와 형태에 영향을 받는다. single strand DNA는 non-denaturing 조건하에서 분자내의 상호작용에 의하여 2차구조를 형성하 게 되는데 이 2차 구조는 DNA의 염기서열에 의하여 결정된다. 그러므로 DNA 염기서열중 하나의 염기서열의 변화(point mutation, deletion or insertion)에 의해서도 전기영동상 전개 되는 속도에 영향을 받으므로 이동거리에 차이가 발생하게 된다. 이와 같은 원리를 바탕으 로 SSCP는 유전자의 돌연변이를 검색하는 유용한 도구로서 사용
※RIA(Radioimmunoassay) : 방사성물질로 표지한 Ag과 그에 대해 만들어진 Ab와의 결합이 비표지Ag의 첨가에 의해 경쟁적으로 결합(⇒ RI로 표지한 Ag 사용)※IRMA(Immunoradiometricassay) : 검체 중의 Ag을 고상화 Ab와 결합시키고 이어 표지Ag 을 가해서 Ab와 결합하고 있는 Ag에 결합시킨 다음 유리표지Ab를 제거하고 방사능 측정(⇒ RI로 표지한 Ab 사용)검사명HAV Ab IgG검사이론HAV Ab IgG는 HAV Ab IgM보다 늦게 나타나서 수년간 혹은 평생 높은 역가로 지속된다.HAV Ab IgG만 양성일 때는 과거의 HAV 감염을 의미한다.검사원리RIA검사재료serum, kit검사과정1. control과 serum을 well에 넣는다.2. 125I-Anti-HAV sol.을 각각의 well에 넣는다.3. 각각의 well에 HAV Ag이 코팅된 beads를 넣는다.4. 약 40℃에서 4시간동안 incubation5. Washing6. beads를 tube로 옮겨 ?-counter검사결과Dose가 올라갈수록 CPM은 감소검사명HAV Ab IgM검사이론HAV Ab IgM는 감염초기에 나타나며 높은 역가는 급성감염을 의미한다검사원리IRMA검사재료serum, kit검사과정1. 희석된 serum (1:200)과 control을 well에 넣는다.2. 각각의 well에 specimen dilute를 넣는다.3. beads를 각각의 well에 넣는다.4. 약 40℃에서 1시간동안 incubation5. Washing6. HAV sol.과 125I-Anti-HAV sol.을 각각의 well네 넣어준다.7. 약 40℃에서 4시간동안 incubation8. Washing9. beads를 tube로 옮겨 ?-counterNegative controlPositive controlsampleNegative control10㎕10㎕10㎕Positive control10㎕10㎕희석된 sample10㎕Beads1개1개1개1개1개1개Diluent sol.200㎕40℃에서 1시간동안 incubation후 washingHAV sol.100㎕100㎕100㎕Tracer100㎕100㎕100㎕40℃에서 4시간동안 incubation후 washing, transfer the bead into tube검사결과Dose가 올라갈수록 CPM은 증가검사명Renin검사이론혈장 renin 효소활성을 레닌기질과 함께 반응하여 생성되는 AngiotensinⅠ의 양을 측정한다.증가 : 신혈관성 고혈압증, 요붕증, 에디슨병, 칼륨결핍감소 : 순환혈액량 증가, 원발성알도스테론증, 저레닌본태성고혈압검사원리RIA검사재료serum, kit검사과정1. pH용액과 serum을 개별 당 두개씩2. Inhibition A sol.을 넣어준다. → AngiotensinⅠ3. 각각의 검체를 37℃와 4℃에서 1시간동안 반응4. beads를 넣고 mix후, 실온에서 3시간 반응5. Washing후 countstandardcontrol & sample0 standard100standard*************00pH sol.202020202020표준조정액*************00100mixingcontrol & sample제 1반응 (효소반응) 끝난 검체 그대로 사용Tracer*************00100100100100bead 넣고 mixing 후 실온에서 3시간 반응washing 후 count검사결과Dose가 올라갈수록 CPM은 증가
*검사이론 : Total lipid는 cholesterol, triglyceride, phospholipid와 미량의 free fatty acid를 포함한다.-증가 : 본태성 고지혈증, 당뇨병, 갑상선기능저하증-감소 : 간 실질장애, 간경변, 갑상선기능항진증*검사원리 : Sulfophospho Vanillin법지질 H2So4로 산화처리하여 keton body를 형성하게한 후 이를 phospho-vanillin 시약으로 발색시켜서 나타난 적자색을 540nm에서 측정*검사과정 : 1. 검체, Blank, Standard를 tube에 10㎕넣는다.2. 각각의 tube에 sulfric acid를 1㎖씩 넣는다.3. 100℃ 20분간 끓이고 식힌다.4. kit의 발색시약을 2㎖ 넣어준다.5. 15분이 지난 뒤 UV 530nm에서 reading*검사결과 :× 600㎎/㎗*검사이론 : Ketonbody는 지방이 분해되면서 간에서 생성되는 물질이다. 당뇨병 등 어떠한 원인에 의해 당을 에너지로 이용하는데 방해를 받으면 지방에서 지방산을 만들 어서 에너지로 이용하게 된다. 이 지방산이 간에서 ketonebody로 변하게 된다.-증가 : 당뇨병성 케톤산증*검사원리 : Rothera-요시가와변법 ⇒ 비색법Nitropusside 시약을 이용한 색의 변화 유무 검사*검사과정 : Nitroprusside 분말 5㎎ + 황산암모니아 10g + 무수탄산나트륨 10g+ 검체*검사결과 : positive - 진한갈색negative - 변화없음*검사이론 : Epinephrine, Norepinephrine의 최종대사산물이므로 부신수질 chromium친화성 세포 유래 종양인 갈색세포종 또는 교감신경 유래인 신경모세포종에서 VMA의 요중배설량은 증가한다.-증가 : 갈색세포종, 교감신경아세포종, 신경절신경종-감소 : 자율신경실조증, 신부전*검사원리 : Sato법 ⇒ 비색법VMA의 phenoxy group과 diazo화된 paranitroaniline이 반응하여 적색을 형성*검사과정 : 1. negative, positive control과 검체를 1㎖씩 tube에 분주한다.2. 0.1% paranitroanilin 500㎕씩 각각 분주하고 mix3. 0.2% Na2No2를 500㎕씩 각각 분주하고 mix4. 10% Na2Co3를 1㎖씩 각각 분주하고 mix5. 색비교*검사결과 : positive - 진한적갈색negative - 적갈색*검사이론 : Porphyrin체의 전구물질로 납중독 환자에서 δ-ALA탈수효소 등에 장애가 생겨 혈 중 δ-ALA농도가 상승되고 뇨중 배설이 증가된다.-증가 : 급성 간헐성 porphyria, 이형성 porphyria, 유전성corproporphyria,납중독, 선천성 골수성 porphyria*검사원리 : Urine에 Acetate buffer(pH6.0)을 넣고 color tue에는 Ethyacetoacetate를 넣어 반응시킨 후 UV/VIS spectroscopy를 이용하여 553nm에서 정량한다.δ-ALA는 ethylacetoacetate와 축합반응을 하여 pyrrole을 형성하고 이를 ethyl acetate로 추출한 다음 Erlich시약과 반응하여 진홍색을 띈다.*검사과정 : 1. 검체 하나당 두개의 tube에 1㎖씩 분주, Blank, Standard 준비2. 모든 tube에 Acetate buffer 1㎖씩 분주3. Ethyl acetoacetate 200㎕씩 colordhk standard에 넣고 mix4. 10분간 100℃에서 heating5. 식힌 후 Ethylacetate 3㎖씩 넣고 mix6. 2000rpm에서 3분간 centrifuge7. 상층액 2㎖씩 따서 미리 준비한 tube에 옮긴다.8. Ehlich시약 2㎖씩 넣고 mix9. 10분동안 반응 후 553nm에서 흡광도 reading*검사결과 : T.V(24hr)×결과값*검사이론 : Indocyanine Green이 혈중에 주입되면 대부분이 α1-lipoprotein과 결합하고, 간 외에서 대사 및 배설을 거의 받지 않고 간세포에서도 포합되지 않고 담즙으 로 배설된다.※검체 채취방법ICG-R15: 투여후 15분에 혈중 잔존 ICG 양을 측정ICG 주사전과 주사후 15분 채혈=>총 검체 2개, 차광- 간 절제 후 간 기능검사에 이용*검사이론 : Hippuric acid는 toluene의 대사산물로 toluene에 노출 시 가벼운 피로감과 무력 감, 의식혼탁 등의 증상이 나타나며 만성 중독기 중추신경을 억제시킨다.※대사과정호출 ← Toluene → Benzil alcohol → Benzoic acid → Hippuric acid*검사원리 : HPLC*검사과정 : 1. 이동상 제조→ 12.88g : Tetrabutyl amionium2.6g : Potasium phosphate(완충액)1400㎖ : D.W→ mix→ solvent 100㎖, methanol 500㎖→ mix→ 0.45 미만되는 물질만 filter (filter과정에서 기포도 제거)2. 검체는 3000rpm에서 5분간 원침3. 검체 희석, Blank, Standard 준비4. HPLC장비 이용 column에 2시간동안 흘려주고 250nm에서 측정*검사이론 : 흡입이나 섭취에 의해 납중독이 일어날 수 있다. 주로 혈액과 조직에 분포되어있 으며 특히 뼈에 많은 양이 축적된다. 혈액에서 납은 95%가 적혈구에 존재하고 35일의 반감기를 가져 조직이나 뼈에 저장 분포된다. 납 및 그 무기화합물이 오 랫동안 흡수되면 심한 위장장애와 빈혈증이 생기고 심한경우에는 신경근육기능 장애나 뇌증이 일어난다.*검사원리 : 원자흡광광도 흑연로법원자의 광흡수를 측정하는데 특정한 파장에서는 특정한 원자만 광흡수하며 흡수 된 빛의 양은 존재하는 입자의 양에 비례한다. 원자는 에너지를 받아 들뜬 상태 의 원자로 되며 각 원자 전자궤도에너지 상태가 서로 다르며 흡수되는 에너지도 서로 다르다.Pipette의 종류1. Serological(measuring) pipette원통형의 가늘고 긴 관으로서 용량의 눈금이 비교적 끝까지 그어져 있으며, 가장 많이 사용되며, blow-out 하는 T.D pipette이다.2. Mohr pipetteSerological pipette과 비슷하나, 원통형의 하단부(tip)까지 용량의 눈금이 그어져 있지 않다.3. Volumetric transfer pipettepipette 중간 부분에 팽대부가 있고, 용량을 나타내는 눈금은 팽대부 위에 하나의 눈금으로 표시되어 있다. pipette 내벽 면적을 적게 하여 오차를 줄인 것이 특징이며, blow-out 하는 T.D pipette이다.4. Ostwald pipettepipette 중간 부분에서 하단부(tip)에 가까운 부분에 팽대부가 있다. 이것은 용액과의 접촉면적을 적게 하여 점조성 용액의 배출을 원활하게 하기 위함이다. blow-out 하는 T.D pipette이다.5. Micro(Lambda) pipette정량분석을 위한 소량을 옮기기 위해 사용되며, 유리로 된 좁은 관의 중앙에 잘록한 곳이 있어 이곳까지 채취 시, pipette에 표시된 용량을 나타낸다. wash-out 하는 T.C pipette이다.6. Pasteur pipette아무런 눈금표시가 없는 유리대롱의 모양으로서 pipette 끝이 매우 가늘고, 윗부분에는 고무캡을 연결하여 사용하도록 되어있다.
1. Gross cutting : 표본을 관찰할 수 있도록 적절한 크기는 잘라내는 것2. Fixation : 세포의 기초물인 단백질, 지질, 탄수화물 등으로 구성된 생체를 고정액에 넣어 그 조직의 구조를 생체와 거의 같게 고정시키는 과정* 목적① Autolysis를 막고 세균에 의한 부패를 막는다. (효소, 단백질 기능 불능→세균 사멸)② 가능한 한 살아 있는 상태와 유사하게 보존③ 구성성분의 유실 방지 (경화, 단백응고)④ 시약, 약품에 대한 저항성 (형태변화 최소화)⑤ 매염작용* 고정액 : 10% formalin sol. (Formalin conc : D.W = 1 : 9)조직용적의 10-20배가 적당3. Decalcification : Calcium 성분을 제거하여 조직을 연화4. Washing : 조직 내에 침착되어 있는 formaline 색소와 고정액의 주성분들을 제거하기 위한 과정5. Dehydration : 물과 잘 섞이는 물질로 조직 내의 수분을 점진적으로 대치하며 paraffin은 수세한 후 조직 내부에 남아있는 수분과 혼합되지 않으므로 이를 제거하는 과정* 탈수액 : 저농도 alcohol ⇒ 고농도 alcohol (농도차에 의한 급격한 확산으로 인한 조직의 손상을 방지)6. Clearing : 완전히 탈수된 조직 내에는 alcohol성분으로 충만되어 있는데 침투제인 paraffin 과 alcohol은 잘 융합되지 않으므로 융합할 수 있는 물질로 대치하는 과정* 투명제 : Xylene7. Inpregnation : 부드러운 조직에 침투제를 채워 조직에 적당한 강도를 부여하는 과정* 침투제 : Paraffin8. Embedding : 조직의 절단면을 박절하기 위하여 일정한 모양을 만든다.즉, 침투의 목적으로 소편의 조직을 박절할 때 다루기 쉽게 하기 위하여 큰 형태로 변형시키는 과정* 포매제 : Paraffin9. Trimming : microtome으로 박절하기 위하여 block을 정리하는 과정10. Cutting : 현미경하에서 조직세포의 미세구조를 관찰하기 위해 포매된 조직편을 박절기를 사용하여 검경에 적합한 얇은 두께의 절편을 생산하는 과정* Microtome① 회전형 박절기 (rotary microtome) : 칼이 고정, 블록이 이동, 연속절편 가능② 활주형 박절기 (Sliding microtome) : 블록이 고정, 칼이 이동, 큰 조직 박절에 적합11. Staining : 조직이나 고정된 조직의 다양한 조직 성분과 세포구성 성분을 착색시켜 이를 잘 구별하려는 목적으로 시행하는 과정* 과정탈파라핀 → 함수 → 수세 → 염색(Harri's Hematoxylin: 핵염색) → 수세 → 분별 → 수세 → 중화 → 수세(청색화) → Eosin(핵 이외의 세포질 염색) →탈수 →투명 →봉입* 종류① 진행성 염색 (progressive stainning): 현미경하에서 염색을 진행시키다가 조직 내의 원하는 부분과 그 외의 부분이 구분이 될 때 염색중단