방사성 붕괴와 방사선(4)베타붕괴 --붕괴: 중성과 과잉형 원자핵 n p + e- + - - 원자번호 : 1 증가, 질량수 : 불변 - 에너지 스펙트럼: 연속 에너지 스펙트럼 전자포획(EC; Electron Capture)- 중성과 부족형 원자핵 p + e- n + +- 원자번호 : 1 감소, 질량수 : 불변- --붕괴와 경합적으로 발생 -천이- 알파붕괴나 베타붕괴 직후 딸핵종은 대부분 들뜬 상태- E = Em – En 선스펙트럼- 원자번호와 질량수 불변내부전환(IC; Internal Conversion) 들뜬 상태의 원자핵이 그 에너지를 궤도전자(주로 K각) 에 주어 궤도전자를 방출하는 현상- EIC = (Em – En) – Eb 선스펙트럼- -선 방출과 경합적으로 발생X-선 제동복사(연속 스펙트럼)고속전자가 핵의 전기장내에서 감속되면서 전자의 운동방향으로 전자파를 내는 현상특성 X-선(선 스펙트럼)물질내 원자의 전리 및 여기에 의해 방출오제전자(Auger electron)LⅠ각의 전자가 K각의 hole을 채울때 그 에너지 준위차에 해당하는 에너지를 LⅢ각의 전자에 주어 그 전자를 방출하는데 이때 방출되는 전자를 오제전자라 부른다.
Plasmid DNA 분리Plasmid DNA 분리의 원리 주로 miniprep이라고 부르는 이 방법은 plasmid DNA를 소량 분리하는 방법입니다. 여러가지 방법이 있지만, 여기서는 가장 보편적으로 사용되는 방법인 Alkali lysis method를 소개합니다. 기본적인 원리는 그림에서 보듯이 세균의 cell wall과 cell membrane을 부수고 DNA 만을 분리하는 것입니다. 이 때 중요한 것은 세균이 원래 가지고 있는 chromosomal DNA와 plasmid DNA를 구분하여 분리하는 것입니다. 이 둘은 모두 DNA이므로 성질이 비슷하기 때문에 구분하여 분리하기가 쉽지 않습니다. 다행히 chromosomal DNA는 분리 과정에서 linear 형태가 되고 크기가 상당히 크기 때문에 이런 성질의 차이를 이용하면 분리할 수 있습니다. Alkali lysis method 의 핵심 원리는 다음과 같습니다. 1. 세포벽을 깹니다. 이 때 세포막은 유지되도록 합니다. 세포벽을 군데군데 무너뜨리는 물질은 EDTA이며, 이때 sucrose나 glucose가 첨가되어 세포의 형태를 유지하도록 합니다. 때로는 lysozyme을 쓰기도 합니다.2. 세포막을 조심스럽게 깨서 크기가 큰 chromosomal DNA가 너무 잘게 조각나는 것을 방지하면서 용액에 DNA 를 노출시킵니다. SDS라는 detergent가 세포막을 녹여버리면서 안에 있던 세포 내용물이 용액으로 흘러나오게 됩니다. 이때 바로 alkali 용액에 노출된 DNA는 모두 denature 됩니다. 그러나 크기가 작은 supercoiled plasmid DNA는 그다지 심각하게 되지 않는 성질을 이용하는 것입니다.
1. 실험제목 : Jar-Fermentor를 이용한 미생물 배양2. 실험목적 : Jar-fermentor를 이용하여 미생물을 배양하고 생장곡선을 그리고 DNS법을 이용하여 Glucose의 정량을 측정한다.3. 실험재료 : Conical tube(50ml), micro pipette, tip, Rack, 비커(beaker), 유선지, magnetic bar, D.W bottle, Water bath,메스실린더, balance, stinner, test tube, weigh Dish, Jar-fermentor Sampling 방법1) 통상 Air line과 Sampling line 상부를 연결하는 실리콘 튜브는 클램프에 의해 잠겨있다2) Sampling을 위해 Air Vent line의 클램프(또는 손으로)를 잠궈 Vessel의 내압을 증가시킨다-약 5초 이내면, 충분한 내압이 설정되므로 그 이상 동안은 잠그지 않는다3) Sampling tube의 클램프를 풀어 샘플링을 한다. 처음에 나오는 액은 버린다4) Sampling이 끝나면 클램프 잠그고, vent line을 개방한다5) Air line과 Sampling line을 연결하는 실리콘 튜브의 클램프를 열어 Air에 의해 Sampling line내의 배양액을 배양조로 밀어낸다6) Sampling tube의 클램프를 열어 고여있는 배양액을 빼낸다. 그리고 클램프를 잠근다
High Performance Liquid Chromatography (고성능 액체 크로마토그래피) = High Pressure Liquid Chromatography (고압력 액체 크로마토그래피)크로마토그래피의 개발Tswett(1906) ; 샘플, 용매, 컬럼 : 용출, 분류 혼합된 시료 성분이 이동상과 고정상 사이에서 각각 친화도 차에 의해 단일 성분으로 분리되는 것 실험 방법1. Mobile phase 제조Acetonitrile 70% + HPLC Water 30%지용성 필터로 필터링 후 탈기2. Standard, Sample 제조Standard :100ppm, 200ppm, 400ppmSample : 연습차원에서 300ppm으로 실험 방법3. HPLC를 UV detector, Pump, Oven순으로 On4. 각 기기의 Self-test 완료 후 컴퓨터를 켜서 Autochrom2000 작동5. 폴더를 만들고 새로운 실행파일 작성실험 방법6. 검량 조건 확인 후 HPLC 제어기를 통해 조건 설정(펌프 압력은 0.2㎖/min 단위로 단계적으로)이동상 변경시 purge 실시7. Standard와 Sample 주입(매 주입시마다 Microliter Syringe 세척에 주의)8. 수집된 파
원자력기초이론(원자물리와방사선)
Plasmid DNA 분리.
