API kit를 이용한미생물 동정API kit의 원리API kit는 Biochemical test, Assimilation test 그리고 Fermentation test를 이용한 동정법이다. Biochemical test는 saline용액에 시험 균을 현탁하여 건조된 기질이 들어 있어 kit의 cupules에 접종하여 배양 후 발색시약을 첨가하여 물질의 대사유무를 색의 변화로써 판정하는 방법이다. Assimilation test는 최소배지에 현탁한 시험 균을 탄수화물이 유일한 탄소원으로 들어있는 kit의 cupules에 접종 배양한 후 시험 균이 이들 당을 이용할 수 있는지 여부를 탁도 변화로써 판정하는 방법이다. Fermentation test는 당으로 부터 산을 생산하여 pH의 변화로 판정하는 방법이다.API kit의 종류① API 20E장내세균, Gram(-) 간균의 동정23종류 Biochemical test를 이용② API 20NE장낸세균 이외의 Gram(-) 간균의 동정12종류의 Assimilation test와 8종류의 Biochemical test를 이용③ API 50CHBacillus와 Lactobacillus의 동정49종류 당 test를 통해 미생물 대사를 분석API 50CHB(Bacillus 동정용), API 50CHL(Lactobacillus 동정용)④ API 20C AUX효모의 동정19종류 Assimilation test이용실험 과정① 배양 트레이와 뚜껑을 준비했다.② 뚜껑에 조, 날짜 등을 기록했다.③ 약간의 증류수를 배양 트레이에 넣어 건조를 막았다.④ Agar plate에 colony 하나를 백금이를 이용하여 0.85% Na치 broth에 접종했다.⑤ 접종된 broth를 잘 섞은 뒤 마이크로 피펫을 이용해서 API strip에 접종했다.⑥ 위 API strip을 배양 트레이에 넣고 뚜껑을 덮었다.⑦ 위의 배양 트레이를 37℃ incubator에서 48시간 동안 배양한 뒤 결과를 확인했다.실험 결과아래의 사진은 교수님께서 첨부해 주신 음성반응 사진과 우리 조의 실험 결과 사진이다.아래는 실험결과를 바탕으로 만든 표입니다.ONPGADHLDCODCCITH2SURETDAINDVP연한베이지붉은색주황색진분홍색파란색연한베이지주황색무색무색무색+++++-+---1+2+4=71+2+0=31+0+0=1GELGLUMANINOSORRHASACMELAMYARA확산O노란색파란,노란색노란색파란,노란색노란색파란,노란색노란색노란색노란색++++++++++0+2+4=61+2+4=71+2+4=71+2=37316773= Salmonella spp우리 조의 실험 결과를 기준표를 통해 비교한 결과 Salmonella spp와 가장 유사였으며 H2S와 URE에서만 차이를 보였다.우리조의 경우 H2S의 경우 음성으로 나타났는데 기준치에서는 양성으로 분리가 되었으며 URE의 경우는 반대로 조의 결과는 양성으로 나타났는데 기준치에서는 음성으로 나타났다.