혈구의 관찰 및 용혈현상 관찰1. 제목: 혈구의 관찰 및 용혈현상 관찰2. 목적: 혈구의 특징과 기능을 이해하며, 동물세포의 용혈현상을 관찰함으로써 세포의 생리 현상을 이해한다.3. 이론- 혈액은 밀폐된 혈관속을 순환하는 체내의 액체성분으로 세포 외액 (extracellular fluid)에 속하는 혈관내액 (intravascular fluid)이다. 체세포가 생리 기능을 영위하기 위해서는 끊임없이 필요한 물질을 외부로부터 섭취하고 불필요한 물질을 체외로 배출하고 있다. 이들 물질의 운반은 혈관내를 흐르고 있는 혈액에 의해 수행되고 있으며 모세혈관이 전신세포로 흐를 때 물질교환이 이루어진다. 그러므로 혈액은 생체의 내환경 (internal environment)유지에 큰 역할을 담당하고 있다.1) 혈액의 조성과 특징- 혈액은 혈장 (plasma)과 혈구세포 (blood cell)로 이루어져 있으며, 혈구세포에는 적혈구 (erythrocyte), 백혈구 (leucocyte), 혈소판 (platelets)등이 있다.① 혈장 (plasma)혈액의 세포성분을 제외한 액체성분을 혈장 (plasma)이라 하며, 혈장의 90 ~ 92%는 담황색의 투명한 액체이고, 비중은 1.023 ~ 1.032 이며 PH는 7.4 이다.혈장에는 약 8 ~ 10%의 고형성분이 함유되어 있으며, 무기물이 약 0.9%, 그리고 혈장 단백질 (7 ~ 8%), 비단백성 질소 (0.025%), 지질 (0.6 ~ 0.9%), 포도당 (0.06 ~ 0.08%)등의 유기물과 효소, 호르몬, 항체, 가스등이 함유되어 있다.② 적혈구 (erythrocyte)적혈구 (erythrocyte)는 혈액세포성분의 대부분을 차지하고 있으며 중앙이 약간 함몰된 원판상 (biconcave disk)의 세포이다활동 중인 적혈구에는 핵 (nucleus)이 없으며 적혈구의 헤모글로빈은 체내에서 산소운반의 역할을 맡고 있다. 적혈구는 직경이 7.5㎛ 두께는 가장자리가 약 2.6㎛ 중앙부는 약 1.0㎛이고 표면적은 120㎛² 용적은 87㎛³이다. 적혈구 수효는 개체에 따라 다소 달라서 남자는 약 500만/㎣ 여자는 약 450만/㎣이며 유아는 평균 650만/㎣이다.③ 백혈구 (leucocyte)혈액성분중 생체 방어기능을 맡고 있는 세포를 백혈구 (leucocyte)라고 한다. 백혈구는 식균작용 (Phagocytosis)과 항체 (antibody) 생산 작용 등으로 생체내 방어기전을 담당하고 있다. 백혈구는 핵을 가지고 있으며 세포질에 과립을 가진 과립 백혈구 (granulocyte)와 과립이 없는 무과립 백혈구 (agranulocyte)로 대별된다. 과립 백혈구는 염색성에 의해 호중구, 호산구, 호염기구로 분류되며 무과립 백혈구는 림프구와 단핵구가 있다. 백혈구의 크기는 적혈구보다 크며, 수는 평균 6000 ~ 8000/㎣개 이며 생리적, 병적으로 그 수가 변동하기도 한다. 수명은 적혈구에 비해 짧으며 약 3 ~ 21일 이며 림프구는 100 ~ 200일 생존하는 것도 있다. 백혈구도 적혈구와 마찬가지로 전신의 세망내피계세포에 의해 탐식되고 처리된다.④ 혈소판 (platelets)혈소판 (platelets)은 지혈과 혈액응고 기능을 수행하고 있다. 혈소판 (platelets)은 골수내 거핵구의 세포질이 수천으로 분리된 세포의 단편들이다. 적혈구와 마찬가지로 무핵성 세포로 직경이 2 ~ 5㎛인 원반 또는 부정형이며 그 수는 성인에서 15만 ~ 30만/㎣이고 9만/㎣이하 50만/㎣이상은 비정상이다.수명은 5 ~ 11일 정도이고 세망내피계의 대식세포 (macrophage)에 위해 탐식된다. 혈소판수에는 성차가 없으며 운동, 임신, adreralin 주사 등으로 증가하며, 병적으로 혈소판이 증가하는 경우는 골절, 수술, 급성 출혈 시 등이다.2) 혈액의 기능- 혈액의 기능은 여러 가지 있으며 체온조절도 한다.① 운반의 기능영양소와 대사산물의 운반, 가스의 운반, 호르몬의 운반을 하고 있다.② 산과 염기의 평형조절혈액에 의해 운반된 CO₂는 폐나 신장을 통하여 배출되어 혈액의 PH를 항상 일정하게 유지시키고 있다.③ 체액량의 유지혈장 단백질은 모세혈관벽을 투과할 수는 없으나 혈액의 교질삼투압 (약 25㎜Hg)을 유지시켜 혈액과 조직액 사이의 수분 출납에 영향을 줌으로써 체액량을 조절한다.④ 신체 방어 작용백혈구는 항체 생산 및 탐식작용을 함으로써 생체를 검염으로부터 방어하고 체내에 침입한 이물질을 처리한다.⑤ 지혈 작용출혈시에는 혈소판의 지혈작용 및 혈액응고 인자의 작용에 의해 지혈이 이루어져 혈액의 소실을 최대한 막아준다.3) 용혈 현상- 적혈구막이 터져 헤모글로빈이 세포 밖으로 유출되는 현상을 말한다.① 생체내에서의 용혈적혈구막이 선천적으로 약한 경우난 적혈구 파괴의 항진 시에 나타나며, 이형 수혈의 경우에도 발생하게 된다② 물리적 용혈진탕, 가열, 저온, 방사선, 삼투압 변화 등에 의해 용혈이 일어 나기도 한다.③ 화학적 용혈산, 알카리, 지방산, 사포닌 등에 의해 발생 한다④ 동·식물성의 혈액독뱀, 벌, 전갈, 지네 등의 동·식물성 혈액독에 의해서 용혈이 발생 한다.⑤ 세균성 독소에 의한 용혈포도구균, 연쇄구균 및 콜레라균 등의 독성에 의해서도 발생하다.⑥ 자기면역성 용혈적혈구막에 대한 자기 항체가 생긴 경우에도 용혈이 일어난다.4. 재료 및 기구- 슬라이드 글라스 - 커버 글라스 - 현미경- 소독용 알콜 - 메틸 알콜 - 채혈바늘- 시트로산 나트륨 - 김자액 - 0.2%, 1%, 5% Nacl5. 실험방법1) 혈구 관찰① 손가락을 소독후 바늘을 이용해서 슬라이드 글라스 A, B 두 장에 한 방울을 떨군다.② A 슬라이드 글라스에 시트르산 나트륨 용액을 한 방울 떨군후 현미경으로 관찰③ B 슬라이드 글라스는 혈액을 얇게 도말한 후, 메틸 알콜을 가해 3분간 방치하여 말린다.④ 김자액을 한 방울 떨어뜨려 3 ~5분간 염색한 다음, 물로 씻은 후 커버 글라스를 덮어 현미경으로 백혈구를 관찰한다.2) 용혈 현상 관찰① 슬라이드 글라스 3장에 혈액을 각각 한 방울씩 떨어뜨린다.② 각각에 0.2%, 1%, 5% Nacl을 넣어 혈구의 모양을 관찰한다.