제 2부 글쓰기의 과정과 방법제 1장 글쓰기의 과정p.036 주제잡기p.038主題주제有用유용決定결정提供제공設定설정假設가설成敗성패檢證검증入試입시反證반증靑年청년語法어법失業실업參與참여意識의식水準수준出發출발制限제한質問질문p.039p.037求乞구걸能力능력防止방지選擇선택根本근본條件조건對策대책滿足만족本質본질照明조명目錄목록創意창의弊害폐해獨創독창生存생존斬新참신不正腐敗부정부패未備미비核心핵심補完보완旣存기존p.040p.043 개요 짜기目標목표槪要개요役割역할構造구조政經정경組織조직兩極化양극화設計圖설계도植民地식민지靑寫眞청사진支配지배構想구상意志의지節次절차分量분량性格성격p.044人氣인기p.041 제목정하기包括포괄題目제목人類인류商業상업福祉복지文學문학向上향상正體정체寄與기여大學대학生命생명斟酌짐작尊嚴존엄毁損훼손p.042兩面性양면성努力노력側面측면效用효용發達발달p.045拔萃발췌論爭논쟁興味흥미論理논리適合적합應用응용類似유사分野분야事例사례語句어구層位층위話題화제項目항목修正수정p.046p.050 문장쓰기複製복제文章문장製造제조精誠정성外面외면事項사항墮落타락呼應호응看過간과練習연습危險위험形式형식p.051組合조합反問반문論之논지p.047全船전선配列배열短期間단기간原則원칙分明분명同格동격單語단어番號번호制約제약漢字한자修飾수식敎育교육國語국어學習학습上昇상승p.048p.052趣旨취지試驗시험標題표제身體신체副題부제機會기회利點이점歪曲왜곡世紀세기豁達활달蠻勇만용p.049發展발전輸送수송品位품위家畜가축强調강조機關기관意思의사傳達전달p.053p.055障?人장애인形式형식偏見편견開拓개척浪說낭설經營경영車輛차량充分충분徐行서행成長성장雲集운집技術기술韓國한국便宜편의辭典사전資源자원濫用남용尖端첨단氾濫범람深刻심각p.056電話전화發生발생廉恥염치顯微鏡현미경必修필수都市도시感覺감각格調격조p.057分離분리p.054革命혁명成分성분現代현대依存의존購讀구독頻繁빈번强力강력復舊복구對立대립特定특정地球村지구촌感情감정世界세계意圖의도失業실업法條文법조문品質품질公文書공문서告示고시範圍범위史蹟사적遺跡유적考古學고고학永久영구破損파손廢止폐지p.058p.062方式방식方法방법深奧심오結束결속情神정신連續연속機能기능技法기법疾病질병個別개별環境환경信賴신뢰p.063 글 다듬기大法院대법원確認확인面貌면모傾向경향一新일신立場입장沒入몰입p.059脫出탈출不足부족管理관리p.064業務업무提出제출成果성과視線시선確保확보p.060 문단 만들기配置배치文段문단誤字오자單位단위脫字탈자該當해당例示예시p.065浮刻부각過程과정派生파생p.061奇拔기발統一통일未練미련緊密긴밀嚴格엄격完結완결保管보관集中집중充實충실全開전개答辯답변
제 1부 대학생활과 글쓰기제 1장 글쓰기의 의의p.004 글을 쓰는 이유와 좋은 글쓰기의 요건p.005 대학에서의 글쓰기表現표현大學대학言語언어重要性중요성手段수단統計소계倉曹창조講義강의思惟사유過言과언聽覺청각妥當타당視覺시각發想발상記憶기억整合性정합성破壞파괴要領요령主體주체進展진전p.006 대학이후의 글쓰기可變가변注目주목蓄積축적無關무관金字塔금자탑出刊출간王道왕도實用性실용성調整조정省察성찰迂廻路우회로道具도구職業직업高揚고양成功성공幸福행복伴侶반려제 2장 글쓰기의 목표p.010 소통을 위한 글쓰기타자에 대한 이해로서의 글쓰기p.012 독자 분석을 통한 글쓰기疏通소통讀者독자場所장소深層的심층적考察고찰大衆대중貯藏저장好意的호의적他人타인敵對的적대적對象대상語調어조摸索모색語套어투觀點관점文體문체意見의견肯定긍정學習학습不定부정普遍性보편성中立중립立脚입각他者타자p.013 소통을 고려한 어조, 어투, 문체認知인지待遇대우恒常항상親密度친밀도存在존재格式性격식성受容수용固有고유唯一유일人文學인문학必然的필연적社會사회瓷硯자연p.011 이해와 합의로서의 글쓰기科學과학合意합의醫學의학蓋然的개연적分野분야正當化정당화適切적절公認공인信念신념共同體공동체具體的구체적愼重신중考慮고려제 3장 글쓰기의 윤리p.020 대학에서의 윤리적인 글쓰기未熟미숙倫理윤리恐怖感공포감獨創性독창성自信感자신감試圖시도克服극복業績업적基本기본生産생산初步초보p.022誘惑유혹引用인용僞造위조註釋주석變造변조信憑性신빙성盜用도용反駁반박著述저술?畵化희화화合理化합리화故意的고의적豫備예비參考文獻참고문헌知識지식典據전거情報정보原典원전參考참고出典출전書誌서지直接직접嚴正엄정間接간접敎育교육筆者필자著者저자p.021獨立독립硏究연구剽竊표절p.023關聯관련維持유지課題과제意譯의역出處출처混同혼동讀書독서表記표기探究탐구編輯편집習慣습관臨迫임박p.024p.026支配지배學會誌학회지變革변혁投稿투고壓殺압살符號부호脫落탈락反復반복解放해방略式약식抑壓억압上揭상게熾烈치열前揭전게沮害저해啓蒙계몽p.025p.027圖謀도모解消해소論著논저壓縮압축出版출판體制체제良心양심恣意的자의적參照註참조주遂行수행內脚註내각주外脚註외각주p.028尾註미주貧者빈자知慧지혜建築건축美術미술著書저서揭載게재
핵이식을 이용한 형질전환동물 생산과 문제점 및 해결방안Context형질전환 동물 정의 및 의의 생산기술의 발전 역사 핵이식 기법을 통한 형질전환 동물의 생산 생산과정 영향요인 장 점 문제점 해결방안 결론 및 정리 참고문헌형질전환 동물정 의 자신의 유전 물질에 새로운 유전자가 인위적으로 도입되어 발현됨으로써 새로운 형질을 가지는 동물 의 의 농업, 축산업, 바이오 의학기술 등 광범위한 영역에 이점 가축의 형질개량, 치료약제 생산, 유전자 치료, 유전자의 기능을 파악 하는데 쓰임 학문 및 첨단 산업의 발전을 유도`형질전환 동물형질전환방법 전핵주입법 바이러스 벡터의 이용 배아줄기세포를 이용하는 방법 핵이식 방법 정자를 이용하는 방법형질전환 동물생산기술 발전의 역사체세포 핵이식에 의한 복제돼지 생산Baguishi 등미 국1999GFP 형질전환 복제돼지 생산Park 등한 국2003인간항체를 생산하는 형질전환 체세포 복제소 생산Hematech 사미 국2002소의 난관 상피세포 및 난구세포에서 복제소 생산kato 등일 본1998체세포 복제에 의해 Factor Ⅸ 형질전환 면양 생산Schnieke 등영 국1997면양의 유선상피세포를 이용하여 최초로 복제Wilmut 등영 국1997기술 개발 내용연구자국 가연 도형질전환 동물핵이식 기법을 통한 형질전환 동물의 생산생산과정핵이식 기법을 통한 형질전환 동물의 생산생산과정핵이식 기법을 통한 형질전환 동물의 생산① Donor Cell의 분리Donor Cell을 포함한 개체의 cell 채취 트립신 등을 사용하여 세포분리 세포주기를 고정 원하는 유전자로 조작핵이식 기법을 통한 형질전환 동물의 생산② Recipient의 Enucleation미수정란 사용 ⇒ 체외성숙 물리적 탈핵법 미세 pipet을 이용 투명대와 세포질에 손상가능 화학적 방법 최근에 성공사례가 보고됨핵이식 기법을 통한 형질전환 동물의 생산③ 세포 핵의 이식세포질 미세주입법 Donor cell의 핵을 분리하여 Recipient에 직접이식 세포막 융합법 Donor cell을 Re도증가가 필수적 전기자극으로 세포막 투과도 변형 Ionomycin, DMAP 등의 화학적 물질 이용핵이식 기법을 통한 형질전환 동물의 생산⑤ 핵 이식란의 배양일반적 체외수정란 배양과 같음 융합후 2시간이내 핵막증가 없으면 배반포로 발전하지 않음 최근 핵이식란과 체외수정란의 대사과정의 차이가 규명되고 있어 특수 배양액의 개발 기대핵이식 기법을 통한 형질전환 동물의 생산⑥ 대리모에 이식핵이식란을 대리모에 이식하여 형질전환동물 생산핵이식 기법을 통한 형질전환 동물의 생산영향요인 ① 난자의 체외 성숙도 MPF (Maturation Promoting Factor) 세포분열 및 세포주기를 조절하는 중요한 인자 다양한 세포신호전달물질 융합, 활성화를 통해 배아발달에 영향을 줌 복제수정란 발생에 주요한 역할을 하는 인자로 인식핵이식 기법을 통한 형질전환 동물의 생산영향요인 ② 공여핵세포와의 융합조건 및 난자의 활성화 정상적 수정과정에서는 정자에 의한 난자 활성화가 유도 체세포 핵이식에서는 이러한 과정을 전기충격 또는 화학물질을 이용한 인위적 방법으로 대체 연구결과에 의하면 전기 융합 4시간 이후 화학적 활성화 처리군이 분할율 및 배반포 발달율이 높음핵이식 기법을 통한 형질전환 동물의 생산영향요인 ③ 핵 이식란의 배양 체세포 핵이식 유래 수정란 정상 수정란에 비해 Methylation 정도가 높음 외부 에너지원 물질에 대한 반응성이 다름 Heteroplasmic mitochodria를 지님핵이식 기법을 통한 형질전환 동물의 생산장 점 핵이식 기술은 다른 방법과 비교하여 효율이 높음 태어난 형질 전환 동물은 거의 100% 형질 전환율을 가짐 일시에 많은 수의 형질전환동물을 복제기법을 통하여 생산 가능 전핵 주입법(미세주입법)의 단점이 보완 외래 유전자 도입 조절 작업의 효율성 향상 → 유전자 발현정도 예측 향상, 유효세포 선별 용이 모자이키즘 등의 부작용 감소핵이식 기법을 통한 형질전환 동물의 생산문제점 : 전반적인 문제 종교, 윤리적 동물의 복제는 인간의 복제만큼 광범위하고 히 남아있다.핵이식 기법을 통한 형질전환 동물의 생산문제점 : 전반적인 문제 복제기술 자체의 비효율성 체세포를 이용한 복제 기술은 기술적으로 대단히 어렵고 실패율이 높음 복제 동물 1마리를 만들기 위해서는 난자 수백 개가 필요 이는 핵의 수정과 리모델링, 재프로그래밍 등의 과정에 있어 우리가 아직 모르는 부분이 많다는 것을 시사 매우 낮은 복제동물 생산 효율과 사산 및 기형 출산이 문제가 된다.핵이식 기법을 통한 형질전환 동물의 생산문제점 : 전반적인 문제 복제기술 자체의 비효율성 Abnormality의 야기 : 대부분 NT이후 첫 번째 Cell cycle동안에 생겨나며, NT의 낮은 cloning 효율은 대부분이 Epigenetic signal의 Incomplete reprogamming에 의한 것이라 밝혀짐. Chromatin remodeling과 Developmetal gene expression에 관한 연구가 더욱 진행 필요 DNA methylation : 복제수정란에서는 DNA methylation이 체세포 형태를 그대로 유지, Demethylation이 일어나지 않음핵이식 기법을 통한 형질전환 동물의 생산문제점 : 동물복제의 문제 유해돌연변이의 문제 세포를 저농도 영양 배지에서 배양하여 유전자의 기능을 인위적으로 정지해야하는데 이 때 돌연변이가 일어날 가능성이 높다. 전기자극을 통한 핵이식 과정이나 그 후의 활성화 과정에 있어서도 핵과 세포질의 세포주기가 서로 적합하지 않을 수 있기 때문에 염색체 이상이 발생할 가능성도 있다. 인간에게 유해한 돌연변이가 나올지도 모름 돌연변이 된 부분이 세대를 거쳐 나타날 수도 있음.핵이식 기법을 통한 형질전환 동물의 생산문제점 동물복제의 문제 동물권의 문제 일부 동물 보호론자들은 동물에게도 인간과 마찬가지의 고유한 권리가 있다고 주장 인간이 마음대로 그들의 유전자를 변형시키고 복제하며 실험할 권리는 없다는 뜻 모든 생명은 그 나름대로 고유한 가치가 있으며 존중받아야 한다는 것을 전제핵이식 기법을 통한 형질전환 동물 동물의 생산해결방안 Nuclear material의 Reprogramming, Chromatin의 Organization, Epigenetic changes의 이해 필요 : 절차에서의 적절한 조절은 자손에서의 Epigenetic aberrations을 막기 위해 중요 Nuclear transfer animal model의 생산과정 : Epigenetic Regulation에 대한 통찰력을 제공 필요핵이식 기법을 통한 형질전환 동물의 생산해결방안 Nuclear reprogramming에 대한 이해에서의 발전 : NT의 효율성을 높이고 transgenic SCNT animals의 생산을 촉진시킬 수 있다. DNA transfection, Colony selection, Extending cell lifespan에서의 발전 : 형질전환 동물의 생산에서의 성공률 증가핵이식 기법을 통한 형질전환 동물의 생산해결방안 TERT(telomerase의catalytic component) : Extending cell lifespan의 관점에서 접근해서, 체세포에서의 노화의 문제를 극복할 수 있는 방법 Bovine의 경우, 난자를 이용할 때 그 개체의 체세포 핵을 주입 하면, 난자와 핵 제공자의 개체가 다른 경우에 비교해서 성공률 이 많이 높아진다는 결과가 있음핵이식 기법을 통한 형질전환 동물의 생산해결방안 Nuclear reprogramming과정에서의 효율성 향상 Remodeling factor의 이용 Remodeling factor : Xenopus laevis egg extracts, roscovitine, trichostatin A Nuclear reprogramming에 영향을 끼치는 요인 ① donor cell의 cell cycle을 recipient oocyte와 synchrony ⇒ large-scale nuclear transfer 연구 ② somatic cell을 가져올 donor의 연령, tissue origin, passage, culture condi 동물 이용에 의한 고가 치료용 의약품의 생산, 질환 모델 동물의 생산, 인공 장기의 생산 등은 인류의 삶의 질 개선에 획기적으로 기여참고문헌1) 책 (1) 생물 공학 기초 / 교육인적자원부 / 서울대학교 농업생명과학 대학 / P.247 ~ 251 (2) Production of hFSH Transgenic Clone Cow by Somatic Cell Nuclear Transfer / 농림부 / 엠빅스 바이오테크놀러지(주) / P.12 ~ 13 2) 논문 (1) Nuclear Remodeling and Reprogramming in Transgenic Pig Production, Exp Biol Med(Maywood), 2004 Dec;229(11):1120-6, Randall S.Prather, Peter Sutovsky, Jonathan A.Green (2) Cloning animals by somatic cell nuclear transfer – biological factors,Reprod Biol Endocrinol. 2003 Nov 13;1:98, Cindy Tian, Chikara Kubota, Brina Enright, Xiangzhong Yang (3) 동물체세포의 복제 / 정희태(강원대학교 동물자원대학) (4) 복제동물의 생산 / 노상호(한경대학교 동물생명자원학과)참고문헌(5) 형질전환 동물 / 이창규(서울대학교 농업생명과학대학) (6) 체세포 핵이식 기술 / 임정묵, 김태민 (7) Improved efficiency of bovine cloning by autologous somatic cell nuclear transfer, 2006 Society for Reproduction and Fertility, Xiao-yu Yang. (8) Craig A Hodges and Steven L Stice , Generation of bovine transgenics using somatic cell nuclear transfer, Reprod Bhow}
Estimating bacterium colony number in Rumen1. Introduction & AbstractMicrobes in the reticulorumen include bacteria, protozoa, fungi, archaea, and viruses. Bacteria, along with protozoa, are the predominant microbes and by mass account for 40-60% of total microbial matter in the rumen. They are categorized into several functional groups, such as fibrolytic, amylolytic, and proteolytic types, which preferentially digest structural carbohydrates, non-structural carbohydrates, and protein, respectively. Protozoa (40-60% of microbial mass) derive most of their nutrients through phagocytosis of other microbes, though they also degrade and digest food carbohydrates, especially structural carbohydrates, and protein. Ruminal fungi make up only 5-10% of microbes. Despite their low numbers, the fungi still occupy an important niche in the rumen because they solubolize lignin and help break down digesta particles.In this experiment, we want to know how many bacterium are in rumen fluid. But there are too many bacteria in rumen. So we will use serial dilution to count it. And in the anaerobic circumstance, we will cultivate bacteria in the plate, and roll tube.2. Materials & Method① Prepare sample. In this experiment, we used rumen fluid② Prepare the media. Through Gassing Apparatus, media can be oxygen free by bubbling CO2 gas.③ In anaerobic chamber, samples put ice, and vortex enoughly.④ Using pipet, 1sample and 9media are put the same tube. and vortex smoothly.Then we getdiluted sample.⑤ Repeatedly do same process, we can get,diluted sample.⑥ Again repeat above serial dilution.⑦ Pipet 100㎕ sample fromeach of serial diluted sample.Put them media and spread gently.⑧ Dilute pure sample with syringe. Inject syringe into capped tube, 1sample is enter syringe,and syringe is inject tube filled with 9media. and shake the tube, which is filled mixed fluid.Repeat this process, and we can get,,diluted samples.⑨ From each sample take out 1sample by syringe, and put them into the roll tube.⑩ Roll the roll tube on the ice-water till all of sample attach side of bottle. Repeat this process all of sample.⑪ Put the roll tube and plate in the incubator, and incubate one day. After one day, count the colony.3. Result1) Platea) A set :- 37 colonies →- 3 colonies →Average : 3.35×cfu/mlb) B set :- 43 colonies →- 4 colonies →Average : 4.15×cfu/ml2) Roll Tubea) A set :- 218 colonies →- 41 colonies →- 4 colonies →Average : 3.43×cfu/mlb) A set :- 217 colonies →- 65 colonies →- 4 colonies →Average : 4.22×cfu/ml4. DiscussionCompare with Plate and Roll tube in result, A set`s result is 3.35×cfu/ml in plate and 3.43×cfu/ml in roll tube. And B set`s result is 4.15×cfu/ml in plate and 4.22×cfu/ml in plate. It is so similar CFU in each set. But when we compare A set and B set, we find over all A set have less colonies than B set. In spite of A, B set used same smaple. It seems to have some error that we diluted samples. Because it is not perfect pipeting or voltexing in experiment.We can find in text and journal, there are~bacteria in rumen. But in our in experiment, we find about 4×cfu/ml of bacteria. In media we used, All bacteria can not survive and grow. That is main reason of two value is not similar I think. And rumen fuild have not same concentration each point. That is one reason of result.5. Reference- Anaerobe Laboratory. 1970. Outline of clinical methods in anaerobic bacteriology. VirginiaPolytechnic Institute, Blacksburg, p.568-576.- http://www.chu.cam.ac.uk/~ALRF/micrbiol.htm- 한국미생물학회, 1998, 미생물학실험서, 초판, 을유문화사 , pp. 64~66