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체세포분열관찰 레포트

I. 실험목표- 현미경을 통해 양파뿌리 세포의 생장점에서 체세포 분열(간기, 전기, 중기, 후기, 말기)을 관찰한다.II. 실험재료 및 도구- 현미경, 슬라이드글라스, 커버글라스, 양파뿌리 조직, 아세트산올세인용액, 핀셋, 고정액(에탄올:아세트산 = 3:1비율의 혼합액), 5M HCl, 1차 증류수, 1.5ml 튜브, 실침, 칼III. 실험과정1. 양파뿌리 배양1) 양파를 준비한다.2) 깨끗한 배양통에 1차증류수를 양파가 잠길 정도로 부어준다.3) 양파의 뿌리를 아래쪽으로 놓는다.4) Growth Chamber(생장상)에 3일정도 넣어 배양한다.5) 수시로 확인하며 증류수를 부어준다.그림 ) 배양 1일차그림 ) 배양 2일차그림 ) 배양 3일차2. 양파 뿌리 세포 고정1) 에탄올 : 아세트산 = 3 : 1의 비율로 혼합하여 고정액을 만든다.2) 배양한 양파뿌리의 끝을 약 1~1.5cm의 길이로 10뿌리 정도 자른다.3) 1.5ml 튜브에 고정액 600㎕를 넣는다.4) 고정액에 잘라논 양파뿌리를 3시간 정도 담궈 세포를 고정시킨다.3. 양파 뿌리 조직 연화(해리) 과정1) 5M HCl을 1.5ml 튜브에 600㎕ 준비한다.2) 고정액에 담겨 있는 양파 뿌리를 핀셋을 이용해 HCl 용액으로 옮겨 넣는다.3) HCl용액에 10분간 담궈준다.그림 ) 고정액에 담겨있던 양파뿌리를5M HCl 용액에 옮겨 담는 과정4. 양파 뿌리 세척 과정1) 1차 증류수가 담긴 1.5ml 튜브를 2개 준비한다.2) HCl용액에 연화된 양파뿌리를 핀셋을 이용해 1차 증류수에 1~2분 정도 담근다.3) 다시 1차 증류수에 세척한 양파뿌리를 다른 1차 증류수 튜브로 옮겨 세척해준다 (세척을 총 2번 해준다.)그림 ) 두 번째 세척 과정5. 양파 뿌리 세포 분리 및 염색1) 슬라이드 글라스위에 세척한 양파 뿌리를 올려놓는다.2) 칼을 이용해 뿌리 생장점 부분(뿌리 끝에서 2mm 정도의 위치)을 찾아 자른다.3) 생장점 부분을 칼과 실침을 이용해 잘게 잘라 세포조직을 최대한 분리 시켜준다.그림 ) 실침으로 조직분리하기그림 ) 아세트산올세인 용액 분주4) 분리된 세포조직에 아세트산올세인 용액을 20~25㎕ 정도 분주하여 5분간 염색한다.6. 세포조직 얇게 펴기1) 염색된 세포 위에 기포가 최대한 생기지 않도록 커버글라스를 덮는다.2) 커버글라스가 깨지지 않도록 누르며 세포조직을 얇게 펴준다.그림 ) 커버글라스 덮기그림 ) 지우개로 눌러주기- 손가락과 지우개를 사용해 두드려준다.7. 세포관찰1) 준비된 슬라이드글라스를 현미경의 재물대 위에 올려놓는다.2) 현미경의 전원을 켜고, 대물렌즈를 저배율로 맞춘다.3) 조동조절나사를 이용해 원하는 세포의 위치로 맞춘다.4) 미동조절나사를 이용해 초점을 잡고, 광원의 세기를 조절하며 가장 좋은상을 찾는다.5) 저배율에서 고배율로 높이면서 핵분열 세포(간기, 전기, 중기, 후기, 말기)를찾는다. ( 접안렌즈 x15, 대물렌즈 x40, x100 )V. 실험결과- 현미경 관찰 결과, 양파의 생장점에 있는 세포에서 간기, 전기, 중기, 후기와 말기로 추정되는 세포들이 관찰 되었다.그림 13) 중기그림 12) 전기그림 10) x1500 x600 x1500 x1500그림 15) 말기그림 11) 간기그림 14) 후기 말VI. 고찰세포 주기각 단계별 특징간기G1DNA 합성 준비기S기DNA 합성기DNA량이 2배로 증가하는 시기G2핵분열 준비기전기M기핵막과 인의 소실, 염색체형성한다.양극에서 방추사가 빠르게 형성 됨.중기염색체의 적도면 배열한다.후기염색 분체가 양극으로 이동한다.말기핵막이 나타나 2개의 딸핵 형성한다.세포질 분열핵분열 후 세포질 분열이 일어나 2개의 딸세포가 생긴다.(세포판이 형성되면서 원심적 분열로 딸세포가 형성)위의 표는 체세포분열의 단계별 특징에 대한 표이다. 이 표에 따라 간기, 전기, 중기, 후기, 말기의 세포를 찾아보면 실험결과에 나온 단계별 사진과 유사하다. 후기의 사진인 그림 14는 염색분체가 양극으로 끌려가는 단계가 거의 끝나가는 시점으로 보인다. 이 실험을 통해 세포관찰을 하면서 더 정확하게 나타나는 단계의 사진을 찍지 못해 약간의 아쉬움이 남는다.

자연과학| 2012.12.01| 5페이지| 1,000원| 조회(873)

세포분열, 체세포분열, 분열관찰

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