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RNA extration[실험보고서 결과사진포함]

인류 유전학 심화연구RNA extraction and reverse transcription PCR (RT-PCR)담당교수:학 과:학 번:이 름:실험소개 & 목적실험목적: RT-PCR를 이용하여 human cell의 특정한 mRNA의 발현(전사량, 염기서열)을 조사해 봄으로써 역전사 효소의 원리와 RNA 추출 시 사용하는 trizol의 사용방법 및 원리를 알아본다.유전자 발현 양상의 분석연구를 위해서는 환경 변화 또는 특정 조건에 따라 세포 내 그 양이 달라지는 RNA를 target으로 한다. 하지만 단일가닥의 RNA는 이중가닥의 DNA 보다 불안정한 물질이고 또한 시험관(in vitro)에서 RNA 자체를 증폭하여 사용 할 수 없기 때문에 보다 안정적인 DNA로 역 전환 하는 과정이 필요한데 이를 역전사(Reverse transcription, RT)라고 한다. 역전사를 통해 만들어진 DNA를 cDNA라 부르고 그 cDNA를 template로 PCR 하는 것이 RT-PCR이다. 역전사에 사용되는 RTase는 HIV(Human Immunodeficiency virus)와 같은 RNA virus에서 유래되었는데 RNA를 유전체로 갖는 이들은 증식을 할 때 역전사를 통해 감염체의 세포로 전이 되야 하기 때문에 역전사 효소인 RTase가 잘 발달 되어있다. 실험에 많이 이용되고 있는 역전사 효소는 AMV(Avian Myeroblastosis virus)와 M-MLV(Moloney Murine Leukemia virus)의 두 종의 RTase를 사용한다. 일반적인 AMV RTase는 M-MLV RTase보다 비교적 높은 온도에서 활성을 나타내지만 강력한 RNase H의 활성을 갖고 있어 합성 진행도(Processivity)가 떨어지는 것이 특징이다.* Trizol: acid phenol과 같은 기능을 한다. RNA 만 뽑아내기 위해는 세포에 있는 DNA와 protein을 분리해주어야 한다. 그러므로 monophasic phenol(cell을 깬 후 DNA 3차구조 파괴)과 guanidinium thiocyanate(protein denaturation, rRNA를 ribosomal protein으로부터 분리)가 있다. 또한 acid 는 DNA를 변성시킵니다. 하지만 acidic pH에서 RNA는 파괴되지 않습니다. 이는 RNA pH는 4.7 이기때문에 산성네 안정하고 DNA pH는 8.0 이므로 산성에 약하고 알카리에 안정하다.* chloroform: RNase 활성저해. Trizol처리한 조직을 원심분리 하면 수층과 Trizol층으로 나뉜다. 수층에는 미량의 Trizol이 녹아있어서 이를 완전히 제거하지 않으면 후에 처리할 효소를 변성시키므로 반드시 Trizol을 수층에서 제거해야 한다. Trizol을 처리한 시료를 choloroform처리하면 수층에 녹아있던 Trizol을 다 제거해 준다. Chlorofom은 극성이 강해서 물에 전혀 녹지 않으며, Trizol은 물보다 chloroform에 훨씬 더 잘 녹는다. 이렇게 처리하면 aqueous phase 는 RNA 만 남게 되고 interphase 는 DNA, protein 남게 된다. phenol 층에서도 RNA 도 오래 두면 변성되므로 장기간 노출되지 않게 해야 한다.* isoprophy alcohol: 위의 처리과정 뒤에 RNA가 포함된 수층을 따로 뽑아낸 것에 alcohol 을 이용하여 RNA을 침전시켜야 한다. 수층에서 RNA가 녹을 수 있기 때문에 isoprophy alcohol(2-propanol)은 수분을 합성하면서 RNA를 침전시키는 역할을 한다. 이후 EtOH로 한번 씻어주는 역할을 하며 수분을 완전히 날려준다.실험방법Caco-2 cell (epithelial cell), damage에 강하다Cell harvest한 것을 media를 버리고 Trizol (1ml씩)를 사용 (세포에서 RNA 추출)Chloroform 200ulincubate at RT 5분/ centrifuge 4° 12000이상, 15분3층으로 분리. 맨 위의 투명한 RNA를 따서 새 tube로 옮긴다. (DNA층이나 phenol층이 따라 올라 오지 않도록 주의)-대략 150-200ulisopropyl alcohol넣어준 후 invert/ incubate at RTCentrifuge 후 pellet이 생긴다. RNA를 제외하고 버린다.wash RNA pallet with 75% ethanol - isoprhphan 제거 과정.dry/ dissolve RNA with DEPC- treated water 20ul각 RNA 12ul씩 따서 spectrophotometry을 이용하여 정량.실험결과나의 결과ng/ulA260A280260/280260/230ConstantCursorPos.CursorAbs.340raw136.583.4141.8641.830.1940.0023018.0120.020고찰주된 불순물인 protein의 농도는 파장 280nm의 흡광도를 동시에 측정하여 알 수 있으며 일반적으로 260nm흡광도와 280nm흡광도의 비가 1.6~2.0 사이면 순수한 RNA로 본다. 나의 결과 260/280비가 1.83 나왔으므로 순수 RNA라 추측된다. 그러나 다른 사람 결과와 나의 결과의 전기영동 결과를 비교해보면 매우 희미하게 보이고, 결과가 잘 나오지 않은 것 같다. RNA가 확실한지는 의심이 간다. 이와 같은 결과가 나온 데에는 여러 가지로 추측된다. RNA는 DNA에 비해 불안정하기도 하지만 RNA를 파괴하는 RNase라는 효소가 적당히 끓이는 방법으로도 제거할 수 없으며 실험자의 손이나 다른 실험환경에도 많기 때문에 이러한 점을 깊게 주의하지 않고 실험하였다. 또한, Cell의 처음농도가 보통 실험 농도보다 1/3~1/4정도 낮았다. Epithelial cell은 바닥에 붙어서 자라는 세포인데 cell lysis과정시 제대로 pipetting하지 않아 세포가 잘 떨어지지 않았을 수 있다. Trizol을 통해 세포가 제대로 안 깨져서 RNA가 안 나왔을 수 있다. 이와 같이 추측되는 이유에 의하여 결과가 만족스럽게 나오지는 않은 것 같다.

자연과학| 2015.06.24| 5페이지| 1,000원| 조회(507)

RNA, 유전, 생물, 실험보고서, RNA extraction

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[A+ 실험보고서 결과사진포함] DNA methylation analysis 평가A+최고예요

인류 유전학 심화연구DNA methylation analysisby methylight and MSP-PCR with gDNA bisulfite modification담당교수:학 과:학 번:이 름:실험소개 & 목적실험목표: MSP-PCR과 metylight 이용하여 target 유전자의 metylation을 분석하고 gDNA bisulfite modification의 원리와 다양한 DNA metylation 연구에 대하여 알아보자DNA methylation analysis: 특정 유전자의 DNA methylation의 패턴을 분석하는 실험포유류동물의 genomic DNA 상의 대략 3-5%의 cytosine이 methylation 되어있고, 그 중에 대략 70%가 CpG dinucleotide상에 존재한다. 이들 CpG가 모여있는 CpG island는 유전자의 발현을 조절하는 promotor부위에서 많이 발견되며, 이들의 methylation 패턴(Hypo- or hyper methylation)에 따라서 그 유전자의 발현양상이 조절할 수 있다.bisulfite conversion: Sodium bisulfite를 DNA에 처리하게 되면, DNA 상의 unmethylated cytosine(C)염기는 deamination되어 Uracil(U)염기로 바뀌어버리는 반면, methylated cytosine(C)는 그대로 cytosine(C)로 남아있게 된다. 즉, cytosine의 methylation 유무에 따라 서로 구별할 수 있도록 다른 염기로 표지하는 것이다.MSP method: PCR 이용. Primer을 사용하여 methylation 부분을 증폭하고 전기영동으로 결과를 분석할 수 있다.methylight method: taqman probe을 사용하여 real-time PCR(quantitative PCR)로 methylation 분석실험방법Bisulfite conversion of DNAComponentVolume per reaction(ul)DNA solution ( 1ng- 2ug)Variable(maximum 20ul)-10ulRNase-free waterVariable-10ulBisulfite Mix85DNA protect buffer35Total vol140DNA와 위의 조성대로 시약을 200ul PCR tube에 준비2번에서 준비한 시약을 완전히 섞어주고 RT 보관-DNA protect buffer: disulfide mix 통해 많은 반응성에 의해 DNA가 깨질 수 있기에 넣어준다.아래의 조건으로 DNA conversion 수행StepTimeTemperatureDenaturation5min95℃Incubation25 min60℃Denaturation5 min95℃Incubation85 min60℃Denaturation5 min95℃Denaturation175 min60℃Holdindefinite20℃Cleanup of bisulfite converted DNA (DNA purification)Bisulfite conversion이 끝난 sample을 spindown하여 1.5ml tube에 옮긴다.Sample을 spin column 옮긴다.CNFG, maximum speed,1’Buffer BW 500ul 첨가한 후, CNFG, maximum speed, 1’Buffer BD 500ul 첨가한 후 RT 15’ incubationCNFG maximum speed,1’Buffer BW 500ul 첨가한 후, CNFG, maximum speed, 1’7의 과정을 반복하고 new tube에 column을 올리고 다시 CNFG maximum speed, 1’(Optional) 남아있는 액체를 제거하기 위해 56℃, 5’incubationNew tube에 spin column을 올리고 buffer EB 20ul을 첨가한 후 CNFG 12000rpm, 1’Methylation analysisMSP-method35 cycle1x2x3xDNA2ul95℃10’MSP pre-mix25 ul94℃15’’Primer set4 ul50℃30’’DW19 ul72℃30’’10’Total50 ul실험결과Figure2 - Electrophoresis pattern of promoter methylation of phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten (PTEN) using methylation-specific PCR (MSP).L, DNA marker; M, methylated; U, unmethylated.Sample 1, UU; sample 2, MU; sample 3, MM.-자신의 실험결과사진을 위와 같이 해석. (고찰과 다른 실험결과 사진입니다./ 고찰사진이 없어도 해석 읽으면 이해가실겁니다. )고찰Unmethylation과 methylation이 쉽게 구분이 가도록 결과 값이 잘 나온 거 같다. Marker를 기준으로 앞부분은 unmethylation과 methylation을 번갈아 loading했는데 band를 통하여 구분할 수 있다. 결과값은 잘 나온 것 같다. 아쉬운 점은 band를 모두 육안으로 구분할 수는 있었지만 Marker를 기준으로 그 이후부터 원래의 정량이 아닌 marker 양만큼 다음 sample들을 loading 했던 거 같다. Band가 그래서 연하게 나온 거 같다.

자연과학| 2015.06.24| 5페이지| 1,000원| 조회(198)

유전학, 생화학, methylation, DNA methylation anal

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[A+ 실험보고서 결과사진포함] PCR-RFLP, Real-time PCR

인류 유전학 심화연구PCR-RFLPReal-time PCR담당교수:학 과:학 번: 20121062이 름:실험소개 & 목적실험목적: PCR-RFLP와 Taqman을 이용한 real-time PCR를 통해 Pai-I12068의 DNA 염기서열의 돌연변이형을 조사하여 SNP genotyping에 대해 다양한 분석방법을 고찰.PCR이란 중합효소연쇄반응(Polymerase chain Reaction)의 약자로서 DNA Polymerase를 이용하여 DNA의 양을 증폭시키는 기술이다. DNA의 양이 아주 적더라도 우리가 원하는 부분을 엄청난 양과 높은 정확도로 크게 늘릴 수 있다. PCR은 Denaturation(DNA의 변성, 95°), Annealing(55~65°), Extension(DNA의 신장,75°) 크게 3단계로 진행된다.Template DNAPrimer, dNTP10x PCR buffer(Magnesium-primer가 template DNA에 결합하는 능력, tepmplate 및 PCR 산물의 변성온도, product specificity, dNTP와의 결합, Taq DNA polymerase의 활동성에 영향/ KCl-primer와 DNA 결합 및 Taq polymerase의 반응율에 영향/ gelatin or BSA- Taq DNA polymerase의 안정화/ DMSO-PCR reaction의 비특이적 결합 감소)Taq polymerase.PCR-RFLP이란 유전변이형 검사법 중 하나로 특정 부위의 돌연변이에 의해 제한효소가 인지하는 염기서열의 유무로 제한효소에 의한 절편길이가 달라지는 다형성을 조사하는 방법이다. 일반적으로 PCR을 통하여 관심 유전자를 증폭한 후에 제한효소를 처리하여 절단된 길이의 차이를 전기영동으로 분리하여 조사한다 이 방법은 DNA염기서열의 돌연변이만을 알 수 있다는 한계점이 있다.RELP(restriction fragment length polymorphism) 이란 DNA를 유전자 절단 제한효소(restriction endonuclease)로 절단하였을 때, 절단된 유전자의 길이가 개인에 따라 다양하게 나타나는 현상을 말한다.Real-time PCR(실시간 중합효소 연쇄반응)이란 형광물질로 표지한 PCR 산물의 증폭량을 실시간으로 신속하게 확인하면서 해석하는 방법으로 전기영동에 의한 PCR 산물의 확인이 필요없이 핵산의 초기량을 정확하게 정량 해낼 수 있는 방법이다. quantitative PCR(qPCR), 정량 PCR이라고도 불린다. Real-Time PCR은 tube가 닫혀있는 상태로 결과를 바로 분석하기 때문에 오염률이 낮고, 형광검출 법으로 짧은 시간 안에 결과 분석이 가능한 장점을 가지고 있다. 뿐만 아니라 일반 PCR 방법보다 민감도와 특이도가 높아 정밀한 분석이 가능하다. Real-time PCR법에서는 전체 반응을 추적하기 위해 형광표지물질을 사용하며 이러한 형광물질은 증폭의 매 주기마다 산물이 축적됨에 따라 비례하여 증거하게 된다.Real-Time PCR에는 특정 파장의 빛 에너지를 흡수 하였다가 고유 파장으로 빛을 발산하는 형광 물질을 사용하는데, 크게 SYBR Green, EvaGreen과 같은 intercalator type과 TaqMan probe, Molecular beacon과 같은 primer 형태의 probe type의 형광 dye를 사용하게 된다.TaqMan probe는 Hydrolysis probe의 일종으로 5' 말단에는 형광물질인 reporter가 결합되어 있고, 3' 말단에는 상쇄물질인 quencher가 결합된 형태의 oligo-nucleotide이다. Annealing 단계에서 target DNA에 특이적으로 결합하지만 quencher로 인해서 형광을 발하지 못하다가 다음 과정인 extension step에서 DNA polymerase의 exonuclease activity에 의해 template에 결합된 probe가 가수분해(hydrolysis)된다. 이에따라 quencher에 의해 상쇄되었던 Reporter가 형광을 발하게 되는 원리이다.실험방법PCR reaction 20uldH2017ul1x PCR buffer250uM of dNTP10pmol primers2ul1 unit of Hotstart DNA polymeraseDNA 100ng1ul35 cycles1X2X3Xdenature94℃5’30”annealing61℃1’Extension72℃1’5’① TBE buffer (Tris base, boric acid, 0.5 MEDTA (pH8.0))을 이용하여 total vol이 90ml인 3% agarose gel을 만든다.② 첫째 lane에는 ladder 5ul. 3,4,5 lane에 sample 15ul.6lane negative control 15ul, 7lane positive control PCR product 15ul(2줄을 비우는 이유: ladder가 band 가 많이 있기 때문에 옆 line에 방해 줄 수 있다.)(Enzyme digestion with HinfI. Recognition site: GANTC)Master mix(PCR 필요한 모든재료, 2x→1x)7.5ulForward, Reverse primer1ul씩Probe C,T0.5ul씩Sample (DNA 100ng)1ulD.W3.5Total vol.15ul①PCR reactionNegative: mixture 14 ul + 1ul45 cycles1X2XHold95℃1’annealing95℃15’’Extension60℃45’’② probe: FAM, JOE실험결과 결과11lane-ladder/ 3lane- CC/ 4lane- CT/ 5lane- TT/ 6+7 lane (error) 결과21조 - sample1(CC)1조 - sample2(CT)1조 - sample3(TT)1조 - negative controlTyping: Wild homozygout CC (FAM reaction & JOE no reaction)Heterozygote CT (FAM reaction & JOE reaction)Mutant homozygote TT (FAM no reaction & JOE reaction)고찰 결과1 3,4,5 lane CC,CT,TT임을 알 수 있는 밴드를 관찰할 수 있다. 그 외 희미하게 다른 밴드도 보이는데 이러한 잡밴드가 나타나는 원인에 대해 여러 가지 추측을 해볼 수 있을 거 같다. 우선 PCR fragment일 수 있다. 또는 enzyme mixture의 어떤 molecules 일수도 있다. Primer가 딴 곳에 붙어서 아주 작은 밴드를 만들었을 수도 있다. Negative control 없어서 정확한 이유는 알 수 없다. 6lane은 15ul들어갈곳에 30ul가 들어갔기 때문에 다른 밴드보다 더 두꺼운 밴드를 관찰할 수 있다. 5lane 200bp근처에 희미한 밴드도 관찰할 수 있는데 이것은 시간이 짧아 잘리다 만 것으로 생각된다. 다음 실험에는 negative가 투명할수도 있으니 색이 아닌 몇 번 lane인지 생각하면서 실험에 임하도록 해야겠다.

자연과학| 2015.06.24| 7페이지| 1,000원| 조회(632)

유전학, 생화학, Real-time PCR, PCR-RFLP

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[A+ 실험보고서 결과사진포함] Elisa analysis

인류 유전학 심화연구Elisa analysisFor human VEGF concentration담당교수:학 과: 의생명과학과학 번:이 름:실험소개 & 목적실험목표: Human serum 에 존재하는 VEGF를 정량 분석하여 가장 널리 쓰이는 ELISA의 방법 및 원리와 종류에 대해 알아보자.ELISA: 효소면역정량법. 가장 널리 쓰이고 있는 항원-항체 분석법으로 항원-항체 반응을 이용하여 샘플 미량 존재하는(ng/ml)항원 또는 항체의 정성, 정량을 분석할 수 있는 실험이다.항체(또는 항원)에 효소를 표지하고 효소활성을 지표로 하여 항원항체반응의 강도를 확인하고 이를 통해 항원(또는 항체)을 정량적으로 측정하는 방법. 반응형식을 크게 나누면 효소표지항체(또는 항원)과 비표지항원(또는 항체)를 경쟁시키는 것과 경쟁시키지 않는 것이 있다. 경쟁반응에는 항체를 지지체(폴리스티렌볼 또는 관바닥)에 결합시키는 고상법과 결합시키지 않는 액상법 및 상동성 EIA법이 있다. 비경쟁반응에는 샌드위치법, 면역효소기질법, 고상법 등이 있다. 표지효소로는 과산화효소, 알칼리인산가수분해효소, 갈락토시드가수분해효소, 포도당산화효소등이 이용되고 있다.보통의 실험실에서 쉽게 사용되고 있는 기법으로 “wet-lab” type의 생화학적 방법으로 liquid sample이나 wet sample상에 존재하는 물질을 정량하거나 검출할 수 있습니다. ELISA의 원리는 “immune assay”대신 “ligand binding assay” 이 실험을 처음 개발했을 때 immune-assay based여서 지금까지 “immune-assay”라고 불린다. ELISA에서 가장 중요한 것은 고체지지대(보통 plate)에 강하게 붙어 있는(immobilized) ligating reagent이다. 이 ligating reagent가 무엇이냐에 따라서 우리가 검출(detection)할 수 있는 물질이 달라지게 된다. ELISA를 하면서 여러 번의 washing step이 있는데 이 step을 거치면서 원하는 물질과 강하게 binding되어있는 substance or protein or antibody들은 고정되어서 plate상에 붙어있지만 binding하지 않는 물질들은 씻겨 내려간다.즉 ELISA는 효소를 이용하여 항체나 항원이 고체상에 흡착되어 흡착되지 않은 자유 항원을 세척함으로써 원하는 단백질을 분석하는 원리의 실험이다.실험방법Coating: capture antibody를 plate에 coating.일반적으로 Kit의 경우, dl capture antibody가 coating된 상태로 제공된다.Blocking: Sample antigen과의 specific binding을 위해 다른 표면을 block. 일반적으로 Kit의 경우, capture antibody coating 후 blocking이 된 상태로 판매된다Antigen binding: antigen이 존재하는 sample을 처리Detection antibody binding: target antigen을 specific하게 인식하고, biotin이 labeling된 detection antibody 처리Enzyme conjugate binding: enzyme(HRP)dl conjugation된 Avidin 또는 streptavidin을 처리Substrate 처리: enzyme과 반응 하는 substrate(TMB)를 처리Detection: ELISA reader 기기를 이용해 OD값을 측정실험결과VEGF ELISA St calc.Standards (ng/mL)VEGF ELISA Sample calc.SampleConcODSample (ng/mL)ODConcSt011.51.307Un29-0.0330.011St020.750.707Un300.0330.055St030.3750.387Un31-0.0040.029St040.1880.2Un320.0370.058St050.0940.066St060.0470.014St070.023-0.002고찰ELISA에는 단백질의 항원 항체 반응이 대부분의 단백질에 반응하는 것을 이용해서 단백질의 유무를 검출하는 indirect ELISA 와 1,2차 항원 항체반응을 통해 특정 단백질의 발현을 관찰할 때 사용하는 sandwich ELISA, 항체에 대한 항원을 경쟁적으로 처리해서 일정한 항체만 항원에 달라붙게 만드는 competitive ELISA가 있는데 우리가 사용한 방법은 sandwich ELISA 이다.

자연과학| 2015.06.24| 4페이지| 1,000원| 조회(604)

유전학, ELISA, analysis, indirect, sandwich ELI..

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공간예술의 이해 (제2과제)-나의 공간 바꾸어보기

나의 공간 바꾸어보기-제 2과제-과 목 명: 공간예술의 이해교 수 명: 성 인 수 교수님제출일자:학 과 명:학 번:성 명:학교마크/학교이름 나의 공간 바꾸어보기과 학번 이름 /우리 집1. 나에게 익숙한 공간 소개 근린(발곡)공원[1] 나에게 근린공원우리 집에 걸어서 5분정도 거리에 근린공원이 있다. 공원 가운데에는 농구장이 있으며, 농구장을 중심으로 주변에 산책길과 벤치가 있다. 발곡중학교를 다닐때는 아침마다 공원옆길로 학교를 가곤했다. 그때는 저녁에는 학교에서 노는 애들이 화장실 뒤편에서 담배를 피거나, 돈을 뜯어낸다고 저녁 늦게는 돌아다니지 말라곤 했다. 그래도, 학교와 가장 가까운 장소로 중학교 졸업사진도 여기 공원에서 찍었었다.나에게 지금의 공원은 친구와 저녁 늦게 수다를 떠는 장소이기도 하며, 답답할 때 앉아있는 장소이다. 그래서 이 장소는 나에게 많이 익숙하고 편안한 장소이다.[2] 동네 사람들에게 근린공원아침에는 어르신들이 쉬는 장소이고, 낮에는 아기들이 뛰어놀고, 엄마들은 수다를 떠는 장소이다. 날씨가 좋으면 돗자리를 피고 도시락을 먹으며 소풍 기분을 내기도한다. 오후에는 수업 끝난 학생들이 농구를 한다. 저녁 먹고 이후에는 어른들과 학생들이 같이 농구시합을 하고, 그옆에는 캐치볼, 배드민턴을 한다. 살을 빼기 위해 공원 주변을 조깅하는 분들도 계시고, 줄넘기를 하는 분도 있으시다. 기타를 매우 잘 치는 아저씨가 이따금씩 연주를 하시기도 한다.이처럼, 근린공원은 우리 동네 주민들에게 편안한 휴식공간이다. 아이들의 놀이터도 되기도 하고, 만남의 장소되기도 하고, 운동을 하기도 하고, 또 다른 누군가에게는 악기 연습실이 되기도 한다.2. 변화주기[1] 변화 전 (현재)사진으로 우선 그린공원을 보면 중앙에 넓은 농구장이 있고, 그 옆에는 정자들이 있다. (사진 1, 사진 2) 농구장 둘레로 조깅할 수 있는 산책로가 있으며, 그 산책길 겉 둘레에는 나무가 심어져 있고, 앉아서 쉴 수 있는 벤치가 있다. (사진 3) 농구장 뒤쪽으로는 화장실이 있다. (사진 4)[2] 변화 후 (상상)크게 4부분을 바꾸었다. 우선, 정자가 앞으로 많이 튀어나와 있어서(농구 코트와 가까움) 농구를 하고 있으면 작은 길에서 큰길로 갈 때 뒤로 돌아가야 하기 때문에 정자와 벤치의 위치를 바꾸어 보았다. 화장실 앞의 나무를 화장실 뒤로 이동시켰다.화장실 앞 공간에서 사람들이 배드민턴 치곤 하는데 나무의 위치가 애매해서 배드민턴공이 자주 걸렸다. 또한, 배드민턴 치는 동선에 나무가 있었기에 배드민턴 또는 캐치볼을 할 때 공을 따라 아무 생각없이 쫓아갈 때 나무에 부딪힐 위험도 있었기에 다음과 같이 변화를 주었다.과제하기 전 공원 사진을 찍으러 갔을 때 사람들이 버리고 간 쓰레기들이 있었다. 비양심적인 사람들의 행동이라 생각하지만, 공원의 크기에 비해 쓰레기통의 수도 적다는 생각도 들었다. 그래서 공원 드나드는 길에 쓰레기통을 배치함으로써 좀 더 깨끗한 공원이 유지될 수 있게 하였다.마지막으로 벤치와 정자만이 아닌 흔들의자와 해먹을 배치해보았다. 막 다루지 않고, 자신의 물건인 것처럼 잘만 다루어 유지가 잘 된다면, 정말 행복한 휴식을 취할 수 있는 공간이 될 수 있도록 하였다.3. 나의 기분 & 주변사람 기분[1] 나의 기분우선 나의 취향대로 배치하였기에 나는 매우 만족스럽다. 정자와 벤치의 위치를 바꿈으로써 돌아갔던 길을 좀 더 짧게 갈 수 있게 되었다. 또한, 나무를 화장실 뒤로 이동함으로써 공간을 좀 더 넓게 사용할 수 있게 되었고, 친구와 공원에서 배드민턴 칠 때 공이 나무에 걸려 나무를 흔들 일도 없어져서 너무 좋다. 쓰레기통이 잘 관리가 안 된다면 악취가 날 수도 있지만, 쓰레기를 아무데나 버리는 것보다 나을 것 같다. 모두가 사용되는 공간인 만큼 쾌적한 환경으로 깨끗하였으면 좋겠다. 마지막으로 흔들의자와 해먹을 설치함으로써 좀 더 다양한 방법으로 휴식을 취할 수 있고, 친구와 수다를 떨 수 있기에 더 행복한 공간이 된 거 같다.

공학/기술| 2015.03.25| 5페이지| 1,000원| 조회(1,329)

공간예술, 공간예술의이해, 공간예술의이해 제2과제, 공간바꾸어보기, 나의 공간

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