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물리약학 레포트 Fabrication of Chitosan-coated alginated bead

Fabrication of Chitosan-coated alginated bead실험일자담당교수분반이름조/학번1. Date2. Name / part3. Principle1) Alginate (alginic acid)해초에서 얻을 수 있는 L-guluronate와 D-mannuronate의 두가지 단량체가 반복된 선형 고분자이며 아래에서 보다시피 -COOH기를 보유하기에 음이온성을 띤다. 물에 녹으면 점성을 띄게 되어 gel, film, fiber 형태로 만들 수 있다. Ca2+와 같은 양이온과의 상호작용으로 gel을 형성할 수 있으며 이것을 칼슘경화반응이라 한다 Alginate의 구조2) chitosan갑각류의 껍질에서 얻은 chitin의 deacetylation으로 얻어지는 고분자이며, beta-(1,4)-linked D-glucosamine (deacetylated unit)과 N-acetyl-D-glucosamine의 반복된 형태로 구성되어 있다. 생분해가 되며 점막에 잘 붙는 성질을 가지며 따라서 생체에 이용하기에 아주 적합한 형태라고 할 수 있다. 자원을 얻기가 비교적 용이하고 반응성이 좋은 편이기에 대량생산이 가능하여 비교적 저렴한 이점이 있다. 이러한 이점에 따라 점액접착성 제형, 소수성 약물 또는 유전자 약물의 전달체로 이용되고 있다. chitosan의 구조3) Chitosan coated alginate microparticleAlginated bead는 다공성이기에 봉입된 약물은 빠르게 방출되어 서방출 용으로 이용하기에 한계가 있다. 따라서 빠르게 배출되는 것을 막고 서방출하도록 만들기 위해 bead 표면에 다른 고분자를 이용해 코팅하기도 한다. Alginate는 음이온을 띄기에 coating용으로는 양이온을 띠는 chitosan(amine기를 보유하여 양이온을 띠는 다른 고분자도 가능)이 적합하다. 이것은 정전기적 상호작용을 이용하는 것이며 이렇게 coating된 bead의 경우 coating이 방출제어막 역할을 해주어 약물이 서방출되게 된v sodium alginate 수용액 (1g/50ml)을 제조했다. 이때 sodium alginate 1g를 조금씩 넣었다.(2) (1)에 0.25g의 Rose Bengal을 분산시켰다.(3) 제조된 0.1M-CaCl2 수용액 40ml를 피펫 에이드로 삼각플라스크에 넣었다.(4) 5mL syringe에 (2)을 4mL 이상 채웠다.(5) (3)을 magnetic stirrer로 서서히 교반하면서 (4)를 한 방울씩 떨어뜨렸다. 이때, 너무 느리게 떨어뜨릴 경우 도중에 굳어서 나오지 않기 때문에 적절한 속도로 떨어뜨렸다.(6) 위의 (4)을 모두 떨어뜨리고 약 5분간 방치한 다음, 형성된 bead를 건져 철망에 올리고, 아래에 티슈를 깔아 물기를 흡수시켜 건조시켰다.(7) (6)에서 생성된 bead를 각 군에 동량이 사용될 수 있도록 무게를 쟀다. (0.8g 씩)(8) 절반의 bead를 1% w/v Chitosan 산성용액에 코팅시켜주기 위해 10mL vial에 Chitosan 용액 5mL를 채우고 bead를 넣어 orbital shaker에서 교반하며 코팅했다. (50rpm, 40분)(9) (8)의 bead를 건져 그물망 안에 코팅된 bead와 코팅하지 않은 bead를 각각 넣고 magnetic stirrer로 교반하면서 50mL 증류수에서 release시켰다. (70mL vial)(9) 1분, 4분, 7분, 15분, 30분에서 각각 2mL씩 syringe로 취해서 흡광도를 측정했다. (550nm) (증류수로 용량보정)6. Result1) 2% w/v sodium alginate 수용액 제조sodium alginate에 Magnetic bar를 넣었지만 잘 녹지 않는 부분은 약수저로 더 저어주었다. 교반 후 시간이 지나자 점도가 있는 액체가 되었다. 이후 rose bengal을 넣으니 붉게 변했다.2) bead 제조Bead는 작은 구형태로 만져보았을 때 적당히 탄력있는 질감이었고 needle에서 떨어지는 속도를 일정하게 하면 비슷한 크기의 bead를 만들 수Na+와 Ca2+가 치환되면서 Ca2+를 중심으로 두 가닥의 alginate가 망상을 형성하기 때문이다. 알긴산은 금속 이온을 포접하는 특징을 가지고 있으며 금속염을 가하면 가교결합을 형성해 하이드로겔화되며 2가 양이온을 알긴산이 egg-box형태로 감싼다. 일반적으로 나트륨염은 비교적 용해가 잘 되지만 칼슘염은 잘 녹지 않는다. 그 이유는 이온의 용해성과 엔트로피의 관계로부터 알 수 있다. 이온이 물에 용해되면 고체인 결정에 비해 더 무질서해진다. 그래서 대부분의 용해는 자발적으로 엔트로피가 증가하는 방향으로 물질의 변화가 일어난다. 그러나 물에 용해된 이온 중에는 많은 물 분자가 이온을 에워싸서 물 분자의 무질서한 배열을 방해하기도 한다. 특히 이온의 전하가 커질수록 물 속에서 더 많은 물분자와 결합하여 물분자의 자유롭고 무질서한 배열을 방해하는 효과가 커진다. 이러한 이유로 Na+, K+ 등은 용해성이 좋은 반면, Ca2+, Mg2+등은 용해성이 떨어지는 것이다. 이와 같은 원리로 CaCl2수용액에서는 알긴산 칼슘염이 형성되어 물에 녹지 않는 겔 상태의 막이 생긴다. 즉, 이를 이용해 CaCl2 수용액에서 구슬모양의 bead를 만들 수 있다.2) 시간-흡광도 graph를 한 용지에 plot하여 각각의 용출 패턴을 비교 설명 코팅 유무에 따른 bead의 시간-흡광도 그래프Chitosan을 코팅하지 않은 alginate bead인 대조군과 chitosan-coated alginate bead인 실험군의 rose bengal용출패턴은 위의 그래프와 같다. 그래프를 보면 모든 time-point에서 대조군이 실험군보다 rose bengal을 더 많이 용출 시켰고, 이에 따라 550nm에서 더 높은 흡광도를 나타냈다.coating되지 않은 bead는 초기에 급격히 용출되다가 이후에는 속도가 줄게 되는 양상으로 용출했고 실험군은 전반적으로 기울기가 완만하고, 용출양상이 일정했다. 직선성은 대조군 R² = 0.9159, 실험군 R² = 0.9748 으로 직선성이 성립-기를 갖는 고분자기 때문에 alginate가 음이온으로, chitosan이 양이온으로서 electrostatic interation에 의해 복합체를 형성한다. Chitosan의 amino기의 pKa가 약 6.5이고, alginate의 -COOH기의 pKa는 3.4-4.4범위이다. 따라서 pH가 해당 범위를 유지하면 alginate의 deprotonated form과 chitosan의 protonated form이 공존하므로 두 고분자 사이의 상호작용이 일어나 복합체를 형성할 수 있다.4) Alginate bead 를 약학적으로 응용 시 고려해야 되는 요건① 봉입하는 약물의 특성Alginate bead는 hydrophilic한 조건에서 생성되는 고분자 물질이므로 hydrophobic drug 보단 hydrophilic drug가 봉입에 유리할 것으로 생각된다. 그러나 높은 hydrophobic물질이더라도 multiple phase emulsion technique를 통해 alginate microsphere안에 포함될 수 있다. 현재 alginate bead 에 봉입하여 사용하는 약으로는 indomethacine, diclofenac sodium, ketoconazole 등이 있고 이 약들은 산소나 질소를 가지고 있는 hydrophilic한 약물이다.② 원하는 방출 메커니즘Alginate bead의 약물 방출 속도는 약물 봉입 비율에 따라 조절이 가능하며 pH에 따라 약물이 방출되는 양상이 달라져 장에서 방출되도록 하는 등의 약학적 응용이 가능하다.예를 들어, 산, 염기에 불용성인 고분자나 pH 5이상에서만 용해되는 polymer를 사용하여 코팅함으로써 약물을 위산으로부터 보호하고 소장, 대장에서만 방출되도록 조절할 수 있다. 또한 이번 실험에서 coating한 경우처럼 chitosan으로 coating할 경우 약물 방출을 제어하여 서방출 되도록 할 수 있다.③ Target particle sizeBead의 크기가 작을수록 단위부피당 표면적이 커지는 꼴이기에 나뉜다. Wet alginate bead는 92.2~96.9% 정도로 90% 이상의 높은 수분함량을 보이며 절대적인 값은 아니다. 이 bead는 작은 압력만으로도 쉽게 깨질 수 있어 추가 공정을 통해 강도를 높여 제작 가능하다. Drug matrix alginate bead는 수분함량이 10% 이하로 freeze-drying시에 11.4%, vacuum drying 시 11.0%, vacuum drying 시 11.0%, air-forced oven drying 시 7.9%로 10% 전후의 다양한 값을 가진다. Final bead의 99 wt% 만큼까지 약물함유가 가능하다.8. DiscussionAlginate bead를 직접 만들어보고 chitosan 코팅 여부에 따라 약물 방출 속도가 어떻게 되는지를 비교해보는 실험을 했다.먼저, sodium alginate는 물을 만나면 alginate가 서로 뭉쳐서 표면장벽을 줄여 안정화하려는 경향이 커 녹이기 힘들었다. 온도를 높이면 더 수월하게 녹일 수 있었지만 온도가 너무 높으면 alginate자체에 변성이 일어나므로 적당히 따뜻한 온도로 끓지 않게 잘 조절해야 했다. 그럼에도 불구하고 약간의 alginate가 뭉쳤기 때문에 2% 보다 묽은 sodium alginate가 만들어졌을 것이다.우리조 (4조)의 bead의 크기가 5조 bead 크기보다 작았는데 이는 sodium alginate 농도가 더 묽었거나 syringe로 bead를 만드는 속도가 빨랐거나 hot plate를 덜 식혔기 때문일 수 있다.흡광도 측정 결과 코팅되지 않은 bead에서 7분 흡광도가 15분째 흡광도보다 높게 나왔는데 이는 pipetting 하는 위치가 일정하지 않았을 수 있고, 15분째 cuvet에 증류수가 남아 희석되었을 수 있다고 판단했다.시간에 따른 약물 방출 양상이 chitosan 코팅을 하지 않은 bead에서는 1차 속도식을, chitosan 코팅을 한 bead는 0차 속도식을 따랐다. 또한 흡광도 결과를 분석 시 같은 시간에18

공학/기술| 2024.06.02| 7페이지| 4,000원| 조회(116)

레포트, 키틴, chitosan, 물리약학, fabrication, 이화약대, 알긴..

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약물학실습/ Rat 적출 회장하여 Atropine투여 전후 Acetylcholine농도에 따른 장력 변화 비교 physiograph 관찰 및 Atropine 투여 전 후 Rat에서 Acetylcholine투여에 따른 혈압 변화 in-vivo관찰

제목: Rat 적출 회장하여 Atropine투여 전후 Acetylcholine농도에 따른 장력 변화 비교 physiograph 관찰 및Atropine 투여 전 후 Rat에서 Acetylcholine투여에 따른 혈압 변화 in-vivo관찰실험일자:개인 투여현황 , 참고실험자(Authors):실험환경 특이사항: 실험동물 수가 적어 동물들이 조용했고, 전체적으로 소란스럽지 않은 분위기였다. 날씨는 25도, 실내는 상온 정도로 적당했다.서론(introduction)첫 번째 실험에서는 Rat의 신선한 회장을 적출하여 자율 신경계에 작용하는 약물(Acetylcholine, Atropine, KCl, Phenylephrine)의 농도에 따라 약리 작용에 어떻게 반응하는 지 알아보고자 하는 것이 목적이다. 두번째 실험은 약물을 경정맥에 직접 주입하고 약물(Ach, Atropine, Phenylephrine)과 농도에 따른 반응을 보기 위해 physiography로 측정하고자 한다.Acetylcholine은 소화관 평활근과 혈관에서 모두 동일한 Muscarinic Receptor에 작용한다. 그러나 소화관 평활근과 혈관에서 동일한 방향의 수축 또는 이완을 일으키지 않는다. 혈관에서의 작용은 평활근에 직접 작용하는게 아니라 우선적으로 혈관내피세포에 있는 Receptor에 작용하여 NO를 방출시키게 되고 NO가 혈관 평활근으로 가서 신호전달을 야기하여 혈관 평활근 이완을 유발하게 되기 때문이다. 혈관평활근에 작용하는 Ach의 기전은 다음과 같다.Ach이 장관 평활근을 수축시키는 기전은 다음과 같다.Atropine은 muscarinic receptor에 작용하는 경쟁적 길항제로서 Acetylcholine의 부교감 신경 자극효과를 차단한다. KCl을 세포 외부에 넣을 경우 막전위가 높아지게 되어 세포막이 탈분극에 더 용이 해지므로 근육의 voltage-gated Ca channel은 쉽게 threshold에 도달하기 때문에 K+유입에 의해 무작위적인 수축을 기대할 수 있다. 만약 lcholine 투여농도순서Drug(stock농도)투여량최종 Ach농도 (solution: 50ml중)투여자15 * 10-6 M0.1 ml5 * 10-6 M * 0.1ml/50.1ml = 1.00 * 10-8 M20.9 ml5 * 10-6 M * 1ml/51ml = 0.98 * 10-7 M35 * 10-4 M0.1 ml(5* 10-6 M* 1ml + 5* 10-4 M* 0.1ml)/51.1ml =1.08* 10-6 M40.9 ml(5* 10-6 M* 1ml + 5* 10-4 M* 1ml)/52ml = 0.97* 10-5 M55 * 10-3 M1 ml(5*10-6 M*1ml + 5*10-4 M* 0.1ml+ 5*10-2 M*1ml)/53ml = 1.04*10-4 M5번 약물 투여 3분 후 Tyrode solution으로 washing 2회를 연속으로 한 후 5분의 회복 시간을 두었다. Physiograph가 basal line으로 돌아온 것을 확인했다. Atropine 5 * 10-4 M 0.1ml를 투여하고 10분 후 아래의 조건에 따라 acetylcholine을 투여했다. 마찬가지로 3분의 간격을 두고 투여했다. Washing 후 Acetylcholine 투여농도순서Drug(stock농도)투여량최종 Ach농도 (solution: 50ml중)투여자65 * 10-3 M0.01ml5 * 10-3 M * 0.01ml/50.01ml = 1.00 * 10-6 M70.09ml5 * 10-3 M * 0.1ml/50.1ml = 1.00 * 10-5 M80.9ml5 * 10-2 M * 1ml/51ml = 0.98 * 10-4 M95 * 10-2 M0.9ml(5* 10-3 M* 1ml + 5* 10-2 M* 0.9ml)/51.9ml = 0.96* 10-3 MWashing을 2회 하고 5분간 회복 시간을 두었다. KCl 4.0M 0.91ml투여 후 2분 간 관찰했다. 수축그래프를 통해 회장이 살아있음을 확인하고 Washing은 하지 않고 Phenylephrine 5 * 10-4 ~17KCl 4.0M 0.91ml0.26272.91021.323717~18Phenylephrine5*10(-4)M1.0ml0.89091.22881.0559 전 과정에 걸친 투여 약물에 따른 장력 변화 Wash#1 전 투여 약물에 따른 장력 변화 Wash#1 후 투여 약물에 따른 장력 변화그래프의 x축은 의 x축과 과정이며, y축은 약물 투여에 의한 실의 장력 변화를 transducer가 전기적 신호로 변환한 값으로 단위는 g이다.Acetylcholine은 위장관 평활근의 무스카린 수용체에 결합하여 수축을 유도하는 물질이다. 따라서 Acetylcholine의 최종 농도가 높아짐에 따라 평활근의 수축이 더 많이 일어나게 되어 장력을 더 크게 걸리게 할 것으로 예상했다.→실험 결과, Ach을 넣은 후 회장의 수축을 관찰할 수 있었으며 Ach용량과 농도에 따라 수축 값이 1.1428-> 1.222->1.7545->2.4436->2.7506g (mean)으로 증가했다. (R² = 0.9511) Ach 농도에 따른 평균 장력 변화는 다음과 같다. 세척 후 Atropine만을 투여했을 때는 atropine이 세포내 반응을 유도하지 않는 pure antagonist로 장력의 변화는 일어나지 않을 것으로 예상했고, Ach을 넣어주면 Atropine이 Ach의 경쟁적 저해제로서의 역할을 하므로 수축반응이 일어나지 않을 것이라 생각했다. Ach의 농도가 높아지면 Muscarinic receptor가 atropine대신 기질인 Ach과 결합할 수 있으므로 평활근의 수축이 일어나 장력의 증가가 일어날 것으로 예상했다.→Atropine을 넣어주자 일시적으로 장력이 감소를 보였고, 저 농도의 Ach을 투여에 장력의 변화가 예상과 동일하게 미미했다. 고농도의 Ach를 투여하자 장력이 커졌다.세포 외부에 KCl을 넣을 경우 막전위가 높아지게 되어 세포막이 탈분극에 더 용이 해지므로 수축이 일어날 것으로 예상했다. (회장이 기능을 한다면)→실험결과, 순간적으로 크게 수축함을 보여 회장이 살지 않으므로 혈압에는 큰 영향을 주지 않지만, 저용량에서는 Atropine이 Presynaptic M2을 막아서 일시적 서맥이, 고용량에서는 postsynaptic M2를 막아서 미주신경억제로 빈맥이 발생할 수 있기 때문이다.세번째 순서인 Atropine 투여 다음에 16ug/ml Acetylcholine을 같은 양 투여하면 혈압이 일정하게 유지될 것이라고 예상된다. Atropine이 Muscarinic receptor를 이미 차지하고 있어서 투여된 Ach이 receptor에 작용할 수 없기 때문이다. Heart rate 또한 혈압처럼 아무런 반응이 없을 것으로 예상된다.네번째 순서인 고농도의 Ach을 투여하면 혈압이 상승할 것으로 예상된다. Acetylcholine이 부교감 신경 말단에서 나오는 신경전달 물질이지만 동시에 교감신경, 부교감 신경의 신경절에서도 신경전달물질로 작용하기 때문이다. Muscarinic receptor는 앞서 투여해 준 Atropine에 의해 block된 반면, 교감신경, 부교감신경의 절후 신경의 receptor는 nicotinic receptor이다. Ach는 N receptor에 작용하여 부교감, 교감신경 절후 뉴런을 활성화시켜 부교감신경 말단에서는 Ach, 교감신경 말단에서는 NE가 분비되도록 한다. 부교감 신경 말단에서 분비된 Ach는 Atropine때문에 작용하지 못하고, NE만이 혈관에 작용해 혈관이 수축하고 그 결과 혈압이 상승한다. 베타 수용체에 Ach이 작용하여 심박수 또한 증가할 것으로 예상된다.다섯 번째 순서인 Phenylephrine을 투여하면 혈압이 상승할 것으로 예상된다. Phenylephrine과 NE는 혈관 평활근에 많이 분포하고 있는 알파1 수용체에 작용한다. 알파1 수용체도 Gq coupled 되어 있어서 일련의 과정을 거쳐 세포 내 칼슘이온 농도를 높이는데 이는 혈관 평활근의 수축을 일으킨다. 따라서 혈관이 수축하고 혈압은 증가할 것이다. 그러나 atropine에 의해 reflex가 차단되었기 때문에tropine이 Muscarinic 수용체를 억제하여 부교감 신경이 심장에 작용하더라도 심박수의 변화는 일어나지 않기 때문이다.네번째 Ach 16ug/ml을 투여하면 혈압이 감소하지도 않고 일정하게 유지될 것이라고 예상된다. Atropine이 Muscarinic receptor을 이미 억제하고 있기 때문에 투여된 Ach이 receptor에 작용할 수 없기 때문이다. Heart rate는 혈압처럼 아무런 반응이 없을 것으로 예상된다.다섯 번째로 고농도 Ach 12mg/ml를 투여했을 때 혈압이 증가할 것으로 예상된다. Acetylcholine이 부교감 신경 말단에서 나오는 신경전달 물질이지만 동시에 교감신경, 부교감 신경의 신경절에서도 신경전달물질로 작용하기 때문이다. Muscarinic receptor는 앞서 투여해 준 Atropine에 의해 block된 반면, 교감신경, 부교감신경의 절후 신경의 receptor는 Nicotinic receptor이다. Ach는 nicotinic receptor에 작용하여 부교감, 교감 신경 절후 뉴런을 활성화시켜 부교감신경 말단에서는 Ach, 교감 신경 말단에서는 NE이 분비되도록 한다. 부교감 신경 말단에서 분비된 Ach는 Atropine의 억제작용 때문에 작용하지 못하고 NE만이 혈관에 작용해 혈관이 수축하고 그 결과 혈압이 상승하고 heart rate이 증가될 것으로 예상된다.실험 결과 Phenylephrine 20ug/ml 투여 시 혈압은 두 시점에 걸쳐 증가한 후 회복되었고 심박수는 약간 감소했다. Atropine 4mg/ml 투여 후 혈압은 감소되었으며 심박수는 약간 증가되었다. Phenylephrine 20ug/ml 혈압은 증가되었다가 회복된 상태를 유지하였으며 심박수는 변화가 없어 보였다. Ach 16ug/ml를 투여 후 혈압은 약간 감소 후 회복되었고 심박수는 변함이 없었다. 고농도 Ach 12mg/ml 투여 후에는 혈압이 크게 감소된 듯 보였으나 회복되었고 심박수는 감소 되었다가 회복되었다. 두번째 약물투여일진사)

의/약학| 2024.06.01| 10페이지| 5,000원| 조회(111)

Atropine, acetylcholine, 약물학실습, 적출회장, in-viv..

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약물학실습/ Chlorpromazine 유도 파킨슨증 모델의 apomorphine과 ropinirole의 치료효과 및 scopolamine유도 인지장애 모델의 donepezil 효과

Chlorpromazine 유도 파킨슨증 모델의 apomorphine과 ropinirole의 치료효과 및 scopolamine유도 인지장애 모델의 donepezil 효과제출일담당교수교수님이름학번제목: chlorpromazine유도 파킨슨증 모델의 apomorphine과 ropinirole의 치료효과 및 scopolamine유도 인지장애 모델의 donepezil효과실험일자:개인 투여현황 mouse#1,4 / mouse#2,5 / mouse#3,6실험자(Authors):실험환경 특이사항: 22℃ 정도의 날씨, 실내는 실온으로 활동하기 좋은 온도였다. mouse 6마리 모두 실험 전 활발한 모습이었으나 무게를 잰 후부터는 자신의 발을 마구 긁기도 하고 서로 모여 의지하는 것으로 보아 스트레스를 어느정도 받은 것으로 보였다. 실험은 어두운 조명의 환경에서 진행되었다.서론(introduction)Rota-rod test를 통해 chlorpromazine이 파킨슨병을 유도할 수 있음을 확인하고 파킨슨병 치료 약물인 Apomorphine과 Ropinirole의 효과를 알아보고자 한다. 또한 scopolamine으로 인지장애 모델을 만들고, passive avoidance test를 통해 인지 장애 치료약인 donepezil의 효과를 관찰하는 것이 목표이다.파킨슨증은 경직, 운동느림증(bradykinesia), 떨림, 자세불안정(postural instasbility) 등이 특징이며, 다양한 원인에 의해 발생할 수 있으나 특발성인 경우가 대부분이다. 파킨슨병 진단 전에 서동이 반드시 나타난다. 국소적 근긴장이상의 특징이 나타나기도 한다. 많은 환자에서 질병의 진행과 더불어 인지기능 저하가 나타난다. 다른 비운동성 증상으로 정서질환, 정신착란, 인지장애, 성격변화, 무감동, 자율신경기능 이상(예: 괄약근 또는 성기능 장애, 연하곤란, 숨막힘), 수면질환, 감각이상 호소, 또는 통증이 있다. 이 질병은 치유 불가능하며, 일반적으로 진행성이고, 시간이 지남에 따라 장애가 악화되지 receptor효능약이다. 경미한 증상의 환자에서 단독요법으로 효과적이며, 질환이 더욱 진행된 환자와 반응변동성을 보이는 환자가 levodopa에 부드럽게 반응하 수 있도록 하기 위한 목적으로 사용할 수 있다. CYP1A2에 의해 대사되기 때문에 간에서 CYP1A2에 의해 대사되는 다른 약물에 의해 청소율이 현저히 감소될 수 있다.rota rod performance test는 중추신경계 안전성 약리시험에 포함되는 실험으로서, 행동약리학 검사에 해당이 된다. rotarod test는 rat과 mouse에 공통적으로 이용되며 고정속도 또는 점점 가속되는 속도를 적용한다. 떨어지는데 걸리는 시간 또는 1회 시행에서 떨어지지 않고 남아있는 동물의 수를 측정한다. 시험물질 투여 전에 사전교육을 통해 익숙하게 함으로써 시험의 편차를 줄이곤 한다. 우리 실험에서도 적응 훈련을 시행하고자 한다. rotarod test는 시험자체가 단방향성이서 시험물질이 신경근 협조를 감소 시키는지만을 알아볼 수 있다. 일반운동 활성 검사와 같이 수행하면 자발적인 운동활성을 변화시키는 용량과 운동기능을 방해하는 용량 범위를 계량할 수 있다.두번째 실험에서 만들고자 하는 인지기능장애 모델, 즉 Alzheimer's disease는 치매를 일으키는 가장 큰 원인질환이다. 미국의 경우 치매 환자의 약 절반은 AD가 원인이며 혈관성 치매, Lewy소체에 의한 치매, 전두엽과 측두엽의 위축에 의한 치매 등이 원인인 것으로 알려졌다. AD환자의 대부분이 65세 이상이기 때문에 일반적으로 노인질환으로 간주된다. 그러나 드물지만 65세 이전에 발병되는 경우도 있으므로 AD가 반드시 노인질환은 아니다. AD의 발병기전은 아직까지도 정확히 밝혀지지는 않았지만 유전적 요인과 환경적 요인이 작용하는 것으로 알려져 있다. 유전적 요인에는 염색체 1번, 14번, 21번에 변이가 일어나는 유전자 결함이 원인인 것으로 추정된다. 이 3가지 염새체는 early-onset AD의 병인과 관련이 있다. 환경적 요인에는 잘에서 아세틸콜린의 작용을 차단하여 기억력을 감소시키며 drug-induced AD를 발병시킬 수 있다. BBB를 잘 통과하며 I.P로 투여해도 CNS까지 잘 도달한다.Donepezil은 piperidine계열에 속하는 cholinesterase저해제로서 특히 acetylcholinesterase작용을 저해하여 신경간극에서 acetylcholine의 양을 증가시킨다. Donepezil은 acetylcholinesterase의 작용을 선택적으로 억제하며 butylcholinesterase에 대한 억제 작용은 미약하기 때문에 오심,구토,설사 등의 위장관 부작용도 가장 낮아 장기복용 시 복약순응도와 약물이상반응에 있어서 선호되는 약물이다.수동회피실험(passive avoidance test) 역시 앞선 rota rod performance test에서와 마찬가지로 중추신경계 안전성 약리 추적시험에 해당된다. 랫드나 마우스를 주변환경을 인식할 수 있는 방에 위치시키고 해로운 자극을 가한다. 그리고 나중에 실험동물이 그곳에 가지 않음으로써 그 상황을 기억했음을 보여주는 것이다. 우리 실험에서 두 구획 중에서 불이 켜진 구획에 있는 실험동물은 기구를 탐색하면서 결국은 어두운 구획에 들어갈 것이다. 그러면 어두운 구획에서 단시간의 전기충격을 받는다. 그리고 잠시후 다시 밝은 구획에 위치시킬 때, 정상이라면 실험동물은 타고난 습성에도 불구하고 어두운 방에 들어가길 회피한다. 기억상실 유도약물(항콜린성 약물인 scopolamine)을 투여하여 충격에 대한 기억을 감소시켜 암실에 들어가는데까지 걸리는 시간을 줄일 것이다.실험재료 및 실험방법(Materials and Methods)실험1 , motor behavior test (rota-rod test)책상에 신문지를 깔고, 라텍스 장갑과 목장갑을 이중으로 착용한 채 먼저 mouse 3마리를 cage에서 꺼내 구별이 가능하도록 #1, #2, #3을 표시했다. 전자저울에 상자를 올려준 뒤 영점을 맞추고 mouse 3마리의 무게를 측mg * 100ml/0.05g= 0.26mlRota-rod의 받침을 모두 올려준 뒤, rpm을 5로 설정했다. (Setting→5rpm→메뉴→start→ run) rota-tod의 위에 쥐의 머리를 머리를 반대방향으로 하여 mouse를 올려놓고 떨어질 때까지의 시간(latency time)을 측정(Tpre)하며 적응훈련 시켰다. 이때 300초를 목표로 적응훈련을 시켰으며 200초가 넘으면 훈련이 된 것으로 판단하였다. mouse #1과 #3은 2회 반복 적응 훈련시켰으며, #2는 3번을 시험했다.이어 각각의 mouse에 의 계산한 약물 용량대로 injection 했다. 대조군인 mouse#1에는 chlorpromazine과 saline을 연속으로 i.p투여했고(14:11), mouse#2는 chlorpromazine (i.p), Apomorphine (s.c)투여했다. (14:41) mouse#3는 chlorpromazine과 ropinirole을 i.p투여했다. (14:15)30분 후(#1, 3; 14:41/ #2; 15:11)와 60분 후(#1,3; 15:11/ #2; 15:41) mouse를 rota-rod에 올려놓고 각 2회씩 latency time을 측정하고 평균을 계산했다. 추가적으로 mouse#3는 1시간 30분 후, 상태가 좋아진 것으로 보고 rota-rod test를 한번 더 시행하였다.통계는 excel의 ttest방법을 사용했으며, 신뢰구간은 95%(P 8초로 떨어진 것은 잠이 너무 들었거나, off-period 가 나타났기 때문이라고 판단했다. mouse#3은 30분 후 10초, 60분 후는 4초로 #1과 비교 시 약효가 없는 것으로 보였으나 잠에 깊게 들어서 일 수 있다고 판단했다. 살짝 흔들어 mouse#3를 깨웠더니 느림이나 떨림 없이 정상적으로 걸었으며 90분에 재 측정 시 63sec가 나온 것으로 보아 약의 효과가 나타났다고 판단했다. Mouse#2를 바꾸고 시간이 지체되었지만 mouse#3의 상태 회복을 볼 수 있어서 오히려 행운) 모든 조의 통계 처리 결과가설T test 결과(단측, 등분산)결과mouse#1에서 chlorpromazine의 투여전과 30분 후에 차이가 있다.0.00001331***chlorpromazine에 의해 PD모델이 만들어졌다.30분 후 mouse#1과 mouse#2간 유의한 차이가 있다.0.135105P>0.05, Apomorphine에 의해 PD가 예방/치료되었다고 할 수 없다.30분 후 mouse#1과 mouse#3간 유의한 차이가 있다.0.372478P>0.05 ropinirole에 의해 PD가 예방/치료되었다고 볼 수 없다.60분 후 mouse#1과 mouse#2 간 유의한 차이가 있다.0.056834P>0.05 Apomorphine에 의해 PD가 예방/치료되었다고 할 수 없다.60분 후 mouse#1과 mouse#3 간 유의한 차이가 있다.0.149022P>0.05 ropinirole에 의해 PD가 예방/치료되었다고 볼 수 없다.- N=7, 신뢰구간은 95%(P saline)12.413.531.4102.6mouse #5 (saline-> scopolamine)8.317.36.716.4mouse #6 (donepezil-> scopolamine)26.210.45.795 5조의 passive avoidance test의 latency time 비교특이한 점은 #4의 30분 후 latency time이 Tpre보다 작을 거라 판단했는데 31.4sec 로 증가했다. 이는 몇차례의 적응 훈련에서 dark chamber로 이동하면 실험자에게 잡히고 약물을 투여받았던 기억 때문에 이동을 회피했을 것이라는 판단을 했다.#4와 #5를 비교하면 #4에서의 Traning보다 Tpost가 71.2sec만큼 증가된 반면 #5에의 Tpost (90분) latency time이 9.7sec 증가한 것으로 보아 인지기능이 저하된 것을 볼 수 있었으며 #5와 #6를 비교 시 #5보다 #6이 현저하게 증가된 것으로 보아 약물의 효과를 확인했다. 전체 조의 passive avoida5%(P

의/약학| 2024.06.01| 10페이지| 3,000원| 조회(105)

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역상 HPLC/UV를 이용한 indomethacin 분석. 특이성과 직선성 분석 및 미지농도 구하기

역상 HPLC/UV를 이용한 indomethacin 분석.특이성과 직선성 분석 및 미지농도 구하기실험일자담당교수교수님분반이름조/학번1. 제목 & 실험 목적역상 HPLC/UV를 이용한 indomethacin 분석. 특이성과 직선성을 분석하고 미지농도 구하기약물 peak와 retention time을 통해 indomethacin과 docetaxel 의 특이성을 확인하고, 샘플을 계열 희석시켜 직선성을 구하고 미지 약물의 농도를 구하는 것이 실험의 목적이다.2. 방법- Standard samples의 준비Indomethacin 원액(stock solution, 1 mg/mL)을 희석용매 100% acetonitrile를 이용하여 적절히 계열 희석하여 2, 5, 10, 20, 50, 100 μg/mL 농도를 준비했다. 계열희석 방법 (순서는 왼쪽부터 오른쪽으로)100 ug/ml50 ug/ml20 ug/ml10 ug/ml5 ug/ml2 ug/mlIND or 전단계 계열희석한 IND(uL)105040505040ACN(uL)905060505060이 standard samples은 다음 단계에서 HPLC 분석용 samples (drug in rat plasma)을 만들 때 사용되었다. Internal standard로 사용하는 docetaxel(1 mg/mL)은 사용 전 1/10로 희석하여 최종농도 100 μg/mL로 사용했다.-HPLC 분석을 위한 Sample의 준비(drug in rat plasma)EP tube에 200p, 20p pipette을 이용하여 Rat plasma 90 μL + 계열 희석한 indomethacin 10μL + docetaxel (IS, 100μg/mL) 10μL + ACN 90 μL를 순서대로 넣어줬다. (넣는 순서는 혈장→약물→ACN순).따라서 혈장에 들어간 indomethacin의 최종농도는 계열 희석한 농도의 1/10인 0.2, 0.5, 1 ,2, 5, 10μg/mL특이성 확인을 위한 4개의 샘플은 아래와 같은 의 조성으로 만들었다. 4개의 샘플 조성plasma (90μL)IND (100μg/mL, 10μL)DTX (100μg/mL, 10μL)ACN (90μL)Double blank90 μLACN 10 μLACN 10 μL90 μLIND90 μL10 μLACN 10 μL90 μLDTX90 μLACN 10 μL10 μL90 μLIND+DTX90 μL10 μL10 μL90 μL미지 샘플 2개 까지 포함하여 12개의 샘플을 2분간 vortexing한 후 상온에서 13000 rpm으로 15분간 원심 분리했다. EP tube의 유기층에서 60 μL를 취해서 HPLC용 vial의 insert에 넣었다. 이 때, 기포가 들어가지 않게 주의해야 했으며 만일 발생 시 손가락 엄지와 검지로 힘껏 튕겨 기포를 제거했다. HPLC에 vial을 넣고 분석했다. (B동 기기실)-결과 도출을 위한 방법: 특이성(specificity) 확인을 위해 에서 준비한 샘플 4개를 분석하여 각 sample의 peak를 확인했다. 직선성(linearity) 확인을 위해 Indomethacin을 농도 별로 계열 희석한 후 6개의 샘플을 위에서 제시한 방법대로 준비했다. HPLC용 vial에 담긴 총 6개의 sample을 제출한 후, 확인한 chromatogram을 토대로, calibration curve를 만들어 직선성을 확립했다. 미지농도 2 샘플을 확립된 직선성에 대입해 농도를 구하였다.3. 결과1) 특이성 확인 double blank 샘플 Indomethacin 샘플 Docetaxel 샘플 indomethacin과 docetaxel 샘플특이성 확인 결과 : double blank sample 측정결과이며 별다른 peak가 나타나지 않았다. : Indomethacin sample이며 8.280 분에 peak가 나타났다. : Docetaxel sample이며 8.286 분에 peak가 나타났다. : indomethacin + docetaxel sample이며 각각 10.113분, 8.302분에 peak가 나타났다.blank에는 희석용매만 들어있으므로 peak가 나타나지 않은 반면 indomethacin은 8.2~3분에, indomethacin은 10.1분에 peak를 보였다. 의 peak가 8.280분인 것으로 보아 샘플에 들어간 것은 indomethacin이 아니라 docetaxel이었을 것이다.2) 직선성 확인 좌→우 차례대로 0.2, 0.5, 1 ,2, 5, 10μg/mL indomethacin HPLC 결과 indomethacin 농도에 따른 HPLC/UV 결과 표농도(㎍/㎖)IS areaIND areaIND/IS역추정농도오차율10134.243615.9924.58869.8890-1.11045173.375408.9662.35895.01190.23852166.113202.7631.22062.522426.11911135.17385.3370.63131.233423.34140.5169.22824.5310.14500.1696-66.07250.2172.3221.6530.0096-0.1264-163.2190 indomethacin 농도에 따른 HPLC/UV calibration curveHPLC 분석결과의 IS area와 IND area를 기반으로 IND/IS 값을 구하고 엑셀로 직선 y = 0.4572x + 0.0674 식을 도출했다. 이때 R² = 0.9923으로 0.99보다 크기 때문에 직선성이 확립되었다고 판단했다. 역추정 농도는 직선 식의 y값에 IND/IS 값을 대입해 구했으며 오차율은 (원래농도-역추적농도)/원래농도 x 100(%) 으로 계산했다. 오차율 계산 결과 농도 0.5㎍/㎖와 0.2㎍/㎖에서 각각 -66.0725%와 -163.2190% 의 큰 오차율을 보였다.3) 미지농도 계산하기 미지 농도 약물1과 2의 HPLC/UV 결과 미지 농도 약물1과 2의 결과 값 정리 표IS areaIND areaIND/IS역추정농도(㎍/㎖)unknown1152.25320.1642.10294.4521unknown2140.556191.5851.36312.83392.1029 = 0.4572x + 0.0674x = (2.1029 – 0.0674) / 0.4572∴ x = 4.4521 (㎍/㎖)1.3631 = 0.4572x + 0.0674x = (2.1029 – 0.0674) / 1.3631∴ x = 2.8339 (㎍/㎖)미지농도의 peak는 4개를 보였고, broad한 peak를 보였다. 4개의 peak중 약물 retention time과 비슷한 두 개의 peak를 찾았고 (peak2, peak4) 이를 통해 IND/IS 값을 계산했다. y = 0.4572x + 0.0674 식의 y값에 대입해 x값을 얻은 역추정농도 값은 각각 4.4521 ㎍/㎖와 2.8339 ㎍/㎖ 이었다 .4. 고찰먼저 실험 조작 시 알게 된 점은 다음과 같았다. 이동상으로 ACN을 사용하는 이유는 peak을 sharp하게 만들기위함이었으며 tailing, shoulder가 생기는 것을 방지하고 또 peak가 너무 broad해지는 것을 막기 위함이었다. 혈장, 약물, ACN순으로 투여해야 하는데(약물의 순서는 상관없음) 그렇지 않고 ACN을 약물보다 먼저 넣게 되면 혈장단백질을 변성, 침전시켜 제대로 된 약물 피크를 얻기 힘들기 때문이다. 또한 vortexing시 2분동안 중간에 손을 떼지 않고 해야 했고 원심분리 기계의 파란 다이얼로 rpm을 맞추고 빨간색 다이얼로 15분 시간을 맞췄고 15분이 되면 자동으로 멈추는 게 되어있었다. HPLC용 vial에 유기층을 넣을 때 기포가 생기지 않도록 해야 했고, 마찬가지로 HPLC기계의 tube에도 기포를 제거하는 과정을 거칠만큼 기포가 기계와 결과에 악영향을 끼칠 수 있다는 점도 알게 되었다.약물의 특이성 확인 시 약물의 고유한 특징으로 retention time을 각각 확인할 수 있었다. Indomethacin 은 10.113분, Docetaxel은 8.286 분과 8.302분에서 peak를 보였다. 두번째 IND 샘플에 들어간 것은 indomethacin이 아니라 docetaxel이었을 것이다. Retention time의 차이는 극성 정도로 설명할 수 있다. 고정상은 C18 column을, 이동상은 0.1% TFA를 넣은 ACN과 DW를 50:50로 넣었으므로 고정상에 비해 이동상이 극성을 띄므로 역상 크로마토그래피임을 알 수 있다. Indomethacin이 docetaxel에 비해 더 비극성을 띠므로 고정상과 상호작용이 강하여 retention time이 docetaxel보다 길었다. 반대로 docetaxel은 상대적으로 극성을 나타내므로 이동상과 상호작용을 잘하여 retention time이 더 짧고, 빨리 추출되었을 것이다.Docetaxel의 retention time이 완벽히 일치하지 않은 이유는 실험과정 중의 오류 때문이었을 것이다. 샘플을 만들때 혹은 vial에 이물질이 들어갔을 수 있다. 특이성 retention peak를 판단하는 데 미칠 만한 영향은 아니었던 것으로 보인다.약물의 직선성 확인 결과, R2 값으로는 직선성을 확립했지만 -66.0725%와 -163.2190% 의 큰 오차율을 보이는 것으로 보아 직선성을 확립했다고 볼 수 있을지 의문이 들었다. 농도가 작을 때 오차율이 점점 커지는 것을 확인할 수 있었는데 특히 농도 1ug/ml에서 0.5ug/ml을 만들기 위한 계열 희석을 할 때 상대적으로 약물이 적게 들어간 것처럼 보이는데 pipetting을 제대로 하지 않고 넣었거나 용액을 덜 취했을 수도 있다.미지농도의 HPLC결과 peak가 4군데가 나왔고, broad한 peak들을 얻었다. 실제로 불순물이 들어갔거나 약물의 농도가 매우 미미했을 수도 있지만 더 큰 가능성은 실험자가 두가지 샘플에 혈장, 약물, ACN순으로 투여하지 않고 혈장→ACN→약물 순으로 넣었다고 했는데 두가지가 이 미지 샘플인 것 같다고 판단했다. 약물보다 ACN이 먼저 혈장과 만나 혈장의 단백질이 변성되어 불순물이 생겨 peak가 4가지로 나왔을 수 있고, ACN 또한 제 기능을 하지 못해 peak가 sharp 하지 않게 나왔을 수도 있다.

의/약학| 2024.06.01| 7페이지| 3,000원| 조회(125)

약제학, 약제학실습, 마손도시험, 중량편차시험, 미야리산과립제

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미야리산 과립제 중량 편차 시험과 입도시험 및 미야리산 정제의 경도, 마손도 시험.

미야리산 과립제 중량 편차 시험과 입도시험 및 미야리산 정제의 경도, 마손도 시험.체내 컴파트먼트 1차 속도식의 약물동태학 실험제출일담당교수교수님분반이름조/학번1. 제목 & 실험 목적미야리산 과립제 중량 편차 시험과 입도시험 및 미야리산 정제의 경도, 마손도 시험.체내 컴파트먼트 1차 속도식의 약물동태학 실험실험1에서는 과립제의 중량편차 시험과 입도시험법을 이해하고 시판중인 과립제를 이용해 직접 시험을 해보고 적합여부를 판정해 본다. 실험 2에서는 정제를 직접 타정하고 경도시험과 마손도 시험을 해봄으로써 조성비율, 함량과 필요한 첨가제에 대해 고민해본다. 마지막으로 실험3에서는 1차 반응 속도식을 따르는 체내 컴파트먼트 모델을 이해하기 위해 유수 모델을 설치하여 약동학 파라미터들을 계산하고 두 개의 다른 유수속도에서의 결과값을 비교하는 것이 목적이다.2. 방법실험1. 과립제1) 중량 편차 시험미야리산을 합시(약수저)에 가득 채운 후 수평으로 깎아서 채워진 과립의 중량을 10회 측정했다. 10회에 걸쳐 얻은 비오비타 과립 중량의 평균치와 표준편차를 구한 후 표에는 중량이 작은 것부터 순서대로 기입했다.2) 입도시험과립의 20.01g을 칭량해 sieve 위에서 수평으로 3분간 앞뒤로 흔들어 sieve 분류해 각각의 양(%)를 구했다. 대한 약전 12개정의 과립제의 입도시험법에 따라 적합여부를 판단했다.실험2. 정제1) 정제 제조입도 시험 후 42호체에 남는 것 중 8.0g을 취했다. 활택제(stearic acid)를 4g 취해 33%의 비율로 과립제와 혼합했다. stearic acid와 혼합 시 먼저 약수저로 가볍게 혼합한 후 과립을 종이에서 굴리듯 하여 조작을 반복했고 이때 정립되어 있는 과립이 부서지지 않도록 강하게 섞지 않도록 했다. 타정은 A209호 공동기기실의 타정기를 이용했다.2) 정제의 경도시험제조한 정제 중 10개의 경도를 Hardness tester를 이용해 측정하고 평균 경도(Kp) 및 표준편차를 구해 표로 작성했다. (측정은 0.1Kp단위까지 omophenol blue 수용액 15mg/l)을 비이커 B에 완전히 채우고 magnetic bar를 넣어 잘 섞어 주었다. Peristaltic pump를 작동시켜 비이커 B에서 액적이 배출되는 시점에서 비이커 B중에서 1ml을 pipette으로 취하고, 적당하게 희석하여 흡광도를 측정함으로써 초기농도 [CB]0 로 했다. 이 컴파트먼트의 Vd 를 일정하게 유지하기 위해 심플 채취 후에는 비이커 B중에 곧바로 물 1ml를 보충했다. 초기농도 [CB]0에서부터 경시변화를 측정하기 위해 5, 10, 15, 20, 30, 60, 90, 120분 마다 비이커 B에서 1ml을 채취하고 흡광도를 측정했다. 이 컴파트먼트의 Vd 를 일정하게 유지하기 위해 같은 방법으로 매 샘플 채취 후에는 비이커 B중에 바로 물 1ml를 보충했다. 검량선 작성을 통해 BPB 수용액의 농도를 구했다.약물 농도 결정을 위해 흡광도법을 이용했다. 먼저 BPB 15mg/L 수용액을 물로 2, 5, 10, 20, 50배 계열 희석했다. (계열희석하지 않고 직접 농도계산하여 넣었다.) 이 희석액의 1ml를 cuvette에 담아 흡광도를 590nm에서 측정하고 흡광도-농도의 검량선을 작성했다. 이 검량선을 통해 시간에 따른 [CB]0 의 경시적 변화를 측정할 수 있었다. 흡광도 측정은 공동기기실 (약 A209호)의 흡광도 측정기를 이용했다.3. 결과실험1. 제제 및 시험법1) 중량 편차 시험 미야린산 중량편차 실험 결과1회2회3회4회5회6회7회8회9회10회평균표준편차무게(g)1.171.181.191.211.211.221.231.241.251.261.2160.029892) 입도시험-전체량: 20.01g-10호체 (1700um): 전량통과-12호체 (1400um): 잔류량 0.03g = 전체의 0.15% (0.03g/ 20.01g*100) < 5%-42호체 (355um): 잔류량이 19.87g 이므로 통과량은 0.14g (20.01g-19.87g) = 전체의 0.70% (0.14g/ 20.01g*100*100미야리산2.212.152.71(2.21-2.15)/2.21*100마손도(%)=마손도계를 사용해 측정했을 때 마손도가 1% 이하이면 양호한 정제라고 하는데 마그밀 정의 마손도는 0.50% 이므로 양호한 정제에 해당되지만, 미야리산의 마손도는 2.71%로 양호한 정제에 해당되지 않다.실험3. In vitro 약물동태학 실험우리조는 처음에 10ml/min으로 유속을 설정했고, 마지막에 측정된 유속 또한 10ml/min로 동일한 값이 나왔다. 5,6 조는 12ml/min으로 시작했고, 최종 유속은 13ml/min이였다.따라서 평균 유속은 우리조 (3,4조): 10ml/min (5,6)조: 12.5ml/min 이다.다음은 계열 희석 검량선 결과이다. BPB 농도에 따른 흡광도 (우리조)농도(mg/L)157.531.50.750.3흡광도3.2143.1583.0992.9812.9352.57 BPB 농도에 따른 흡광도 (5,6조)농도(mg/L)157.531.50.750.3흡광도.2.9872.9612.9782.8352.281 우리조와 5,6조 BPB농도-흡광도 plot우리 BPB농도와 흡광도 그래프의 추세선을 예측해보니 y = 0.0289x + 2.8576 (R² = 0.5026) 으로 나왔고, 5,6조의 추세선은 y = 0.0561x + 2.6619 (R² = 0.296) 으로 나왔다. 이 식을 이용해 흡광도에 따른 약물 농도를 계산하였다. 약물량은 약물농도에 Vd값을 곱한 값이다. (우리조 Vd: 274ml, 5,6조 Vd: 263ml) [CB]-time, log[CB]-time, XB -time 표 (우리 조)min051015203060흡광도3.23.1673.1183.093.0683.0122.802농도(mg/L)11.8477510.705889.0103818.0415227.2802775.342561-1.92388logC1.0736361.0296220.9547430.9053380.8621480.727749.약물량3.2462842.9334122.4688442.203377 logC0우리 조는 log[CB]-time curve에서 y=-0.0115x+1.0785의 기울기 -0.0115는 - 이므로 ke는 0.0115*2.303= 0.0265(min-1) 이고, 약물의 반감기는 ==26.15 min 이다.같은 방법으로 (5,6)조의 소실속도 정수 ke값을 구하면 에서 y=-0.0004x+0.8069의 기울기 -0.0004는 - 이므로 ke는 0.0004*2.303= 0.000921 (min-1) 이고, 약물의 반감기는 ==752.442 min 이다.다음으로 log[CB]-time curve의 직선의 종축과의 절편의 값에서 [CB]0을 확인하고 실험자가 설정한 초기농도와 비교하고 오차율을 계산했다. 오차율 = ( ( |이론값-측정값| )/이론값 ) * 100우리조의 log[CB]-time curve에서 logC0 는 1.0785 이므로 C0 는 10^1.0785인 11.981mg/L.흡광도를 통해 얻은 C0는 11.848mg/L로 ㅣ0.133mg/Lㅣ 오차를 보인다.오차율 계산: (ㅣ11.848 mg/L -11.981 mg/Lㅣ)/(11.848mg/L)*100= 1.1%(5,6)조의 log[CB]-time curve에서 logC0 는 0.8069이므로 C0 는 10^ 0.8069인 6.411mg/L.흡광도를 통해 얻은 C0는 6.365mg/L로 ㅣ0.046mg/Lㅣ 차이를 보인다.오차율 계산: (ㅣ6.365 mg/L-6.411 mg/Lㅣ)/(6.365mg/L)*100= 0.7%겉보기 분포용적 Vd를 구한 후 이 값을 beaker B의 실용적 과 비교했다.Vd===273.97ml (우리조), 실제 274ml (우리조)Vd===263.16ml (5,6조), 실제 263ml (5,6조)오차율 계산(ㅣ274ml -273.97mlㅣ)/(274ml) *100= 1.094% (우리조)(ㅣ263ml -263.16mlㅣ)/(263ml) *100= 6.083% (5,6조) 유속 10ml/min, 12.5ml/min일 때의 결과 비교(3,4)조 10m기를 갖는 것을 확인할 수 있었다.실험2. 정제프로토콜의 정제법에 따라 정제를 만들었을 때 시판되는 정제의 매끄러운 외관에 비해 울퉁불퉁했으며 색은 흰색과 노란색이 섞여 전체적으로 옅은 노란색을 띠었다. 경도시험에서 미야리산이 마그밀 정의 경도보다 현저히 떨어지는 것을 확인할 수 있었으며 capping은 둘 모두에서 관찰되지 못했다. 직접 만든 미야리산의 정제의 바스라지는 부서짐을 보아 마그밀정보다 결합도가 떨어져 보였다. 마손도 시험에서는 마손도계를 사용해 측정했을 때 마그밀 정의 마손도는 0.50%, 즉 1% 미만으로 양호한 정제에 해당되지만, 미야리산의 마손도는 2.71%로 양호한 정제에 해당되지 않으므로 시판에 적합하지 않다고 판단했다. 경도시험과 마손도 시험에서 미야리산 정의 경도와 마손도가 시판 중인 정제와 비교해 부족했다. 활택제가 과잉 들어가게 되면 유동성이 오히려 나빠지고 분리가 일어날 수 있는데(제제학수정판 134p) 활택제의 과잉이 원인이었을 수도 있고, 원래의 프로토콜 비오비타에서 미야리산으로 대체하면서 첨가되는 조성과 비율의 조절이 안 맞았을 수도 있다. 육안으로 보기에도 울퉁불퉁하여 입자간 공극이 많아보였는데 결합제 같은 추가적인 첨가제가 더해지지 않았기 때문이었을 수도 있다고 추측했다.실험3. In vitro 약물동태학 실험검량선을 위한 흡광도 측정 시 R2 값이 R² = 0.5026와 R² = 0.296으로 유의한 직선성을 얻지 못했다. 이와 같이 나온 이유로는 같은 샘플을 여러 번 측정하였더니 각기 다른 흡광도 값이 나왔는데 BPB용액이 수돗물에 다 녹지 못해 균일하지 않은 용액 상태였기 때문이었을 것이다. 또한 계열 희석하지 않고 희석 배수에 맞게 용량을 계산하여 농도를 맞췄기 때문에 계열희석했을 때보다 희석이 안 되었을 수도 있다. 계열 희석한 BPB의 흡광도가 두 조가 비슷하게 나올 것이라 예상했지만 다르게 나온 것을 확인할 수 있었다.수돗물을 담았을 때와 BPB를 담았을 때 Vd가 다른 이유는 점성의 차이도 있을 것이고, 보고서

의/약학| 2024.06.01| 9페이지| 3,000원| 조회(133)

약제학, 약제학실습, 마손도시험, 중량편차시험, 미야리산과립제

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