*희* 스토어

*희*

개인인증

팔로워0 팔로우

소개

등록된 소개글이 없습니다.

전문분야 등록된 전문분야가 없습니다.

판매자 정보

학교정보

입력된 정보가 없습니다.

직장정보

입력된 정보가 없습니다.

자격증

입력된 정보가 없습니다.

판매지수

판매중 자료수

12개
전체 판매량

532개
최근 3개월 판매량

1개
자료후기 점수

평균A
자료문의 응답률

-

전체자료 12개

편백나무 sample의 미생물 배양 및 그람염색

배양공학 및 실험- 편백나무 sample의 미생물 배양 및 염색 -1. 실험제목편백나무 sample의 미생물 배양 및 염색2. 실험목적편백나무 sample에 있는 미생물을 고체 배양 및 액체 배양을 시킬 수 있으며, 그 결과와 그람 염색을 통해 양성·음성을 구분할 수 있고 배양된 미생물의 종류를 추측할 수 있다.3. 이론3.1 배지 (culture medium)배지란 미생물 배양에 필요한 물, 무기이온, 질소원, 탄소원, 발육소 등의 영양소를 섞어 만든 혼합물이다. 미생물에 따라 필요로 하는 영양성분이 다르기 때문에 각각의 미생물에 맞는 배지를 사용해야한다.배지는 형태에 따라 고체 배지(Agar plate)와 액체 배지(broth)로 나눌 수 있다.액체 배지: 액체 배지는 증류수에 미생물 성장에 필요한 영양성분을 녹여 멸균한 배지이다.고체 배지: 고체 배지는 액체 배지에 한천(Agar), gelatin 등을 첨가하여 멸균 후 고형화한 배지를 말하며 평판 배지, 사면 배지, 고층 배지 등으로 나뉜다. 본 실험에서 사용된 평판 배지는 미생물의 분리 및 순수배양, 집락(colony)의 관찰 등에 사용되는 배지로 실험실에서 가장 흔하게 사용된다. 사면 배지는 균주의 보존 및 생물학적 성상 검사에 이용되며 눕힌 각도에 따라 사면 배지와 반사면 배지로 나뉜다. 고층 배지 또한 균주의 보존을 위해 사용되며, 세균의 운동성 확인에도 사용된다.그림 1. 고체배지 종류3.1.1 유산균 검사용 배지 (MRS배지)Peptone 5g, Yeast extract 2.5g, Glucose 1g, Tween80 1g, Cysteine 0.1g, Bromcresol purple 0.06g, Agar 15g, 정제수 1L, pH 7.0MRS배지는 세균용 배지로 유산균을 배양할 때 사용한다.3.1.2 유당 Bouillon 배지 (LB배지)Beef or Meat Extract 3.0g, Lactose 5g, Peptone 10g, Brom thymol blue 0.024g, 정제수 1L, pH 시작되어 세포질 합성 속도와 세포수의 증가가 거의 일치하는 시기로 지수기라고도 하는데, 이 시기에 미생물이 가장 왕성하게 증식하기 때문에 세포는 2n의 대수 함수적으로 증식을 하며 이에 반비례하여 배지 중 여러 가지 성분을 감소시키고 대사산물은 증가한다.3.3.3 정상기 (stationary phase)정지기라고도 하며, 이 시기에도 배지 중 영양분이 고갈되고 대사산물이 축적되어 세포의 증식 속도는 완만해짐과 동시에 죽은 세포가 증가하기 시작한다. 배지 중에 전체 세포수가 최대이고 거의 일정한 상태가 된다. (증식과 대사산물이 최대이다.)3.3.4 사멸기 (death phase)죽은 세포수가 증가하고 생세포수가 감소하는 시기로 세포는 자기 소화(autolysis)나 퇴축이 일어나 가형인 모습이 많아진다.3.4 그람 염색법 (Gram staining)미생물의 염색 방법은 목적에 따라 단순히 형태를 알아보기 위한 단순 염색, 그람 양성, 음성을 분별하기 위한 그람 염색, 편모 운동성을 지니는 미생물의 편모 형성 모양을 관찰하기 위한 편모 염색 등 다양한 방법들이 있다. 염색의 원리는 염료가 대부분 양전하를 띠는데 이로 인해 핵산이나 산성 다당류처럼 음전하를 띄는 세포 성분과 결합하게 되는 원리이다. 이러한 양전하를 지닌 염료를 염기성 염료(basic dye)라고 보통 부르고, 본 실험에서 사용한 것은 크리스달 바이올렛(crystal violet), 사프라닌 (safranin)이 있다.즉, 세포의 표면은 음전하를 띄는 경향이 있어 염기성 염료들이 세포 표면의 구조물들과 높은 친화력으로 결합하여 염색이 되는 것이다.본 실험에서는 미생물의 식별을 용이하게 하기 위해 두 가지 이상의 생물학적 염료를 사용하는 방법인 분별 염색(Differential staining) 방법 중 하나인 그람 염색을 하였다. 이를 통해 그람 양성(gram-positive)과 그람 음성(gram-negative)를 구별하는데 이는 세균의 세포벽 차이에 따라 구분이 된다.그림 3. 그람 양성 VS을 발효하여 젖산을 생성하는 형식에는 homo형 정상발효형과 hetero형 즉 이상발효성이 있으나 pentose의 발효에는 정상혀오가 이상형의 구별이 없이 pentose를 발효하여 젖산과 초산을 생성한다.젖산균의 식품에서의 역할은 젖산을 생성하여 부패균 또는 병원균등 유해세균을 억제하여 제조공정을 안전하게 학고, 보존성을 높이는 것이다. 또한 발효유나 젖산균 음료 등은 정장작용이 있다. 대부분의 젖산균은 유용한 세균으로 식품의 변패와는 무관하나 유해한 것도 있다.L. bulgaris, L. lactis, L acidophilus, Streptococcus lactis, St. cremoris, St. thermophilus 등은 치즈, 요구르트, 발효버터 등의 제조에 이용된다.L. plantarum, L. acidophilus, St. faecalis, Lenc. mesenteroides, Pediococcus 등은 채소와 과일 등의 침채류 발효에 유용한 작용을 하나, 우유나 버터의 산패, 육류, 소세지, 햄 등의 표면에 점질물을 생성하고, 포도주의 악변의 원인이 되며, 육제품의 부패에도 관여한다.락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei)는 인간의 장이나 입에서 발견되는 락토바실러스(Lactobacillus)속의 혐기성 미생물로서 우유와 치즈에서 분리되었다. 프로바이오틱스(probiotics)인 락토바실러스 카제이는 막대기 모양의 간균으로 그람 양성이고, 운동성이 없으며, 산이나 열에 강하다. 또한 락토바실리러스 아시도필루스(Lactobacillus acidophilus)의 성장에 도움을 주며, 탄수화물을 분해시키는 효소인 아밀라아제(amylase)를 생산한다.lactobacillus casei : 이균은 인체 내 소화액에 의해 사멸되지 않고 소장까지 가서 소장 내 균총을 정상화시키고, 유당불내증(milk intolerance)을 줄여주며, 정장 작용 및 소화작용을 돕는 인체에 매우 유익한 균이다. 우유는 락토바실러스 카제이가 생산하는 젖산에 의 + 증류수 500ml (Agar 포함)1) 위와 같은 조건으로 증류수 500ml에 녹여준다.(용량이 크므로 큰 Erlenmeyer flask를 이용하고, 골고루 섞이도록 교반을 해주어도 좋다.)2) autoclave를 이용하여 121℃ 15lb 조건으로 30분에서 1시간 정도 멸균한다.3) 어느 정도 열이 식으면 petri dish 높이의 반 정도(대략20ml) 옮겨서 김이 생기지 않도록 뚜껑을 살짝 열어둔다.4) 배지가 굳어지면 편백나무 sample을 각 배지에 접종한다.5) 접종 시에는 배지가 긁히지 않도록 조심히 펴서 바르는 느낌으로 돌려가며 도포시킨다.6) Incubator에 뚜껑이 밑으로 가게 뒤집어 보관하고 1~2일(보통 20시간 후) 뒤에 colony를 확인한다.4.2 액체 배양 (실험일자: 2019년 5월 28일)1) 위의 고체 배지 제조법에서 Agar를 제외하고 증류수에 녹인다.(PDB는 Agar가 포함되지 않은 PDB 가루를 이용하여 제조한다.)2) 만들어진 각각의 MRS, LB, PDB 액체 배지를 2개의 Erlenmeyer flask에 100ml 씩나누어 담는다.3) Erlenmeyer flask에 호일을 약하게 덮은 후 autoclave에 멸균시킨다.(autoclave는 압력이 가해지므로 호일을 약하게 덮어야 flask가 깨지지 않음.)4) 멸균 상태의 액체 배지에 고체 배양한 미생물 중 하나를 정하여 화염 멸균한 백금이를사용하여 접종 시킨다.5) MRS 배지는 stationary Incubator에 배양시키고, 나머지 LB, PDB 배지는 shakingIncubator에 배양시킨다. (MRS 유산균: 혐기성, LB, PDB: 호기성)4.3 흡광도 측정 (측정일자: 2019년 5월 29일~ 31일)1) 흡광기 위쪽 홈에 바탕용액(MRS, LB, PDB)을 넣고 아래쪽 홈에 바탕용액에 해당하는 배지의시료를 넣어 흡광도를 측정한다.2) 총 3일간 1~2시간 마다 흡광도를 측정하여 기록한다.3) 측정이 끝난 뒤 엑셀을 이용하여 그래프를 그린4982.0942.1572.4222.1282.29sample 20.7390.9070.6150.6350.6560.6330.4930.8410.8740.6950.7051.070.7790.7320.769LB5/295/305/319:0011:0013:0015:0017:009:0010:0012:0015:0016:0018:0010:0013:0015:0017:00sample 11.2341.4311.4161.7441.6442.0692.281.7931.9131.8061.7552.4362.4982.5152.515sample 20.3360.4460.6230.8810.8731.9741.9591.6581.6351.6611.6532.3122.3342.3582.408PDB5/295/305/319:0011:0013:0015:0017:009:0010:0012:0015:0016:0018:0010:0013:0015:0017:00sample 11.5071.51.491.5991.5741.3351.4441.3771.3521.3551.2711.3721.3861.3721.398sample 20.10.1010.1110.2420.240.9651.1050.9951.0040.970.8880.9420.940.9330.9295.3 그람염색 결과Sample 1Sample 2MRSLB6. 고찰6.1 Unknown colony 추측본 실험에서 진균용 PDA배지에서 자란 미생물을 제외한 MRS, LB 배지의 미생물이 무엇일지 추측해보려 한다. 모든 미생물은 colony 형태와 배지 환경, 그람 염색 등을 실제 실험을 통해 확인하고 이와 전자저널 사진들을 연계하여 추측할 것이다.6.1.1 MRS sample 1MRS sample 1은 Bacillus subtilis 로 추정된다.MRS Sample 1비교집락그람염색6.1.2 MRS sample 2MRS sample 2은 lactobacillus casei 로 추정된다.MRS Sample 2비교집락그람염색6.1.3 LB sample2 - White colony (2 type)다.

자연과학| 2019.07.11| 19페이지| 1,500원| 조회(195)

그람염색, 대장균, 효모, 배양공학, 배양실험, 미생물배양, 편백나무, 화학생명공학과

미리보기

닫기
Multivitamin 중의 Riboflavin 측정, 형광분석실험

기기분석 및 실험1Multivitamin 중의 Riboflavin 측정1. 실험제목Multivitamin 중의 Riboflavin 측정2. 실험이론1) 형광 분광광도계(fluorescence spectrophotometer)기체·액체 또는 고체 시료에 여기광을 조사하여 시료에서 방사되는 형광 또는 인광의 스펙트럼을 측정하여 정량 및 정성분석을 하는 장치이다. 일반적으로 흡수스펙트럼으로 분석하는 흡광법에 비하면 100~1,000배 감도가 높다. 통상 여기 및 형광 쪽에 각각 분광기를 가지고 여기·형광스펙트럼의 측정이 가능한 것을 형광분광 광도계라 하며 분광기를 갖지 않고 필터를 이용하는 것을 형광 광도계라 하여 구별하고 있다. 기체·액체 시료에는 보통 여기광과 복사광의 방향을 직각으로 잡지만 고체 분말시료에는 반사모드로 측정한다. 최근에는 형광계라는 말은 별로 사용하지 않는다.2) 방출 스펙트럼(Emission spectrum)발광을 분광기로 분광하여 그 광도의 파장분포 또는 파장수(에너지) 분포를 나타낸 것으로 발광이 형광인 경우에는 형광 스펙트럼, 인광인 경우에는 인광 스펙트럼이라 불린다. 높은 에너지 준위로부터 자연적으로 전자기파를 방출하는 경우와 전자기파의 존재 하에서 전자기파를 방출하는 경우가 있는데, 각각 자연방출과 유도방출이라고 한다. 방출 스펙트럼은 전자기파가 가지는 에너지 및 메커니즘에 따라 구체적인 명칭으로 불리는 일도 있다. 예를 들면, X선 여기에 의하여 생긴 원자의 빈 준위에 보다 높은 준위로부터 전자의 전이가 일어나는 경우의 방출 스펙트럼은 X선 형광이라 한다. 전자 들뜬상태로부터의 방출 스펙트럼은 자외선 영역에서 가시광선 영역에 걸쳐 있으며, 그 메커니즘에 의하여 형광 스펙트럼 및 인광 스펙트럼으로 나눈다. 진동 들뜬상태로부터의 방출 스펙트럼은 적외선 방출 스펙트럼이라 한다. 또 마이크로파 영역의 방출 스펙트럼도 존재한다.3) Riboflavin 형광법비타민 B2는 그 자신이 황색을 띠고, 수용액은 자외선을 조사하면 황색의 형광을 나타내며 이 형광은 아주 예민하다. 이 형광 강도를 측정하여 비타민 B2를 정량하는 방법을 Riboflavin 형광법이라고 한다.그러나 식품의 추출액에는 비타민 B2의 형광만이 아니고 다른 여러 형광, 즉 맹형광을 가지고 있다. 이들을 완전히 제거하면 남은 형광은 Riboflavin의 형광인 것이다.따라서 정량할 때 먼저 활성백토에 비타민 B2를 흡착 시킨 후 묽은 암모니아수로 비타민 B2 이외의 용출물질을 제거하고, 다음에 피리미딘-초산수로 비타민 B2를 용출한다.이어서 KMnO4로 비타민 B2 이외의 유기물을 산화시키고, 과잉의 KMnO4를 과산화수소수로 분해한다. 이렇게 하여 가능한 한 비타민 B2 이외의 형광물질을 제거한 후 자외선 조사를 하여 형광을 비교 측정한다.본 실험에서는 식품의 형광을 측정하는 것이 아니므로 위와 같은 방법을 사용하지 않고, 순수한 Riboflavin 시약을 농도별로 측정하여 Calibration을 그린 뒤, 식품이 아닌 멀티비타민이므로 별도의 용출 물질을 제거하지 않고 비타민 B2를 측정하였다.3. 기구 및 시약?ReagentRiboflavin끓는점181.7 ℃화학식C17H20N4O6분자량376.36 g/mol비타민B2로 수용성이긴 하나 물에 잘 용해되지 않는다.자외선에 불안정하나 비타민B1이나 비타민C 존재 시 광분해가 억제된다.생체 내에서 FMN 또는 FAD로 형성되므로 생리활성 효과를 가진다.비타민B2가 결핍 되었을 때 구순염, 구각염, 피부병, 성장지연 등이 발생한다.Acetic acid녹는점16.7 ℃끓는점118.1 ℃화학식C2H4O2분자량60.05 g/mol아세트산은 항균 및 항진균 성질을 갖는 합성 카르복실산이다. 이 작용 메카니즘은 완전히 알려지지 않았지만, 해리되지 않은 아세트산은 세포막 또는 다른 세포벽 구조에서 증가된 지방산 축적을 허용하는 지질 용해도를 향상시킬 수있다. 아세트산은 약산으로서 탄수화물 대사를 억제하므로 이후에 유기체가 사망에 이를 수 있다.?ApparatusBeakerMicropipettePipettespuit형광 spectrophotometercuvettevolumetric flaskMortar4. 실험방법1) 4.0M acetic acid와 초순수 물을 이용하여 0.0200M 용액을 제조한다.2) 0.0200M acetic acid를 용매로 하여 riboflavin 50.0ppm 용액을 제조한다.3) acetic acid로 계속 희석하여 0.00, 2.00, 4.00, 6.00, 8.00, 10.00, 12.00, 14.00그리고 20.00ppm 용액을 얻는다.4) 형광을 측정하여 riboflavin의 calibration을 얻는다.(Ex wavelength 450nm, Em wavelength 600nm)5) 엑셀 R2 값을 확인한다.6) 준비한 Multivitamin 표준용액을 제조한다.(Multivitamin을 막자사발에 갈은 후 50mg을 취하여 0.02M acetic acid 200ml에용해시킨다. 그 후 10배 묽힌 후 형광 측정을 한다.)5. 실험결과(1) Riboflavin의 Calibration농도 (ppm)파장 (nm)Intensity0.00525.00.6572.00518.098.7634.00520.4179.6866.00519.8249.4778.00518.2310.84010.00517.8362.21112.00518.6404.04114.00517.8435.04420.00517.6502.841← 20ppm 포함← 20ppm 제외※파장은 평균 520.00nm로 생각한다.(2) Multivitamin 중 riboflavin파장 (nm)Intensity519.656.7396.고찰? Multivitamin 중의 Riboflavin (비타민B2) 농도1) 멀티비타민 50mg 속의 비타민B2의 함량 구하기 : 이론값멀티비타민 1정 = 1,632mg1정에 포함된 비타민B2 함량 = 30mg멀티비타민 50mg 속 비타민B2의 함량 = ( 30mg ÷ 1,632mg ) × 50mg = 0.92mg0.02M acetic acid에 용해된 비타민B2의 농도 (ppm) = 0.92mg ÷ 0.2L = 4.60 ppm2) Intensity 값에 의한 Riboflavin 농도 : 실험값파장 519.6nm 에서의 Intensity = 56.73920ppm을 제외한 기울기 값 (y=30.81x+39.422) 에 대입= 56.739 = 30.81x+39.422x = 0.56 ppm이때, 형광 측정 시 0.02M acetid acid로 10배 묽혔으므로 원래의 농도를 구하기 위해x값에 10배를 해준다.0.56 ppm × 10 = 5.6 ppm? 기계의 성능 분석기계의 성능을 알기위해서 이용하는 것 중 하나는 반치폭(FWHM)을 확인하는 것이다.반치폭은 가장 높은 피크 중 가장 높은 값의 절반에서의 x축 (파장) 폭을 의미하고, 이는가우시안 분포인 종모양의 뾰족한 정도를 알려준다.이때 반치폭의 값이 작을수록 즉, 가우시안 분포 모양이 뾰족할수록 에너지 분해능이 좋은것이다.본 실험에서 반치폭을 계산하기 위해 20ppm의 값을 이용하였다.20ppm에서의 peak 값은 502.841로 그 절반 값이 251.42이다.그 값에서의 최소, 최대 각각의 x축 (파장) 의 값은 다음과 같다.( 좌측 = 파장, 우측 = Intensity )그러므로 반치폭은 562.4 - 499.0 = 63.4 이다.실험 결과에서의 그래프를 보면 농도가 낮아질수록 반치폭의 값이 증가하는 것을 확인할 수 있다. 이를 토대로 농도와 에너지분해능은 비례한다고 생각한다.? 실험의 오차실험값의 수득율을 계산하면 다음과 같다.( 실험값 ÷ 이론값 ) × 100 = ( 5.6 ÷ 4.6 ) × 100 = 121.7%수득율에서 100을 빼주면 오차율이다.121.7 - 100 = 21.7%본 실험에서 나온 결과를 고찰하자면 우선 오차율이 21.7%의 +오차값이 나왔다.이와 같은 결과의 원인을 살펴보자.첫 번째로 실험 시 50mg을 채취할 때, 그 값이 더 많이 들어갔을 경우이다.당연히 많이 녹을수록 그 함량 또한 증가하기 때문에 실험결과가 더 높게 나올 것이다.아니면 알약을 갈았을 때 고체 시료 속에 있는 비타민B2의 분포가 높은 쪽이 취해졌을 때도 그 값이 증가할 수 있다.

자연과학| 2019.07.11| 8페이지| 1,500원| 조회(393)

형광, 기기분석, 흡광도, 리보플라빈, 반치폭, 화학생명공학과, 형과분석, 멀티비타민

미리보기

닫기
UV-vis spectrophotometer를 이용한 농도 구하기 평가B괜찮아요

기기분석 및 실험1UV/vis spectrophotometer를 이용한 농도 구하기1. 실험제목UV/vis spectrophotometer를 이용한 농도 구하기 (실험일자: 2019년 4월 1~9일)2. 실험이론1) UV/vis spectrophotometerUV 분광광도계는 Ultraviolet(자외선)을 사용하며, 이 영역의 빛을 사용하면 분자의 결합전자가 전이하게 되면서 빛의 흡수를 측정한다. 분자의 구조분석에는 결정적이지 못하며, 주로 파이전자계를 확인하는데 사용된다. 단일 결합의 경우 결합전자가 들뜨는데 필요한 에너지가 매우 크므로 파장이 UV보다 짧아져 이 영역에서는 사용할 수 없다. 또한, UV는 가시광선영역과 같이 분석물의 농도측정에도 유용하게 쓰인다. Beer-lambert 법칙에 따라 흡광도(Abs)는 물질의 농도에 비례하므로 빛을 얼마나 흡수에 따라 그 물질의 농도를 계산할 수 있다. UV/VIS 분광광도계는 많은 유·무기화합물의 정량, 임상 실험 등 넓은 분포로 쓰이는 분석기기이며, 화합물의 구조(정성분석)를 밝히는데도 어느 정도의 정보를 제공하지만, 구조의 파악보다는 정량분석에 더 중점을 두어 사용되고 있다.2) 흡수 스펙트럼(Absorption spectrum)lambda = {hc} over {E _{high} -E _{low}}흡광도 또는 흡광계수와, 흡수된 단색광의 파장 또는 진동수와의 관계를 나타낸 것이다. 분자의 내부에너지 E는 전자의 운동상태에 의한 에너지 Ee, 핵의 운동상태에 의한 Ev 및 분자 전체로서의 회전상태에 의한 Er와의 합으로 주어진다. 이러한 에너지는 모두가 양자화 되어 있으며, 계에 고유한 이산적인 값을 취한다. 일반적으로 이산적인 에너지상태를 에너지준위(energy level)라고 하며, 그중 가장 낮은 것을 바닥상태, 그 외의 것을 들뜬상태라고 부른다. 빛의 흡수는 계가 광자로부터 에너지를 받아, 어떤 에너지준위 E1에서 좀더 높은 E2로 전이하는 것에 의한다. 파장 λ의 광자는 에너지 hc/λ(h: 플 회전스펙트럼이 관측된다. 또한, Er와 Ev가 변하는 전이의 경우에는 적외부에 진동회전스펙트럼이 나타나며, Ee까지가 변하는 경우에는 가시부나 자외부에 전자스펙트럼이 나타난다.3) lambert-Beer 법칙A= epsilon bc흡광도 측정법으로 쓰이는 빛의 흡수에 관계하는 Lambert 법칙과 Beer의 법칙을 조합한 법칙이다. 지금 두께 d 에서 농도 c의 물질의 층에 입사하는 입사광의 강도를 I0로 하여 이 층을 투과한 투과광의 세기를 I로 하였을 때 흡광도 E는 log(I0/I)로 주어지며 E＝kcd로 나타내어진다. 흡광도가 흡수층의 두께 d에 비례한다고 하는 것이 Lambert의 법칙, 흡수하는 물질의 농도에 비례한다는 것이 Beer의 법칙이다. 비례정수 k는 농도 및 흡수층의 길이를 나타내는 단위에 따라 다르고 농도를 w/v%로, 흡수층의 길이를 cm로서 나타내었을 때의 k의 값을 비흡광도 또는 흡광계수라고 하고, 또한 농도를 몰농도로, 흡수층의 길이를 cm로 나타내었을 때 몰흡광계수라고 한다. 일반적으로 흡수스펙트럼이 최대가 되는 파장에서 흡광도를 측정하여 이 법칙을 이용하여 미지 검체의 농도 c를 구할 수 있다. 용질의 용존 상태가 농도에 의해서 변화하는 경우, 예를 들면 용질분자가 회합하는 경우나 용질의 이성체 사이에 가역평형이 있는 경우, 용질이 가수분해를 일으키는 경우 등에는 저농도에서 Beer의 법칙이 성립하지 않는다. 또한 현탁액은 일반 Beer의 법칙에 따르지 않는다. 이 경우에는 특별한 현탁 시료 측정용의 분광광도계가 시판되고 있고 이것을 쓰면 Beer의 법칙이 성립하는 경우도 있다.3. 기구 및 시약?ReagentPhenol녹는점40.5 ℃끓는점181.7 ℃화학식C6H5OH분자량94.11 g/mol페놀은 하이드록시 벤젠이며 석탄산이다. 살균제 및 화학 합성 중간체로 사용되고 매우 독성이 강하며 피부에 접촉시 부식성이 있다.Aniline녹는점-6 ℃끓는점184 ℃화학식C6H7N분자량93.0 g/mol구두약, 향료 등의 제조 원료 량32.04 g/mol녹는점-97 ℃끓는점64.7 ℃CH3OH의 시성식을 갖는 가장 간단한 알코올로 메틸알코올이라고도 한다. 유기합성재료, 용제, 세척제, 연료, 에탄올의 변성용으로 쓰인다.메탄올은 인체 내에 흡수 시, 간에서 폼알데하이드라는 물질로 변환되어 인체에 치명적인 반면, 에탄올은 인체 내에 흡수되어 아세트알데하이드라는 독성이 상대적으로 적은 물질로 변화하여 음용이 가능하다. 에탄올은 술의 기본적인 원료로 쓰인다.?ApparatusBeakerMicropipettespuitUV/vis spectrophotometercuvettevial4. 실험방법1) 100ml beaker에 Phenol(0.9411g)을 methanol(10ml)에 용해시킨다.2) 녹인 Phenol 1ml 를 micropipette으로 취하여 100ml beaker에 넣고, methanol 9ml 를 넣어 묽힌다.3) 묽힌 Phenol 3ml를 취하고 methanol 27ml 로 한 번 더 묽힌다.1) 1.0× 10-2M Phenol 0.4ml를 micropipette으로 취하여 methanol 19.6ml에 용해시킨다.1) 2.0 × 10-4M Phenol의 흡광도를 UV기기를 이용하여 측정한다.2) methanol을 양 쪽에 넣어 baseline을 잡고 바탕용액을 methanol로 한다.3) 측정할 시료로 cuvette을 세척하여 사용한다.4) cuvette의 80% 이상 시료를 채우고 200-800nm 범위에서 흡광도 측정 후 peak를 확인한다.1) 바이알에 들어있는 3ml unknown 시료 중 1ml를 9ml phenol과 섞어서 10배 묽힌다.2) 10배 묽힌 unknown 용액을 micropipette으로 1ml 취하여 9ml phenol과 섞어서 총 100배 묽힌다.3) 100배 묽힌 unknown 용액으로 UV를 측정한다.※ recording range : 0.0-2.5, wavelength : 800-200nm, 파장측정범위 : auto, 속도 : slow※모든 과00.44919332.5/216.006200/210.550.52%※auto zero를 하지 않아 임의로 각 흡광도 값에서 0.095를 빼주었다.(2) Aniline 측정값 (4조)(측정 농도: 1.67×10-4M)파장(nm)Abs파장(nm)Absε/λmax(실제)ε/λmax(문헌)오차율234.001.4430285.600.65438640.7/234.008600/2300.5%※204.60nm의 흡광도 값은 고려하지 않아도 되므로 기입하지 않았다. (Abs=2.0599)(3) unknown 측정값 (phenol+aniline=3ml)파장(nm)Abs파장(nm)Abs242.003.3113280.001.6023파장(nm)Abs 추정값ε 문헌값(phenol)ε 문헌값(aniline)210.002.80007585.87585.8220.003.00003235.99332.5230.003.2500269.27943.3270.001.50002041.7753.4※문헌값은 NIST 웹사이트를 참고하였다. (기체상태 값이므로 계산에는 추정값을 이용)6.고찰? Unknown(혼합용액)의 농도 비율 구하기A= epsilon _{1} bc _{1} + epsilon _{2} bc _{2}혼합용액의 농도를 구하기 위해서 시료 각각 원액의 peak 값을 하나씩 선정하였다.이름파장(nm)Absεphenol273.200.44912245.5aniline234.001.44308640.7두 특정 파장에서 각 원액과 혼합용액의 ε 및 흡광도 추정값은 다음과 같다.파장(nm)Absε(phenol)파장(nm)Absε(aniline)234.003.251750273.001.504261※원액의 흡광계수 값은 기존 UV 그래프로 추정하여 계산하였다. (AbsP: 0.35, AbsA:0.75)위 값들을 lambert-Beer 식에 대입한다. (Cp: phenol의 몰농도, Ca: aniline의 몰농도)234nm → 3.25 = (1750×1×Cp) + (8640.7×1×Ca)273nm → 1.50 = (2245.5×1각 용액의 몰농도 비는 phenol : aniline = 2 : 8 일 것이다.? 실험 고찰1) Phenol 몰농도 구하기①1.0M phenol 10ml 만들기 (phenol f.w = 94.11 g/mol)…………… 1.0M = χ mol / 0.01L…………… χ = 0.01 mol…………… y = 0.01 mol × 94.11 g/mol = 0.9411 g위의 식에 따라 phenol 0.9411g을 용매 10ml에 녹인다.②1.0×10-2M phenol 만들기1.0M 용액을 100배 묽히는 과정이므로 용액 : 용매 = 1 : 9 의 비율로 한 번 묽힌 후,10배 묽힌 용액으로 똑같이 한 번 더 묽혀주면 된다.③Abs=1.2~1.8인 phenol의 몰농도 구하기문헌에 따라 phenol의 몰 흡광계수가 210.5nm에서 6200이므로 임의로 흡광도를 1.5로 잡아서 몰농도를 구한다.…………… 1.5 = 6200 × 1 × χ…………… χ = 2.42×10-4임의로 구한 값을 만들기 편한 숫자인 2.0×10-2로 바꾸어 흡광도의 값이 범위 안에 들어가는 지 확인한다.…………… y = 6200 × 1 × (2.0×10-4) = 1.24흡광도의 값이 범위 안에 들어가므로 2.0×10-4M의 phenol을 만든다.……………MV=M ^{'} V ^{'}…………… (1.0×10-2M) × χ ml = (2.0×10-4M) × 20ml…………… χ = 0.4 ml위 식에 따라 1.0×10-2M phenol 0.4 ml 를 methanol 19.6 ml에 녹인다.2) UV 측정 결과에 대한 고찰 ? 오차율실험값과 문헌값의 오차율에 관해 고찰해보자.오차의 원인은 크게 세 가지로 분류할 수 있다.첫 번째는 용매의 차이, 두 번째는 시료의 차이, 마지막으로 실험적 테크닉이다.우선, NIST의 문헌값은 액체시료가 아닌 기체시료를 사용한 값이고, 책의 문헌값은 용매가 water를 이용한 값이다. 그러므로 책에서의 문헌값과의 오차는 aniline의 오차율보다 phenol의 오차율이 없다.

자연과학| 2019.07.11| 9페이지| 1,500원| 조회(767)

기기분석, 흡광도, 자외선, UV, uv spectrophotometer, 화학생..

미리보기

닫기
E.coli Transformation, DNA miniprep, 전기영동 실험 레포트

분자생물학 및 실험1E.coli Transformation & DNA miniprep, 전기영동1. 실험제목1.1. E.coli Transformation (실험일자: 2019년 4월 4~5일)1.2. DNA miniprep, 전기영동 (실험일자: 2019년 4월 11일)2. 실험이론2.1. 플라스미드(Plasmid)플라스미드는 세균의 세포 내에 복제되어 독자적으로 증식할 수 있는 염색체 이외의 DNA 분자를 총칭하는 말로, 1952년 조슈아 레더버그 박사가 처음 제안한 말이다. 이는 주로 원형 이중쇄 DNA 분자로 구성되어 있으며 독립적으로 복제를 한다.세균의 생존에는 필수적이지 않은 여러 부가적 기능의 유전자를 지니었고, 다른 종의 세포 내에도 접합이나 형질도입을 통해 전달될 수 있다.이런 성질을 이용해 유전공학에서는 세균 내 플라스미드를 세포 밖으로 빼내고 제한효소로 자른 뒤 필요로 하는 유전자를 삽입하여 이를 다시 세균에 넣어 배양하는 유전자재조합 기술을 사용한다.2.1.1. pUC19(plasmid University of California 19)R본 실험에서 사용한 plasmid는 pUC19로 2686 염기쌍으로 이루어진 원형의 이중나선 DNA이며 재조합 DNA를 cloning 할 때 많이 쓰인다.pUC19는 대장균의 β-galactosidase (lacZ) 유전자의 N-말단을 가지고 있으며, Amp 내성 유전자를 β-lactamase 효소로 암호화한다.ori site는 plasmid pMB1에서 파생되었다. pUC19는 작으나 복제수가 많으며 이러한 높은 복제수는 rop유전자와 돌연변이가 없기 때문에 발생한다.2.1.2. Ampicillin(Amp)Ampicillin은 β-lactam 항생제의 penicillin 그룹에 속하며 aminopenicillin 계통의 일부이다. 박테리아의 세포막 합성을 저해하는 메커니즘으로 살균 효과를 나타내며 넓은 항균 영역을 보유하고 있어서 그람 양성균, 그람 음성균, 렙토스피라 등에 효과적으로 작용한다.본 실험에항생 능력을 저해시킨다.2.2. Alkaline lysis methodAlkaline lysis method란 높은 pH의 Anionic detergent를 이용하여 세포를 용해시켜 Plasmid DNA를 추출하는 방법이다.이는 Genomic DNA와 Plasmid DNA의 구조적 차이에 의해 분리되는데 이때, Genomic DNA는 실험 과정 중 세포 찌꺼기 및 변성 단백질과 함께 침전으로 처리되며, Plasmid DNA는 에탄올 침전이나 Celite column 등의 방법을 이용하여 회수된다.2.3. 겔 전기영동(gel electrophoresis)겔은 콜로이드 용액이 굳어진 상태를 말하는 것이다. 전기영동이란 말은 전기적인 힘에 의해 전하를 띤 입자가 이동하는 것을 가리키는 표현이다. 따라서 겔 전기영동은 전류를 흘려주어서 전하를 가진 입자가 겔 내부에서 이동하여 분리되도록 하는 기술이다.DNA나 RNA의 경우 주로 agarose를 사용하고, 단백질의 경우 polyacrylamide 등을 굳혀서 겔을 만든다.구조나 크기 등 입자의 성질에 따라서 겔을 통과하여 이동하는 속도가 달라지게 된다.본 실험에서는 DNA 분리를 확인하기 위해서 agarose를 사용하였다.3. 기구 및 시약?ReagentSolutionStock SolutionWorking SolutionSolⅠ2M Tris-HCL pH 8.00.2M Glucose0.25M EDTA25mM Tris-HCL pH 8.050mM Glucose10mM EDTASolⅡ2M NaOH10% SDS0.2M NaOH1% SDSSolⅢ8M Potassium acetate96% Glacial acetate5M Potassium acetate9.6% Glacial acetateTE Buffer2M Tris-Cl0.25M EDTA10mM Tris-Cl1mM EDTAPlasmid DNALB brothE.coli70%, 100% EtOH?Apparatusmicro pipetteE-tubespreaderelectrophoresi간 배양한다. ( 매 10분마다 ticktock ! )3) 42℃에서 45초간 heat shock를 시켜준다.4) 준비된 얼음 위에서 2분간 식힌다.5) 준비된 900μl의 LB broth를 더하여 37℃에서 1시간 동안 배양한다.6) Ampiciline이 포함된 LA plate를 2개 포함 되지 않는 LA plate를 2개 만들어 준다.7) 준비된 고체배지에 배양시킨 E.coli를 pipette 15-20μl로 떨어트린 후 Spreader로 골고루 도말하여준다.→ 도말 후 파라필름으로 공기의 유입이 없도록 plate를 밀봉 시켜주었다.8) 37 incubator에서 plate를 뒤집어서 밤새 배양한다.9) 16~18시간 후 colony를 관찰한다.10) 관찰 후 plate를 냉장고 안에 보관한다.< DNA miniprep, 전기영동 >1) 준비된 대장균을 15,000rpm에서 3분간 원심분리 시킨다.→ 원심분리가 제대로 되지 않아 한 번 더 위 과정을 실행하였다.2) 상층액 제거 후 말려준다.→ 상층액을 제거할 때 침전물이 pipette에 닿지 않도록 주의하였다.3) solⅠ을 200μl 넣고 vortexing 한 후 10분 간 대기한다.4) solⅡ를 200μl 넣고 gently mixing 10회 해준 뒤 3분 30초간 대기한다.→ gently mixing은 E-tube를 위아래로 살살 mixing 해주었다. 뿌옇게 있던 용액이 투명하게 변함5) solⅢ를 200μl 넣고 gently mixing 10회 해준 뒤 10분간 대기한다.6) 15,000rpm에서 3분 30초간 원심분리 시킨다.→ 원심분리가 될 때 까지 뒤 과정을 반복하였다.7) 상층액을 250μl씩 새로운 E-tube에 넣어준다. (pipette에 침전물이 닿지 않도록 주의한다.)8) 100% EtOH를 1ml넣은 후, 상온에서 2분간 대기 후 원심분리 한다.→ 원심분리가 될 때 까지 뒤 과정을 반복하였다. / 침전물의 확인이 어려웠다.9) 70% EtOH를 1ml넣은 후, Vortexing : (-)Plasmid, (-)Amp 오른쪽 위 : (+)Plasmid, (-)Amp왼쪽 아래 : (-)Plasmid, (+)Amp 오른쪽 아래 : (+)Plasmid, (+)Amp< DNA miniprep, 전기영동 >6.고찰1) Time dependent본 실험은 생물 실험이므로 시간적 조건이 매우 중요하다.특히 세균 및 핵산을 다루는 시험일수록 실험체가 민감하기 때문에 시간을 잘 지켜주어야 한다.위 실험에서는 크게 두 가지의 time dependent를 지켜주면 된다,그 중 첫 번째는 대장균 배양시간이다.대장균뿐만 아니라 모든 세균들은 영양원이 풍부한 조건에서 증식속도가 매우 빠르기 때문에 위에 주어진 16~18시간을 지나버리면 우리가 확인해야할 각 조건별 증식 정도를 파악할 수 없게 될 것이다.두 번째는 용해 진행시 지켜야할 시간이다.DNA를 다루는 것은 매우 민감하고 섬세한 작업이므로 첨가제를 넣은 후의 대기시간 또한 실험결과에 큰 영향을 미친다.이때 용해진행 시간을 더 적게 한다면 원하는 작용을 얻기 어렵고, 그보다 길어진다면 해당 Plasmid가 파괴되어질 것이다.위와 같은 원인에 따라 생물 실험에서의 시간의 중요성을 제시한다.2) Plasmid가 들어갈 가능성을 높이는 법① 2가양이온2가양이온은 미생물의 exopolysaccharide 사이를 안정화시키기 때문에 이를 제거해주어야 세포벽을 약하게 해서 가능성을 높일 수 있다.이러한 기능을 해주는 것이 킬레이트제이며 킬레이트제는 2가양이온을 제거하는 것이 아닌 이와 결합하여 안정화의 기능을 없애주는 역할을 한다.② HEAT SHOCK차가운 상태에서 급격한 온도 변화를 통해 plasmid가 확실히 내부로 빨려 들어가도록 해주는 역할을 하는 과정이다.3) 배양실험 결과의 고찰배양 실험 시 나와야하는 결과는 각각의 조건에서 다음과 같다.① Amp와 Plasmid가 둘 다 없는 경우대장균이 아무런 방해를 받지 않으므로 증식이 잘 되어야 한다.② Amp만 첨가된 경우Amp는 항생물질이므로 증식을 억제하여 대증식의 정도를 알아보기 어려운 결과를 나타냈다.그 원인을 예측해보면 세 가지가 나온다.첫 번째는 실험적 테크닉 측면으로 대장균 도말 시에 화염멸균을 제대로 하지 않았을 경우이고, 두 번째는 준비된 실험 시약이 잘못되었을 경우, 마지막으로는 온도 조건을 변화시켜줄 때 시간을 엄격히 조절하지 못했을 경우가 있다.마지막 온도 조건을 엄격히 해야 하는 이유는 Plasmid의 세포벽을 안정화시키기 위함인데 이러한 안정화가 잘 진행되지 않았을 경우 Plasmid의 역할을 잘 못 할 수 있기에 적절한 시간동안 온도를 변화시켜 주어야한다.4) 각 sol 만드는 방법과 넣는 이유각 sol을 제조하는 방법은 MV=M′V′를 사용하며, %농도의 경우 M=d*10*%/fw를 이용하여 M농도로 환산 후 계산한다.sol별 역할은 다음과 같다.① SolⅠ : Buffer, Isotonic, 효소의 불활성 및 분리효율, RNA제거 = 세포벽 파괴glucose는 세포 내의 삼투압을 맞추어 주는 역할을 하며, Tris는 pH의 급격한 변화를 맞추어 주는 buffer의 역할을 한다. 마지막으로 EDTA는 2가 양이온을 잡아주는 킬레이트제이다.② SolⅡ : Alkaline 제작, Phospholipid 용해 = 세포막분해NaOH는 pH를 12.0정도로 만들어 DNA와 단백질 등을 변성시키고, SDS는 계면활성제 성분으로 세포벽을 용해시키고 단백질 등을 unfolding시킨다.③ SolⅢ : pH의 중성화, Potassium acetate의 농도를 맞춤 = 변성된 플라스미드 복구역할potassium acetate와 glacial acetate가 첨가되면 높은 농도의 염과 아세트산에 의해 pH가 낮아지게되고, 단백질과 genomic DNA 등은 크기가 커서 서로 엉기게 되고, 크기가 작은 plasmid DNA만 제대로 복구된다.그리고 potassium에 의해 SDS가 potassium dodecyl sulfate가 되면서 genomic DNA와 단백질 등과 함께 착물을 형성한다.④ TE Buffe

자연과학| 2019.07.11| 10페이지| 1,500원| 조회(504)

플라스미드, 분자생물학, E.coli, 전기영동, 대장균, 화학생명공학과

미리보기

닫기
Sodium Borohydride Reduction Benzophenone의 환원 평가A+최고예요

유기화학 및 실험21.실험제목Sodium Borohydride Reduction: Benzophenone의 환원2.실험이론< Benzophenone의 환원 >+(1) NaBH₃첨가Benzophenone은 NaBH₄와 같은 환원제에 의해 2차 알코올을 생성한다. 이러한 환원제는 수소화이온을 부분양전하에 공격시켜 환원을 시킨다.위 사진의 1번 과정처럼 BH₄의 수소원자 하나가 H?로 벤조페논의 부분양전하를 띠는 탄소원자를 공격한다.(2) H?첨가음전하를 띠는 산소에 H?를 첨가하여 알코올로 만들어 반응을 완료한다.< 회전농축기 : rotary evaporator >2개 이상의 물질이 혼합되어 있을 때 끓는점 차이를 이용하여 물질을 분리해내는 기계이다.이 실험에서는 Diphenyl methanol의 끓는점이 298℃로 매우 높기 때문에 가열부에 있는 플라스크에 있는 Diphenyl methanol이 나머지 부산물들이 증발되어 농축되면서 순수한 물질을 얻게 된다.< Diphenyl methanol >Diphenyl methanol녹는점69℃끓는점298℃화학식C₁₃H₁₂O분자량184.23g/mol3.기구 및 시약?ReagentBenzophenone녹는점48.5℃(불안정형 29℃)끓는점305.4℃(10torr : 158℃)화학식C₁₃H₁?O분자량182.2179g/mol공업적으로 공기 중에서 다이페일메테인의 구리 촉매 산화에 의해 만들어지는 유기화합물이다. 다이페닐케톤·벤조일벤젠이라고도 한다. 좋은 향이 나는 무색 결정으로 안정형과 불안정형의 2형이 있다.magnesium sulfate녹는점1124℃용해도35.1g/100mL (20℃)화학식MgSO₄분자량120.366g/mol실험에서 사용된 것은 anhydrous로 무수물이다. 그러므로 흡습제로 사용되었다.SodiumborohydrideLiAlH₄보다는 부드러운 환원제인데, 알데히드, 케톤, 산염화물을 신속하게 환원하여 락톤, 에폭시드, 에스테르를 서서히 환원시키지만 카르복실산, 아미드, 니트닐, 올레핀, 할로겐화알킬 등은 특별한 조건을 제외하면 환원하지 않는다.Methylene chloride염소화 탄화수소 용제이다. 유지류의 용해력은 일반적으로 사용되고 있는 염소화 탄화수소 용제 중에서 최대이다. 독성이 적고, 안정성이 좋으며, 혼입된 물에 대해서도 안정하다.2-propanolTLC (n-hexane : Ethyl acetate)?Apparatus둥근 flaskstand and clamprotary evaporatormagnetic stirrer/hot plate깔때기분별깔때기erlenmeyer flaskstirring bar거름종이4.실험방법 및 관찰1) 100ml 둥근 플라스크에 Benzophenone(1.458g, 8.0mmol)과 2-propanol(10ml)을 넣은 다음 stirring bar를 넣는다.2) 여기에 Sodium borohydride(152mg,40mmol)을 넣고 반응혼합물을 실온에서 1시간 교반 시킨다.(반응이 느릴 경우 약간 가열해도 좋다./물중탕 50℃유지)3) 반응 진행여부는 TLC로 판단한다.(전개용매 Ethyl acetate : n-hexane = x : y)1) 반응이 끝난 후 반응 액에 10% NaOH수용액 8ml을 가하여 침전물이 완전히 녹을 때까지 교반한다.2) 이 반응혼합물을 Methylene chloride(20ml)로 2번 추출하여 합한다.3) 추출한 유기 층에 anhydrous MgSO₄(약 2.0g)을 넣고 잘 흔들어 준 다음, 거름과정으로 고체를 제거한다.4) 거른 액을 rotary evaporator를 사용하여 농축시키면 생성물인 Diphenyl methanol이 고체로 얻어진다.---------------------실험 시 부재로 관찰사항을 확인할 수 없음--------------------1) Diphenyl methanol의 무게를 분석저울로 잰다.2) 고체상태의 Diphenyl methanol을 막자사발에 간다.3) 갈아진 고체를 모세관에 3mm정도 넣는다.4) 녹는점 측정기에 온도계와 모세관을 넣고 시각적으로 녹는점을 측정한다.관찰사항시간가열세기온도(℃)3:56118-1.521-2.5254:062.5304:073324:093344:114404:135454:165554:185604:205645.실험결과*Diphenyl methanol의 이론값1.458 g (benzophenone의 g수) ÷ 182.22g/mol (benzophenone의 화학식량)= 0.008mol (benzophenone mol수=diphenyl methanol의 mol수)0.008 mol (diphenyl methanol의 mol수) × 184.23g/mol (diphenyl methanol의 화학식량)= 1.474 g*Diphenyl methanol의 실제값< 실험 끝나고 무게 > < 유리접시 무게 > < 일주일 뒤 무게 >수분이 증발된 후의 무게인 일주일 뒤 무게와 유리접시 무게를 빼준 값이 실제값이다.98.234 - 97.243 = 0.991 g*수득률수득률(%)= {실제값} over {이론값} TIMES 100= {0.991} over {1.474} TIMES 100#``````````````````````````````````````=67.23%6.고찰1) TLC전개용매 비율이 n-hexane : ethyl acetate = 7 : 3이라고 정해진 이유는 측정할 물질들이 무극성에 가깝거나 무극성이기 때문이다.그러므로 벤조페논과 diphenylmethanol의 Rf값을 효율적으로 측정이 가능해진다.반응물은 벤조페논이 알코올로 변하는 과정의 물질이기 때문에 Rf값이 서서히 달라져야한다.가운데 대조군으로 반응물과 벤조페논을 찍어 둘이 떨어지는 것을 시각적으로 분명히 볼 수 있게 해준다.즉, 반응물이 벤조페논에서 diphenylmethanol로 변하는 과정을 보여주고 그 반응의 종결을 알 수 있게 해준다.2) 다른 환원제는 어떤 것을 사용할 수 있을까?NaBH₄ 외에도 같은 금속 수화물인 LiAlH₄이나 Pt/H₂와 Pd/H₂와 같은 전이금속을 촉매로하는 촉매 수소화 반응이 환원법으로 사용될 수 있다.이 방법들은 매우 강한 환원제라서 실험 시 위험성이 크므로 NaBH₄를 사용했을 것이다.3) 각 시약들을 첨가하는 이유는 무엇일까?(1) Sodium borohydride / 2-propanolNaBH₄는 수소화이온을 원인으로 케톤을 환원시키기 위해 환원제로 첨가한다.2-propanol은 벤조페논을 녹이는 용제로 사용된다.(2) 10% NaOH밑에 문제풀이 (1)번 참고(3) Methylene chloride유기 용매로 사용되어 diphenylmethanol만 잡아주고 물과 밀도 차이로 분리시켜 순수한 생성물을 얻기 위해 첨가한다.(4) anhydrous MgSO₄무수황산마그네슘은 흡습성이 강하기 때문에 남아있는 적은 양의 물을 흡수하여제거시켜준다. 즉, 남아있는 수분을 제거시키기 위해 첨가한다.4) 문제풀이(1) 반응혼합물에 10% NaOH 수용액을 가하는 이유는 무엇인가?생성물인 diphenylmethanol 외의 나머지 부산물을 제거시키기 위해 가해준다.예를 들어 반응하고 남은 NaBH₄나 2-propanol을 제거시켜준다.또한 염기첨가로 중화되어 물을 생성시켜 물의 수소원자가 양성자를 제공할 수 있으므로수율을 높여 줄 것이다.(2) 반응혼합물에 10% NaOH 수용액 대신에 진한 염산을 가했더니 생성물인diphenylmethaol의 수율이 현저하게 감소하였다. 이 현상을 반응식으로 설명해보자.진한 염산 또한 NaBH₄를 제거시켜주지만 H?이 많으면 diphenylmethane이생성될 것 이다. OH?가 많으면 그대로 알코올이 생성 될 것이다.(3) NaBH₄는 무엇으로부터 만들어지는가?이 화합물은 1940 년대 HI Schlesinger에 의해 발견되었다.B(OCH₃) 3 + 4NaH → NaBH₄ + 3NaOCH₃

공학/기술| 2019.02.26| 8페이지| 2,000원| 조회(3,199)

벤조페논, 환원, Benzophenone

미리보기

닫기