* Experimental Title : 건조필름법을 이용한 일반세균수 측정1. Experimental purpose- 일반세균수 측정법 중 건조필름법을 이용하여 일반세균의 수를 측정하고자 한다. 이 실험은 건조필름법에 의거하여 시료를 희석배수에 따라 분주 및 배양하며, Petrifilm 내 존재하는 집락 수를 세어 일반세균수 측정법으로 계산하여 원리 및 실험법을 익히고자 한다.2. Experimental overview2. 1. Principles- Bacterial count report of dry film method건조필름법에 있어 검체 1mL(g) 중의 세균수를 기재 또는 보고할 경우 그것이 어떤 제한된 것에서 발육한 집락을 측정한 수치인 것을 명확히 하기 위하여 1평판에 있어서 집락수는 상당 희석배수로 곱하고 그 수치가 건조필름법에 있어서 1mL(g) 중의 세균수 몇 개라고 기재보고하며 동시에 배양온도를 기록한다. 숫자는 높은 단위로부터 3단계에서 반올림하여 유효숫자를 2단계로 끊어 이하를 0으로 한다. 집락수의 계산은 확산집락이 없고 1개의 평판 당 15-300개의 집락을 생성한 평판을 택하여 집락수를 계산하는 것을 원칙으로 한다(Fig. 1). 전 평판에 300개 초과 집락이 발생한 경우 300에 가까운 평판에 대하여 밀집평판 측정법에 따라 계산한다. 만약 전 평판에 15개 미만의 집락을 얻었을 경우 가장 희석배수가 낮은 것을 측정한다(Fig. 2).
* Experimental Title : 건조필름법을 이용한 대장균(군) 정성·정량시험법1. Experimental purpose- 대장균군의 정성·정량시험법 중 건조필름법을 사용하여 대장균군과 대장균의 정성 및 정량 분석을 하고자 한다. 이를 위해 건조필름법에 의거하여 시료를 희석배수에 따라 분주 및 배양하고, 배양된 페트리필름에서 대장균군·대장균의 정성 및 정량 분석하는 법을 익히고자 한다.2. Experimental overview2. 1. Principles- Indicator organisms식품의 제조, 가공 또는 저장과정에 대하여 전반적으로 위생적인 취급·관리가 되었는지 또는 병원성 미생물에 오염되었는지 여부를 간접적으로 알아보기 위해 지표가 되는 미생물을 지표미생물 또는 오염지표세균이라고 한다. 이러한 지표미생물들은 하단의 조건을 충족시켜야 한다(Fig. 1). 이에 해당하는 미생물로는 대장균군, 대장균, 장구균 등이 있는데, 이들은 질병을 직접 유발하지는 않지만 장내 상존하는 미생물이므로 식품에서 이들 지표미생물이 검출된다는 것은 소화기계 전염병균이나 식중독균의 공존 가능성이 있다는 것을 나타낸다(Park, H. K., 2009).
* Experimental Title : Staphylococcus aureus 정성시험1. Experimental purpose- 식중독을 일으키는 대표적인 원인균 中 잠복기가 짧은 S. aureus를 정성시험하고자 한다. 이 실험은 표준균과 시료를 취하여 TSB 배지를 통해 증균배양하며, Baird-Parker agar 배지에서 분리배양 후 Gram stain, coagulase 시험을 통해 확인시험하여 시료에서 S. aureus 오염 유무를 판별하고자 한다. 또한 S. aureus 정성시험을 통해 원리 및 시험법을을 익히고자 한다.2. Experimental overview2. 1. Principles- Staphylococcus aureusS. aureus(황색포도상구균)는 Gram-positive 구균으로 한 쌍, 4개씩 또는 포도송이 모양으로 불규칙하게 배열되어 있다(Fig. 1). 균의 크기는 0.5-1.2um이며, 편모·포자·협막이 없고 비운동성이다. S. aureus는 자연계에 널리 분포되어 있을 뿐만 아니라 인간의 호흡계통 및 피부 등에서 자주 발견되며, Clostridium botulinum 식중독과 마찬가지로 식품 내 증식하면서 생성된 장독소(enterotoxin)를 섭취함으로써 발생되는 독소형 식중독균이다.
* Experimental Title : Salmonella..정성 시험 1. Experimental purpose - Salmonella.는 매우 중요한 식중독 원인균 및 패혈증, 설사, 폐렴 등을 야기하는 인수공통감염병의 병원체로 증균 배양, 분리 배양 그리고 확인 시험을 통해 정성 시험을 한다. 그에 따라 Salmonella.가 증식될 환경을 인위적으로 조성한 식품을 검체로 하여 Salmonella.정성 시험을 함으로써 Salmonella. 정성 시험의 원리 및 시험법을 익히고자 한다. 2. Experimental overview 2. 1. Principles - Salmonella Salmonella.는 enterobacteriaceae(장내세균과)에 속하는 통성혐기성, 무아포성, Gram-negative 간균이며 직경 약 0.5-1.0um, 길이 1-5um 정도의 크기로, 주로 사람이나 동물의 소화관에 서식한다. Salmonella의 모든 종은 식중독균이며 대체적으로 Salmonella를 명할 시 모든 종인 Salmonella spp(species).라고 한다. 주로 물고기, 닭고기, 계란 등 동물성 식품에서 발견되는 bacteria는 소화기관 감염을 일으키며, 설사, 구토, 복통, 발열 등의 증상을 유발할 수 있다. 특히 면역력이 약한 사람이나 어린아이, 노인 등에서 심각한 건강 문제를 야기할 수 있으므로 주의해야한다. Salmonella는 대부분 주모성 편모를 가져 운동성을 띠며, lactose, sucrose를 제외한 대부분의 glucose, maltose, mannitol 등을 발효하여 산과 gas(CO2)를 생성한다. 다른 장내 세균과 다르게 고삼투압 조건에서 생존하며, 낮은 pH에서 증식하고, malachite green 저항성과 낮은 영양요구성의 특징을 가진다. 또한 무기황과 thiosulfate로부터 H2S를 생산하는 특징을 가진다.
* 진행 실험 : 식품의 조회분 정량분석 1. 실험 목적 : 식품분석에서 회분(ash)이란 식품을 태우고 남은 무기물(mineral)이라 정의되며 당질, 지질, 단백질, 비타민 등 유기물과 수분을 제외한 성분이다. 이러한 회분 분석은 식품의 영 양적 평가 항목으로 특정 무기질 분석의 전단계로 의의가 있을 뿐 아니라 식품의 품질 평가 측면 에서도 중요하다. 또한 식품 중에 비유기성 오염물의 존재 확인이나 가축, 가금류 사료의 품질 평 가에도 이용할 수 있다. 그에 따라 조회분함량 측정법의 원리 및 실험 방법을 익히고자 한다.2. 실험 개요2. 1. 실험 원리- 식품의 조회분 함량조회분(粗灰分, crude ash)이라 함은 식품을 550-600℃(도가니의 밑바닥이 짙은 적색으로 가 열되었을 때의 온도)에서 태워서 남은 재(ash) 또는 회화 후 남은 물질인 무기 물질을 말하며 이것은 무기물의 총량으로 정의하고 있다. 하지만 대부분의 식품에서 무기질인 염소는 일부 또는 대부분이 회화시에 소실되기 때문에 실제로 식품을 태워 남은 재를 무기질로 인정할 수 없다. 또 한 두류, 야채류, 해조류 등의 회분에는 유기질인 탄산이 다량 함유되어 있다. 이처럼 잔회의 성 격은 식품의 종류와 회화조건에 따라 변하기 때문에 무기질의 정량은 어려우며, 식품의 회분은 대략 무기질과 거의 같다고 간주한다.- 직접회화법(Classical dry ashing technique) 시료를 회화용기에 담아 전기로에 550-600℃로 가열하면 유기물은 산화, 분해되어 많은 가스 를 발생하고 타르(tar)1) 모양으로 되며 점차 탄화한다. 이 과정을 통해 완전히 회화 처리되었을 시의 재의 양이 조회분의 양이 되며 이를 이용하여 조회분의 함량을 구한다. 탄소는 더욱 산화되 어 탄산가스(CO2)로 되어 방출되지만, 인산이 많은 사료에서는 강열하면 양이온과 결합하지 않 고 용융2)상태로 되며, 또한 산소의 공급이 불충분하게 되어 오히려 회화의 진행이 어렵게 된다.