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LG화학 품질보증(QA) 합격 자기소개서

1. My Competency지원분야/직무에 대한 지원 동기와, 해당 분야/직무를 위해 어떤 준비를 해왔는지 소개해주세요. (700자)[LG화학의 ‘고품질 브랜드가치’를 확립하고 싶습니다]품질보증 직무에 지원한 이유는 두 가지 입니다.첫째, 품질관리 시스템을 구축하고 운영 및 진단하고 싶습니다. 원재료 입고부터 완제품 출고까지 모든 과정의 품질관리를 담당하고 싶습니다.둘째, 품질불량 issue에 대응하고 내부 공정 개선활동을 하고 싶습니다. 고품질, 고순도의 의약품 제조에 힘쓰고 싶습니다.이를 위해 ‘품질’에 대한 기본적인 지식을 익히고, ‘의약품 제조공정’에 대한 이해와 ‘문제해결능력’을 갖추었습니다.대학재학 중, 면역학 강의의 과제로 바이오의약품에 대한 프로젝트를 진행하여 이에 대한 기본적인 용어와 개념을 공부했습니다. 이를 직접 경험하기 위해 대학 내 연구실에서 1년간 ‘세포배양 및 단백질 정제’실험을 진행하며 바이오의약품 제조공정을 익히고, ‘HPLC, GC’등의 분석기기를 사용했습니다.‘GMP’와 ‘밸리데이션’ 교육은 의약품 제조공정의 품질관리 기준과 환경 관리법에 대해 알 수 있는 좋은 경험이었습니다. 더불어 품질 문제 발생에 효과적으로 대응하기 위해 문제 예상 시나리오를 작성하고 그에 따른 해결방안을 모색하는 등의 6시그마 활동 결과로 ‘6시그마 GB’ 자격증을 취득했습니다.대학 4년간 배운 지식과 경험을 바탕으로, LG화학의 고품질 브랜드 가치를 확립하여 ‘세계 최고’의 생명공학기업이 되는 데에 일조하고 싶습니다.2. My Story본인의 특성 및 성격(장점/보완점)을 자유롭게 기술해 주세요. (500자)[고객에게 정직하게 응대하고, 효율적으로 해결한다]의약품 품질보증 직무에서 중요한 역량은 ‘원칙을 준수하는 태도’와 ‘문제해결능력’이라고 생각합니다.아이스크림 체인점에서의 아르바이트 중, 상품에서 수차례 이물질이 발견되었습니다. 심각한 오염은 고객의 건강을 위협할 수 있기 때문에 저는 직원회의를 통한 문제 해결을 건의했습니다. 문제해결에 대한 방안 모색 중 저는 ‘6시그마의 DMAIC 기법’을 문제해결에 활용하였습니다. ‘작업자 및 기구의 위생’을 Project Y로 두어 위생관리 절차, 기구들의 세척 및 멸균 방식을 바꿈으로써 문제를 해결할 수 있었습니다.이에 그치지 않고 저는 문제의 원인, 개선조치를 상세히 작성하여 업장 내에 부착하였습니다. 이를 본 대부분의 고객들은 정직한 응대와 신속한 문제해결에 만족해하셨습니다.고객을 최우선으로 생각하고 문제를 효율적으로 해결할 수 있는 저는 LG화학의 품질보증 직무를 수행하는데 적합하다고 생각합니다.3. My VisionLG화학에서 이루고 싶은 나만의 꿈과 비전을 소개해주세요. (500자)[고객을 위한 가치창조, 품질보증부터]품질문제에 대한 신속한 대응은 의약품에 대한 신뢰성 증대로 기업의 ‘브랜드 가치’와 직접적으로 연결됩니다. 때문에 저는첫째, ‘소통’하는 신입사원이 되겠습니다.대학 2학년 시절, 학생회로서 ‘재학생-편입생 만남회’를 기획하여 소통의 장을 만든 경험이 있습니다. 제품과 공정에 대해 정확히 이해하기 위해 각 부서와 긴밀히 협의하겠습니다.

취업| 2021.10.17| 2페이지| 3,000원| 조회(738)

자기소개서, Lg화학, 품질보증, 합격자소서, 품질보증자기소개서, QA자기소개서, 품질보증자소서

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식물조직배양 벼 (동안) 레포트 평가A좋아요

Name :Title : Rice tissue cultureObjective : seed에서 callus를 유도하고, 유도된 callus를 통해 완전한 개체를 얻 는다.Materials : 동안벼, blade, 화분, 흙, 물, 70% Ethanol, 70% Clorox, Tween 20, DW, N6D배지, MS-NK 배지, MS배지, 클린벤치, 휴지, 필터페이터, 알코올램프, 100% Ethanol, 핀셋, 쿠킹호일, wrap, 네임펜, 라이터Methods① 벼의 껍질을 제거한 후 비커에 담아 물로 세척한다.70% Ethanol을 이용하여 10초간 세척한다.70% Clorox와 Tween 20 2방울을 넣고 20분간 흔들어서 세척한다.④클린벤치에서 증류수를 이용해 5회 헹구어준 후, 필터페이퍼 위에서 벼를 말 려준다.⑤ 벼를 N6D에 치상한다.⑥ 뿌리가 자라나면 계속 뿌리를 잘라주고, 캘러스를 유도한다.⑦ 캘러스가 유도되면 MS-NK배지에 치상한다.regeneration되면 MS배지에 옮겨준다.⑨ 뿌리와 잎이 많이 나오면 순화시킨다.6.Results3월 10일처음 벼를 치상하였다.3월 17일벼를 치상한 후 1주일 후 커다란 균이 군락을 형성하였다.3월 17일 새로운 벼 배지 2개씩 받았으며, 바로 뿌리를 잘라주었다.3월 31일새로 받은 배지에서 나온 뿌리를 계 속 잘라주었다. 캘러스가 점점 커지는 것을볼수있다.4월 7일눈에 띄게 캘러스가 커진 것을 관찰 할수있다.캘러스가 어느정도 자라면 캘러스만 떼어서 MS-NK배지에 옮겨주어야 한다.4월 21일MS-NK에 옮겨준 캘러스에서 까맣게 세포가 죽은 것을 관찰할 수 있다. 이 를 자르지 않으면 모든 세포가 죽어서 까맣게 변할 수 있기 때문에 지속적으 로 까만 부분을 잘라주어야 한다.남아있는 벼 캘러스가 크기가 너무 작고, 큰 크기의 캘러스는 까맣게 되어 실험을 종료했다.4월 7일 – 벼 배지가 하나밖에 없어서 추가로 진행하였다.4월 14일 – 앞의 실험과 동일하게 뿌리를 계속 잘라주었다.4월 28일 – 캘러스를 MS-NK에 옮겨주고 빛에 쐬줌5월 7일캘러스에서 뿌리로 추정되는 조직이 자라기 시작했으며, 연한 초록색 빛을 띠는 캘러스가 생겨났다.5월 19일다른 캘러스는 까맣게 죽어버리거나 배 지에 치상하던 중에 떨어뜨리고, 5월 7 일 사진의 빨간색으로 표시한 캘러스가 많이 자라나 MS배지에 옮겨주었다.5월 26일MS 배지에서 많이 성장한 벼를 순화시켜 주었다.7.Discussion벼는 총 3번에 걸쳐서 실험을 진행했는데, 그 이유는 잦은 오염때문이다. 처음 하는 실 험이기에 조작 미숙으로 인한 것을 포함하여 각종 기구의 살균이 제대로 안되어 있거나 벼 자체의 오염일수도 있다.첫번째 실험에서 오염은 눈에 띄는 곰팡이와 벼의 바닥부분에 보이는 균들이다. 오염 이 난 이유는 크게 세가지로 생각할 수 있는데, 첫번째로는 벼의 오염일 수 있다. 벼를 멸균할 때에 에탄올과 clorox를 통해 살균을 진행한다. 배지에 자란 형태를 보았을 때 곰 팡이와 비슷한 것을 볼 수 있다. 에탄올은 곰팡이를 멸균시키지 못하지만 clorox는 포자 류를 멸균 시킬 수 있기 때문에 clorox의 농도가 적었거나, 멸균 시간이 너무 짧아서 오 염이 일어난 것일 수도 있다. 또한, 각각의 살균을 진행할 때에 기구를 사용하지 않고 비 커를 이용하여 손으로 흔들어서 진행했기 때문에 완벽하게 살균이 되지 않았을 수 있다. 두번째로는 멸균 이후에 클린벤치 내에서 멸균 용액들을 washing할 때에 오염이 났을 가능성이 있다. washing하면서 washing하는 당사자의 작업미숙으로 인해 균이 들어갔을 수도 있으며 washing시에 사용했던 비커나 필터페이퍼 등이 제대로 살균되지 않았을 수 있다. 세번째로는 작업자의 작업미숙으로 인한 오염이다. 핀셋을 제대로 멸균하지 않아 핀셋에 존재했던 균이 벼와 함께 치상 된 것일 수도 있다. 네번째로는 식물체 내부의 오염이다. 식물체의 내부가 바깥으로 나오면서 오염원으로 작용할 가능성이 있는데, 벼를 치상하던 중에 부서진 벼를 치상하여 오염이 난 결과일 수도 있다.이를 통해 크게 형성된 곰팡이는 벼 자체의 오염일 가능성이 크고, 벼의 바닥부분에 비교적 작게 보이는 오염은 핀셋을 제대로 멸균하지 않아서 생긴 것이라고 판단된다. 이 때, 클린벤치 내부가 더럽거나 손에서 떨어진 균이 배지에서 자란 것이라고 생각하지 않 은 이유는 벼를 치상하지 않은 부분에서 colony가 형성되지 않았으며 다른 클린벤치를 사용한 학생들에게서도 같은 결과를 얻었기 때문에 가능성이 매우 낮다고 생각한다.또한 실험 도중에 났던 오염들은 대부분 핀셋에 의한 오염이거나, 핀셋으로 seed를 세개 눌러 seed 안에 있던 내용물들이 나오면서 오염된 것일 수도 있다.N6D배지는 seed에서부터 callus를 유도하기 위해 사용된다. 이 때 seed를 치상하고 배지에 빛을 쪼여주면 안된다. 그 이유는 빛을 쪼여주면 callus가 유도되는 것이 아니라 seed에서부터 분 화가 바로 진행되기 때문에 조직배양을 할 수 없다. 실제로 두번째 벼 실험에서 빛을 가리기 위해 호일을 사용했는데 호일 밑 부분이 벗겨져 서 배지 하나가 전부 분화되었다.두번째 실험에서 벼의 ‘눈’부분에서 뿌리와 callus가 동시에 자라면 뿌리를 잘라주어 callus를 유도하기 용이하게 한다. 하지만 이 때 뿌리를 정확하게 잘라주지 않으면 생장 점을 가진 뿌리가 더욱 잘 자라게 되고 뿌리가 자라는 속도에 비해 callus가 천천히 자라 기 때문에 callus를 유도하기 어려워진다. 처음 뿌리를 확실하게 잘라주지 않았기 때문에 약 2주 정도의 실험마다 뿌리를 잘라주어야 했다.callus가 어느 정도 자라고 나면 MS-NK 배지에 옮겨준다. 처음에는 하나의 seed에서 나온 callus를 여러 조각으로 조각 내어 치상했는데, callus가 커지기 전에 callus의 모서 리부분에서 까맣게 세포가 죽는걸 볼 수 있었다. 세포가 죽기 시작하면 주변에 있는 세 포들까지 세포를 죽게 만들기 때문에 죽은 부분만 계속해서 잘라주었다. 두번째로 callus를 치상할 때에는 실험일정이 촉박했기 때문에 하나의 seed에서 나온 callus를 조각내지 않고 바로 치상하였다. 앞의 실험과 달리 callus를 조각내지 않고 충분히 큰 상태에서 바 로 빛을 쪼여주었기 때문에 callus가 죽는 속도보다 regeneration되는 속도가 더 빨라 성 공적으로 순화시킬 수 있었다. 다른 학생들의 실험에서 처음 callus를 치상하고 바로 다 음주에 왕성하게 regeneration이 된 것들이 있었는데, 이는 callus에서 regeneration된 것 이 아니라 callus에 조직이 함께 있었기 때문이다. 조직에는 생장점이 있기 때문에 callus 에서 regeneration되는 속도보다 빠르게 자란 것이다.Regeneration이 어느 정도 진행되면 일반적으로 식물세포를 키울 수 있는 MS배지로 옮겨준다. 그 이후 개체가 성장하면 화분을 이용하여 순화시킨다.순화 시킬 때 철사를 꽂고 랩으로 씌우는 이유는 기존의 배지 환경과 유사하게 만들어 주기 위함이다. 배지에서 바람이 통하지 않고 습한 환경을 유지하고 있다가 급격하게 환 경이 변하면 스트레스를 받을 수 있기 때문에 최대한 비슷한 환경을 조성시키기 위함이 다.처음 치상한 seed의 수에 비해 순화시킨 벼의 수가 적은 이유는 오염으로 인해 배지를 아예 버리거나, 오염이 난 곳 주변부에 있는 벼를 버리거나, 클린벤치 내에서 배지를 바 꿔주던 중에 떨어뜨리거나, callus가 죽어 까맣게 변하고, callus에서 regeneration이 일어 나는데 오래 걸려 미처 실험 결과를 얻지 못한 채로 실험을 종료해서이다. 또한 캘러스 의 크기가 클수록 자라나는 줄기의 수가 많아 조밀하고 곧게 뻗는 것을 볼 수 있었지만, 캘러스의 크기가 작으면 세 개 혹은 그 이하의 줄기가 자라나는 것을 볼 수 있었다. 이 를 통해 캘러스의 크기가 수확량의 차이를 만들어낸다는 것을 알 수 있다.순화시킨 배지와 처음 빛을 보아 분화가 일어난 벼를 땅에 심은 모습이다.이를 통해, 벼는 단자엽의 식물임을 알 수 있다.Reference Hyperlink "http://terms.naver.com/" http://terms.naver.com/네이버 지식백과 : NaClO

자연과학| 2021.10.22| 8페이지| 1,500원| 조회(371)

식물조직배양, 실험레포트, 벼배양, 식물조직배양실험, 식조배

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식물조직배양 바이올렛 (African Violet) 레포트

Name :Title : African Violet tissue cultureObjective African Violet의 줄기를 잘라 화분에 꽂고 그로부터 완전한 개체를 얻 는다. African Violet 잎을 자른 후, 잘려진 잎에서 callus를 유도하고, 그로부터 완 전한 개체를 얻는다.Materials : African violet, 실험용 가위, blade, 화분, 흙, 물, 70% Ethanol, 70% Clorox, Tween 20, DW, VC배지, VR배지, 클린벤치, 휴지, 필터페이퍼, 알코올램프, 100% Ethanol, 핀셋, 쿠킹호일, wrap, 네임펜, 라이터Methods① 흙에 물을 넣어주고 화분에 흙을 담는다.② 실험용 가위를 이용하여 바이올렛의 줄기를 자른다.③ 블레이드를 이용하여 줄기를 사선으로 다시 한 번 잘라준다.화분에 꽂아준다.① 실험용 가위를 이용하여 바이올렛의 줄기를 자른다.② 비커에 담아 물로 세척하고, 70% Ethanol로 10초간 세척한다.70% Clorox와 Tween 20 2방울을 넣고 10분간 흔들어서 세척한다.④ 클린벤치에서 증류수를 이용해 5회 헹구어준 후, 필터페이퍼 위에서 바이올렛을 말려준다.블레이드를 이용하여 잎의 테두리를 잘라주고, 잎의 절편을 적당한 크기로 자 른다.⑥ 자른 바이올렛의 절편을 VC배지에 치상한다.⑦ 캘러스가 유도되면 VR배지에 치상한다.,⑧ 절편에서 잎이 regeneration되면 HMS배지에 치상한다.⑨ 뿌리가 자라나면 순화시킨다.6.Results3월 10일처음 화분에 바이올렛을 심었다.5월 8일바이올렛의 흙을 덜어주고, 너무 깊 게 심은 것 같아 흙을 덜어내 주었더니 새싹이 나는 것을 볼 수 있었 다.5월 14일싹이3개나온 것을 볼 수 있다.5월 25일잎 4개가 좀 더 커졌다.6월 2일기존에 있던 잎 4개가 크게 자랐으 며, 왼쪽에 있는 잎의 줄기에 잎이 자 라나고 있다.6월 10일사진상으로는 보이지 않지만 5월 25 일에 표시했던 싹은 여전히 자라지 않 고 있다.3월 24일바이올렛의 잎을 잘라 각각의 절편을 치상하였다.배양실 에어컨의 문제로 모두 까맣게 변해 죽어버렸다.4월 21일4월 9일에 새로 치상한 바이올렛은 크기가 작아서 검게 변해 죽어버렸다.4월 7일에 치상한 바이올렛은 크기가 좀더컸다.이중에서 끝까지 결과를 도출시킨 가 운데에 표시한 절편을 중심으로 관찰을 시작하였다.5월 7일바이올렛의 절단면에서 캘러스가 유 도되기 시작하였다. 캘러스가 많이 나 왔기 때문에 VR배지로 옮겨주었다.5월 19일캘러스가 유도된 절단면이 아닌 잎의 표면에서 하얗게 무언가가 돋아나기 시 작했다.5월 22일초점이 안 맞아서 잘 안보이지만 5월 19일 사진에서 보였던 하얀색의 부분이 초록색으로 변하였다.6월 2일5월 26일에 약간 초록색이었던 부분들이 전부 잎으로 변하였다. 큰 바이올렛절편체를 잎이 돋아난 집락을 중심으로작은 절편으로 잘라주었다.첫번째로실험을진행해서5월26일의 사진이 누락되었다.6월 2일에 잎들이 많이 나왔으며 새로나온잎의밑부분을제외한기존의절편체를잘라주었으며,잎이많이자라서배지의바닥을이용하여배지를높여주었다.6월 9일6월 2일에 비해 잎이 선명하게 초록빛 을 나타냈다. HMS배지에 옮겨주었다.6월 16일실험 종료Discussion실험으로 진행한 쌍자엽의 아프리칸 바이올렛은 다 자란 바이올렛 중 잎이 작지 않고 색이 선명한 것의 줄기를 가위로 자른 후 blade로 비스듬히 다시 잘랐 다. 바이올렛의 새 뿌리는 절단면에서부터 성장하기 때문에 성장하는 절단면이 넓어야 뿌리를 내리고 새로운 잎을 얻는데 더욱 유리하다.그 이후 줄기를 흙에 꽂고 주변의 흙을 눌러줌으로써 바이올렛을 흙에 고정시 킨다. 약 4주 후에 잎을 만져보았을 때 아직 무른 느낌이 없고, 색도 처음과 마찬 가지로 선명하며, 살짝 잎을 빼보았을 때 흙에 단단히 고정되어 있는 것으로 보 아 눈으로 확인할 수는 없지만 절단면에서부터 뿌리가 나온 것을 짐작할 수 있었 다.4월 말에서 5월 초 사이에 대부분의 사람들이 잎이 나오기 시작했을 때, 잎이 나오지 않았던 이유는 첫째로 처음 줄기를 꽂을 때 깊게 꽂은 것이 원인이라고 생각된다. 화분의 흙을 전체적으로 1cm가량 파보았는데 줄기와 가까운 부분에서 새로운 잎이 나오는 것을 볼 수 있었다. 둘째로, 바이올렛을 거실 베란다에 위치 해두었는데, 베란다가 동쪽이기 때문에 해가 뜨고 나서부터 약 4시간 가량밖에 햇빛을 보지 못해 성장에 영향을 끼친 것 같다.처음 2개월동안은 물을 약 10일~2주 간격으로 주었는데, 잎이 새로 나온 이후에는 5일~1주일 간격으로 물을 주었다. 잎이 처음이 나오기 시작한 이후부터는 새로운 잎들이 많이 자랐으며, 기존의 잎도 빠른 속도로 자랐다. 하지만 시간이 지난 이후에는 아랫부분에서 자라는 새싹들이 느린 속도로 생장했는데, 그 이유 는 기존의 자란 잎들이 새로 자라나는 잎의 위쪽에 있기 때문에 빛을 차단하는 역할을 한 것이 가장 큰 원인이라고 생각한다.African violet에서 쓰인 조직배양은 seed를 가지고 callus를 유도했던 벼와 당근 과는 달리 기관에서 callus를 유도하여 완전한 생물체를 얻는 organogenesis이다. violet의 잎을 자를 때에는 가운데 큰 잎맥을 따라 잎을 자른다. 그 이유는 가장 큰 잎맥에는 형성층을 포함하고 있어서 식물이 생장하는데 영향을 끼치기 때문에 callus 또한 잘 유도되기 때문이다. 처음 바이올렛은 배양실 에어컨이 망가져서 모두 까맣게 변해 죽었다. 모든 식물은 성장할 때 최적조건을 유지하지 않으면 스트레스를 받는데 이 중에서는 온도나 바람, 독소, 산도, 해충 등 여러 요인이 작용한다. 특히 African violet은 25℃가 최적의 생육온도이다.식물의 스트레스를 고려하여 African violet을 추가로 진행하였을 때, 식물의 스 트레스를 고려하여 잎을 크게 자른 것도 있었고, 잎을 작게 자른 것도 있었다. 잎 을 작게 자른 것은 앞서 진행한 실험과 마찬가지로 영양분을 흡수할 수 있는 면 적이 작기 때문에 금방 까맣게 변하고 callus도 전혀 유도되지 않았지만, 잎을 크 게 자른 것은 callus도 유도되었고 다음 실험도 진행할 수 있었다. 따라서 큰 상 처나 자른 잎의 크기가 너무 작은 경우도 식물이 자라는데 악영향을 끼칠 수 있 다는것을알수있다.callus는 절단면에서 가장 많이 유도되었으며, 가운데 큰 잎맥을 따라 절단한 부위에서 가장 먼저, 가장 많은 callus가 유도된 것을 알 수 있다. 그 이후에 절단 면이 아닌 잎의 표면부분에서 하얗고 작은 알갱이가 돋아나고 초록색의 빛을 띄 기 시작했다. callus에서 뿌리와 잎이 자라나온 벼와는 달리 바이올렛은 잎만 자라 나는 것을 볼 수 있었다. 잎은 초기에는 callus와 비슷한 하얀색을 띄고 있었지만 시간이 지날수록 광합성을 위해 초록색으로 변하는 것을 볼 수 있었다. (이는 화 분에서 잎이 자랄 때와 유사한 변화를 가진다.)잎이 돋아나기 시작하면 기존의 커다란 절편을 또다시 잘라주는데 이 때 까만부분이나 callus 부분을 제거해준다. 이는 잎의 생장을 촉진시키기 위함이다. 실제 로 주변의 callus나 죽은 세포 부분을 떼어내 준 후, 눈에 띄게 잎의 개수가 많아 지고 크기도 커지는 것을 관찰할 수 있었다.잎이 어느 정도 집락을 형성하여 자라면 기존의 불필요한 절편을 잘라 HMS배 지에 치상해준다. 잘라 줄 때에는 표면적을 최대로 하기 위해 기존의 절편을 사 선으로 자른다. 이는 배지에 치상하는데 용이하기도 하고, 바이올렛이 배지와 닿 는 표면적을 최대로 해준다.8.Reference Hyperlink "http://terms.naver.com/" http://terms.naver.com네이버 지식백과 세인트폴리아[African violet]

자연과학| 2021.10.22| 9페이지| 1,500원| 조회(244)

식물조직배양, 실험레포트, 식물조직배양실험, 식조배, 바이올렛배양

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식물조직배양 당근 (홍심 5촌) 레포트

Name :Title : Carrot tissue cultureObjective : seed를 발아하여 hypocotyl을 얻은 후, hypocotyl을 이용하여 callus를 유도해내고 그로부터 완전한 개체를 얻는다.Materials : 홍심5촌, blade, 화분, 흙, 물, 비커, 70% Ethanol, 70% Clorox, Tween 20, DW, HMS배지, CC배지, 클린벤치, 휴지, 필터페이퍼, 알코올램프, 100% Ethanol, 핀셋, 쿠킹호일, wrap, 네임펜, 라이터Methods① Seed를 물로 세척하고, 70% Ethanol로 10초간 세척한다.② 70% Clorox와 Tween 20 2방울을 넣고 10분간 흔들어서 세척한다.③ 클린벤치에서 증류수를 이용해 5회 헹구어준 후, 필터페이퍼 위에서 seed를 말려준다.④ Seed를 HMS배지에 치상한다.⑤ Hypocotyl부분을 잘라 CC배지에 치상하여 callus를 유도한다.⑥ 캘러스가 유도되고 잎이 자라나면 HMS배지에 옮겨준다.⑦ 뿌리가 유도되면 순화시킨다.ResultsHMS배지에 당근 씨를 치상하였다.3월 24일Hypocotyl 부분을 잘라서 CC배지에 치상하였다.4월 21일지난 번에 치상한 hypocotyl의 길이 가 너무 길어서 잘라주고 다시 치상 하였다.지난 번과는 달리 hypocotyl 부분의 양쪽 끝이 두툼해지고, 전체적으로 통 통해진 것을 볼 수 있다.5월 7일캘러스가 많이 자란 것을 눈으로 확 인할 수 있었으며, 두껍고 커진 캘러 스를 위주로 MS배지에 치상하였으며, 빛을 보기 시작했다.5월 19일캘러스의 크기가 이전과는 달리 많 이 커진 것을 볼 수 있다.5월 26일크게 자라난 캘러스를 중심으로 초 록색이 보이기 시작했으며, 하나의 덩 어리처럼 보이던 캘러스에서 돌기처 럼 길게 자라난 것들이 하나씩 보이 기 시작했다.6월 2일캘러스에서 분화된 당근들이 보이기 시작했으며, 각각의 캘러스를 개별적으로분리하여 치상하였다.6월 9일6월 16일캘러스를 더 잘게 분리하여 치상하였 다.실험 종료Discussion당근은 쌍자엽 식물로 곧게 뻗은 원뿌리의 일부가 비대해지는 뿌리채소 중에 하나이다. 처음 당근은 HMS배지에 치상하였다. 이 배지는 MS배지에서 MS salt를 절반만 첨가한 배지이다. MS배지는 식물조직이나 원형질체등의 배양에 사용하고 있는 범용 완전합성배지이다. 이 배지에는 무기질소원인 NH3NO3와 KNO3가 다 량 존재하여 식물에게 필요한 질소 농도가 높은 것이 특징이다. 기본적으로 조직배양에 사용했던 모든 배지들은 MS salt가 첨가되어 있으며, 거기에 더하여 식물 생장 조절제 등을 첨가하여 캘러스를 유도하고나 조직의 분열을 촉진시키도록 배 지를 조성한 것이다. 실제로 생장조절제의 옥신은 줄기 끝 생장점에서 분비되어 뿌리쪽으로 이동하고, 사이토키닌은 뿌리 끝 생장점에서 분비되어 줄기 쪽으로 이동하기 때문에 각각 유도를 원하는 부위에 알맞게 생장조절제를 첨가해주어야 한다.처음 당근을 치상하였을 때, 1주일만에 거의 모든 씨앗에서 뿌리가 발아하였지 만, 3주가 지나도록 발아를 하지 않는 씨앗들이 몇 개 존재했다. 이는 발아율의 차이 때문이다. 발아율이란 파종된 종자수에 대한 발아종자수의 비율이다. 이를 통해 내가 배양한 홍심5촌의 발아율은 14/20으로 70%이다. 당근의 발아율에 영 향을 끼치는 요인으로 종자의 수명을 생각할 수 있다. 보통 당근종자의 수명은 15개월 정도로, 그 기간이 지나면 발아력이 급격히 떨어진다. 때문에 내가 쓴 당 근 종자가 오래되었거나, 수명이 평균적인 당근보다 더 짧은 seed를 사용한 것 일수도 있다.당근은 벼처럼 씨앗을 발아시켜 캘러스를 얻는다. 하지만 벼는 seed에서 뿌리 와 함께 callus를 얻을 수 있는 반면에 당근은 seed를 발아시킨 뒤 hypocotyl을 이용하여 callus를 유도시켰다. hypocotyl에서 얻어진 callus는 솜처럼 계속해서 커지고, 나중에는 하나의 개체로 완전히 분리된다. 때문에 callus의 크기가 개체 의 총 수에 영향을 끼친다. 때문에 callus를 더 오래, 많이 유도할수록 개체의 총 생산이 증가하게 된다. 또한, 이번 실험에서도 마찬가지로너무 작은 callus는 다른 일반적인 캘러스와 다르게 하나 의 덩어리를 형성해서 단 하나의 개체로 분화하는 것으로 보아 처음에 자른 hypocotyl의 크기 또한 개체의 수에 영 향을 끼치는 것으로 알 수 있다.Callus는 초록색 빛을 띄는 것도 있었고, 위의 사진과 같이 빨간 빛을 띄는 것 이 있었다. 처음에는 빨간 빛을 띄는 것이 오염에 의한 결과물이라고 생각했지만, 차차 다른 callus들에서 regeneration이 일어나는 것을 통해 홍심5촌의 특성이라 고 결론지을 수 있었다.우리가 hypocotyl로 진행했던 실험 말고도 당근 조직배양의 다른 대표적인 방 법이 있다. 당근의 저장뿌리의 형성층에서 세포를 분리하고 이를 영양배지에서 배양하면 캘러스가 유도된다. 유도된 캘러스에서 배를 분화시켜 완전한 식물체를 얻는 방법도 있다.Reference Hyperlink "http://terms.naver.com/entry.nhn?docId=2691516&cid=42411&categoryId=42411" http://terms.naver.com/네이버 지식백과 : 무라시게-스쿠그 배지, 발아율, 생명 공학 기술 Hyperlink "http://www.greenjn.com/02/0112.php?ccode=47" http://www.greenjn.com/전라남도친환경농업관 – 유기농업 실천기술, 당근

자연과학| 2021.10.22| 6페이지| 1,500원| 조회(284)

식물조직배양, 실험레포트, 당근배양, 식물조직배양실험, 식조배

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대학생물학및실험 - 아가로스 젤 만들기와 전기영동(PCR) 레포트

1. Title: Polymerase chain reaction에 의한 DNA절편의 증폭 및 DNA 전기영동. 2. Date: 2014.06.05 3. Purpose: PCR의 원리를 이해하고 실제로 DNA의 절편을 증폭하여 본다. 또한 전기영동의 의미를 이해하고 DNA의 크기 및 구조에 따른 결과차이를 이해한다. 4. Materials: Template DNA, Taq polymerase, dNTP, primer (front, reverse), 10X reaction buffer, DW, PCR machine, tip, micropipette, microtube, PCR product ,6X loading dye, electrophoresis machine, 1% agarose gel 5. Methods DNA 및 다른 시료들을 아래 표의 농도로 준비한다. 시료들은 DW, buffer, DNA, Taq polymerase 순으로 섞는다. 아래의 반응 조건에서 PCR을 수행한다. template 100pg-100ng (50ng) 2X PCR redy mix primer front 100pmole primer reverse 100 pmole DW 50μl reaction 1 25 1 1 22 Reaction 조건 95° 2min initial denaturation. 95° 10sec second denaturation. 55° 5sec annealing 30 cycle. 72° 1min/kb polymerization. 72° 20min 4° extension. 1. Title: Agarose gel 만들기 및 DNA electrophoresis 2. Date: 2014.06.12 3. Purpose: 전기영동의 의미를 이해하고 DNA의 크기 및 구조에 따른 결과차이를 이해한다. Agarose gel에 DNA와 loading dye를 넣고 전기를 걸어주면 DNA는 인산기 때문에 매질을 타고 양전하 방향으로 움직이게 된다. 이때 움직이는 속도는 DNA의 크기에 다라 다르므로 매질 내에서 종류에 따라 분리하게 되며 전기영동은 DNA의 크기에 따른 분리를 한다. 4. Materials: PCR product ,6X dye, TAE buffer, micro pipette, tip, tank, agarose, EtBr, steriler, magnetic bar, 플라스크, DW, 1X TAE buffer, size marker. 5. Methods: < Agarose gel 만들기 > 1× TAE 용액으로 희석하여 40ml에 0.4g을 섞어서 1%로 만든다. 전자레인지를 사용하여 열을 가해서 완전 용해 시킨다. 약간 식으면 1mg/ml EtBr 40ul를 넣어준다 바가 끼워진 틀에 부어준다. 완전하게 굳으면 틀에서 떼어내고 1× TAE 용액에 담궈 보관한다. < Electrophoresis > well의 가장 왼편에 loading DNA ladder를 주입한다. 증폭된 DNA에 10X loading dye를 섞어준다 전기를 100mV를 걸어준 후 25분 정도 기다린다. DNA를 확인한다. 7. Result: 8. Discussion: 마지막 실험으로 진행한 실험은 중합효소연쇄반응인 PCR 실험이다. 2주에 걸쳐 실험을 진행하였다. 14주차에는 전기영동에 필요한 시료들을 Microtube에 준비하고, 15주차에는 14주차에 준비한 시료들을 이용해 전기영동을 진행하였다. 14주차에 Microtube에 넣은 시료들의 역할을 살펴보면, Template DNA는 증폭시키고자 하는 DNA의 주형가닥이다. Primer는 Template DNA 가운데 선택적으로 증폭시키고자 하는 target DNA의 일부분의 상보적인 약 20bp (base pair) 내외의 짧은 Oligonucleotide이다. dNTP는 유전자 합성의 재료가 되는 Nucleotide이다. Taq polymerase는 열에 강한 유전자 합성효소로 뜨거운 환경에서 살아가는 Themus aquaticus로부터 정제하여 열에 강한 성질이 있다. 이는 유전자를 합성하며 94℃까지 열을 가하는 PCR과정에서도 효소로서의 기능을 가진다. PCR reaction buffer는 PCR이 효율적으로 일어나도록 최적의 환경을 제공한다 즉, 효소를 활성화시키고, 활성화된 효소를 안정화시키며, 비특이적 결합을 막는 역할을 수행한다. 총 시료의 양을 20λ로 맞추기 위해 Taq polymerase 4λ, dNTP 4λ, DNA template 1λ, Primer 2λ, reaction buffer 2λ씩 섞었다. 이 때 우리 조는 파이펫 사용법이 익숙하지 않아 정량적으로 시료들을 넣는데 어려움이 있었다. 파이펫을 사용할 때에는 상단의 조절나사를 이용하여 파이펫 내부의 기압을 조절하면 파이펫을 이용하여 취하는 부피의 범위가 조절되는 것이다. 마이크로파이펫은 내부에 스프링이 있어 취하려는 부피의 폭을 크게 바꾸면 망가질 위험이 증가하며, 최대 부피에 가까울 때 오차가 가장 작다. 이때 파이펫의 검은색 눈금은 1㎕, 10㎕의 단위이고, 빨간 눈금은 0.1㎕의 단위이다. → 4λ, 7λ 의 부피를 취할 때의 파이펫 눈금 용액을 섞는 과정에서 용액이 Microtube 옆면에 붙어 잘 움직이지 않으면 Microtube를 가볍게 두드려 섞어준다. 이 때 튜브의 밑부분을 잡고 두드리면 사람의 체온으로 인해 용액의 온도가 변할 가능성이 있기 때문에 튜브의 윗부분을 잡고 두드려 섞어주어야 한다. 15주차에는 준비된 시료를 이용하여 전기영동을 진행하였다. 미리 준비된 아가로스 겔을 이용했기 때문에 아가로스 겔을 만드는 과정은 생략했다. 아가로스 겔을 만드는 법은 삼각플라스크에 희석된 TAE buffer를 넣고, 아가로스 분말을 넣어준 후 전자레인지를 이용하여 잘 녹여준다. 이 용액을 준비된 틀에 넣고 부어준 후, Well을 이용하여 홈을 만들어준다. 전기영동에 아가로스 겔을 이용하는 이유는 아가로스 겔이 다공성 물질이기 때문에 작은 DNA절편이 빨리 끌려가게 된다. 이 때 우리는 TAE buffer를 사용했는데, 이는 12kb이상의 DNA 조각을 전기영동할 때 이용한다. TBE buffer는 buttering capacity가 좋기 때문에 오랜 시간 전기영동을 진행할 수 있어서 1kb이상의 DNA 조각을 전기영동할 때 이용한다. 아가로스 겔을 준비한 이후 14주차에서 준비한 시료에 dye를 넣어주는 이유는 두가지가 있다. 첫번째로, DNA loading시에 가벼운 DNA조각이 buffer 위로 뜨는 경우를 막기 위해 고분자 물질을 첨가하여 시료를 무겁게 하는 역할을 한다. 두번째로, 전기영동된 DNA를 육안으로 확인하기 위함이다. 이 dye에는 EtBr이라는 시약이 포함되어 있다. 이는 UV등을 비추면 빛을 발하는 형광성화학물질로 DNA의 이중 나선 구조에 끼어들어 DNA의 존재와 위치를 시각적으로 확인할 수 있게 해준다. 전기영동은 인산기를 가진 DNA에 전하를 걸어주면 양전하 쪽으로 이동하는 원리를 이용한 것이다. 25분에 걸쳐 진행한 전기영동에서 DNA의 염기쌍의 개수를 짐작할 수 있다. 결과가 위의 사진과 같을 때, 전기영동에 사용한 DNA marker의 100과 200사이에 나타난다. 따라서 실험에 사용한 template DNA는 100~200개의 염기쌍을 가진다. 실험에서는 같은 DNA 주형가닥을 사용했기 때문에 결과가 모두 동일하게 도출된 것을 알 수 있다. 9. Projects: PCR의 원리에 대해서 설명하시오. PCR이란 중합효소 연쇄반응으로 시험관 안에서 짧은 DNA 부위를 여러 번 복사함으로써 복제과정을 자동화 한 것으로 DNA를 증폭시키는 방법이다. PCR반응 혼합물에는 주형으로 작용하는 이중가닥 DNA시료, DNA 프라이머, 네 종류의 dNTP, 고온에서 파괴되지 않는 DNA 중합효소, pH를 유지해주는 염과 완충액이 필요하다. PCR의 첫 단계는 DNA를 주형의 두 가닥을 단일 가닥으로 분리하기 위해 끓는점에 가까운 온도로 반응물을 가열한다. 그 후 반응물의 온도를 낮춰 프라이머가 주형가닥에 결합하게 만든다. 마지막으로 DNA중합효소가 새로운 상보가닥의 합성을 촉매 할 수 있도록 최적의 온도로 반응물의 온도를 올려준다. 이러한 과정을 통해 DNA 서열의 사본 수를 지수적으로 증가할 수 있다. DNA 전기영동의 원리와 특성에 대해서 조사하세요. ‘DNA 전기영동’이란 DNA절편을 읽을 수 있는 형태로 만드는 방법으로 시료를 부드러운 아가로스 겔의 홈에 넣고 전기를 흘려 보내는 것이다. 수소 이온 농도가 중성일 때 DNA는 인산기에 의해 음전하는 띄므로 DNA는 (+)극 쪽으로 끌려가게 된다. 이동 속도는 기본적으로 절편의 크기에 좌우된다. 큰 절편일수록 천천히 이동하여 젤의 꼭대기 부분에 위치하는 반면에 작은 절편들은 보다 빨리 이동하여 홈으로부터 먼 곳에 자리 잡게 된다. DNA절편의 위치는 젤 속에 있는 DNA를 염색하여 확인한다. EtBr의 역할과 특징에 대하여 조사하시오 EtBr은 삽입성 물질 중에 하나로 DNA를 염색하기 위한 물질이다. 삽입성 물질(intercalating agent)은 화학적 돌연변이원으로 격자이동 돌연변이를 증가시킨다. 이 물질은 UV등을 비추면 빛을 발하는 형광성화학물질이기 때문에 전기영동 실험에서 DNA의 이중 나선 구조에 끼어들어 DNA의 존재와 위치를 시각적으로 확인할 수 있게 해준다. 10. Reference 생명: 생물의 과학/ David Sadava, David Hills, Crag Heller, May Berenbaum/2012/라이프사이언스/286,287page 미생물학/Eugene W. Nester, Denise G. Anderson, C. Evans Robert Jr, Martha T. Nerster/2008/지코사이언스/217page 미생물학 길라잡이/Kathleen Park Talaro/2009/라이프사이언스/312page

자연과학| 2021.10.22| 7페이지| 1,000원| 조회(283)

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