1번 문항) 고등학교 재학 기간 중 학업에 기울인 노력과 학습 경험에 대해, 배우고 느낀 점을 중심으로 기술해 주시기 바랍니다. (1,000자 이내, 띄어쓰기 포함)새로운언어를 배우는 것은 늘 신선한 자극이 되었고 도전 의욕을 불러 일으켰습니다. 스페인어를 처음 배울 때 영어나 불어와 유사한 어휘와 연관지어 이해하는 과정이 새롭고 즐거웠습니다. 하지만 스페인어는 시제가 다양하고 형태도 자유롭게 변형되기 때문에 어려움이 많았습니다. 과거 시제는 imperfect 등이 있는데 언제 어떤 것을 사용해야 하는지 쉽게 구분할 수 없었습니다. 저는 인터넷에서 스페인어 문법 문제들을 찾아 반복 연습하고 혼자 힘으로 되지 않는 것은 선생님께 여쭤보며 해결해나갔습니다. 동사 끝의 형태에 따라 변형이 일어나는 불규칙동사들을 익히는 것도 문제였습니다. 가장 어려웠던 동사는 hacer 였는데 이런 경우에는 직접 발음해보며 소리로 연상되는 단어와 관련시켜 공부했습니다. 예컨대 hacer 미래 1 인칭 변형은 hare인데 우리말 발음 ‘아래'와 연관시키니 쉽게 기억할 수 있었고, 이런 학습법으로 문법적 난관을 극복하며 성취감을 느꼈습니다.이전 학교에서 알게 된 멕시코 친구와 함께 멕시코 여행을 떠나 낯선 문화를 접할 기회가 있었습니다. 처음 보는 신전에 올라보고 xochimilco라는 이상한 배도 타며 독특한 요리도 맛보았지만, 무엇보다 사람들 말이 저에게 외계어처럼 낯설고 어색했습니다. 하지만 사람들은 자연스럽게 말을 주고받으며 생각과 감정을 교류하고 삶을 이어가고 있었습니다. 언어에는 그들만의 생활과 문화가 그대로 녹아있다는 것을 깨닫고 된 순간이었습니다. 이 언어적 경험을 학교로 돌아와 에세이로 써서 발표하며 언어 공부의 의미를 다시 생각하게 되었습니다. 국제화 시대에 언어의 중요성은 알고 있었지만 언어는 의사전달 도구에 그치지 않고 서로의 문화와 삶을 이해하고 소통하여 세계시민의식을 갖게 한다는 것을 알게 되었습니다. 언어 공부 역시 문법을 공부하는 것이 아니라 삶을 공부하는 것임을 깨달았습니다. 언어를 통해 새로운 것에 도전하여 성취하는 보람을 느끼며 세계에 대한 안목을 넓히고 저의 가능성을 실현할 수 있다는 확신도 갖게 되었습니다. (999)2번 문항) 고등학교 재학 기간 중 본인이 의미를 두고 노력했던 교내 활동을 배우고 느낀 점을 중심으로 3개 이내로 기술해 주시기 바랍니다. 단, 교외 활동 중 학교장의 허락을 받고 참여한 활동은 포함됩니다. (1,500자 이내, 띄어쓰기 포함)PE 수업 중 농구를 처음 접했을 때 무척 어색하고 서툴렀습니다. 한국에서는 육상 계주 대표로 활약하며 기대를 한 몸에 받았기에 이 새로운 종목은 저의 오기를 불러일으켰습니다. 저는 곧바로 농구팀에 가입했고 코치와 친구들로부터 온갖 질책과 조언을 들으며 훈련을 거듭했습니다. 기초부터 고급 기술 익히기까지 오랜 시간과 끊임없는 노력이 필요했지만 점차 농구 선수로서 자부심과 애정을 갖게 되었습니다. 팀 스포츠라는 특유의 매력은 고등학생이 되어서도 농구를 지속하게 해주었습니다. 5년의 시즌 동안 기억에 남는 것은 외국인학교와의 KAIAC 토너먼트 경기였습니다. 특히 우리보다 높은 디비전에 소속된 학교와의 경기는 잊을 수 없습니다. 모두 미국인으로 구성된 그 팀은 우리보다 키와 체격에서 훨씬 앞섰고 우리 팀은 기가 죽은 어린 양 같았습니다. 하지만 초반에 상대팀이 우리를 얕잡아보는 행동들을 하였고 이에 자극받은 우리는 곧 적극적이고 거칠게 변해서 마지막까지 전력을 다해 싸웠습니다. 경기에 몰입하여 최선을 다한 결과 우리 팀은 22점을 얻을 수 있었고 그 중 제가 13점을 획득하며 팀내 최고 득점을 기록했습니다. 다른 경기보다 훨씬 치열한 그 경기에서 비록 승리는 못했지만 강팀을 상대로 끝까지 포기하지 않았고 그 열정적인 경기를 제가 주도했다는 사실이 너무나 자랑스럽고 기뻤습니다. 한국에서는 개인적 기량을 마음껏 발휘했던 종목에만 참가했지만 농구는 여럿이 함께하는 팀 스포츠라서 의사소통이 중요했고 이를 통해 동료, 후배들과의 끈끈한 유대감과 협동심을 가지게되었습니다. 또 팀 내에서 캡틴을 하며 책임감을 갖게 되었고 강한 승부욕과 좌절하지 않는 끈기도 기를 수 있었으며 팀원들 모두를 챙기며 좋은 분위기를 만드는 역할을 하였습니다. 더불어 매 경기를 승리로 이끌기 위해 주도적으로 노력하면서 리더십과 자존감을 높이며 내적 성장을 기할 수 있었습니다.10학년 때 친구들과 함께 유기묘 봉사활동에 참여하게 되었습니다. 사실 고양이를 직접 대하는 것은 처음이어서 약간 걱정이 되었습니다. 겉으로 보기에는 귀여운 모습이어서 쉽고 간단한 봉사활동이라고 생각했는데 막상 방에 들어가서 손을 내밀고 불러도 고양이들은 저를 거부하며 외면했습니다. 저는 당황했고 더 이상 아무 것도 할 수 없었습니다. 하지만 사람으로부터 버림받은 후유증 때문에 예민하고 경계심이 많다는 설명을 듣고 나서 고양이들의 처지와 상황을 이해하게 되었습니다. 그 후 매주 고양이들을 찾아 저부터 마음을 열고 정성을 다하니 어느새 고양이들이 조금씩 다가오기 시작했습니다. 이토록 따스한 생명체를 물건 취급하며 쉽게 유기하는 무책임한 사람들이 원망스러웠습니다. 그러면서 어릴 때 귀여운 강아지를 보고 무조건 사 달라고 떼를 쓰던 제 자신이 떠오르며, 동물들과 함께하는 것은 무거운 책임감이 따르는 일임을 새삼 깨닫게 되었습니다. 가볍고 수월한 봉사로 생각했던 안일함을 반성하며, 고양이만이 아니라 상처받고 힘없는 사회적 약자들에 대한 마음가짐과, 모든 생명은 그 자체로 귀한 존재임을 절감한 활동이었습니다. (1499)3번 문항) 학교생활 중 배려, 나눔, 협력, 갈등 관리 등을 실천한 사례를 들고, 그 과정을 통해 배우고 느낀 점을 기술해 주시기 바랍니다. (1,000자 이내, 띄어쓰기 포함)10학년 때 학업이 부족한 친구들을 위해 튜터링 봉사활동을 했습니다. 낯을 가려 말을 잘 하지 않는 어린 친구가 있었는데 경험이 별로 없던 저는 무척 난감했습니다. 하지만 함께 색칠공부를 하며 제 얘기부터 시작했고 부담없이 질문해서 조금씩 대화를 할 수 있었습니다. 표정이 전보다 밝아진 친구와 함께하는 시간도 많아지면서 서로 친밀감을 느끼며 이후 수업을 즐겁게 이어갈 수 있었습니다. 자신감을 얻은 저는 수학반 친구들을 설득해 방과 후 수학 튜터링 클럽을 만들었습니다. 2년 간 학우들의 학업을 앞장서 도우면서 폭넓게 교류하며 우의도 쌓았지만 무엇보다 저의 학업에 큰 발전을 가져오게 되었습니다. 가르치다 보니 제가 모르던 부분을 인지 하게 되어 학습 내용을 완벽하게 준비해야 했기 때문입니다. 이처럼 학습이 어려운 이를 배려하며 함께 지식을 나누다보니 도움받은 것은 오히려 제 자신이었습니다. 학습 봉사는 시간을 빼앗기는 게 아니라 완전 학습을 도와 시간이 절약된다는 것과, 서로 가르치며 배우는 즐거움과 보람을 깨달은 뜻깊은 활동이었습니다.지역 어르신들과 함께하는 커뮤니티 오케스트라에 참여하게 되었습니다. 그분들과는 연주 실력 차이가 컸지만 기숙사 생활 탓에 시간이 적다는 핑계로 연습에 소홀했습니다. 처음엔 눈치껏 묻어갔지만 연습이 본격화되며 저의 실력이 드러나기 시작했습니다. 어느 날 지휘자님으로부터 더 노력해달라는 말씀을 듣게 되자 게을렀던 제 자신이 너무 부끄러웠습니다. 그때부터 학교 음악실에서 틈 날 때마다 연습했고, 합주 때는 용기 내어 옆 사람에게 질문해 가며 실력을 쌓기 위해 노력하여, 점차 호흡을 맞추며 연주할 수 있게 되었습니다. 그러면서 오케스트라에서 서로 다른 악기가 하나의 음악을 연주하기 위해서는 자신이 맡은 파트를 완벽하게 익혀야 하며 서로 한 마음이 되어야 좋은 음악이 탄생한다는 것을 알게 되었습니다. 나만 돋보이려 욕심내거나 소홀해서는 안 되며, 서로 협력하고 조화를 이루어야 관객들에게 감동적인 음악을 선사한다는 귀중한 교훈을 얻었습니다. (999)지원 전공을 선택한 이유와 자신의 목표를 이루기 위해 고교 재학 중 도전한 경험에 대해 구체적으로 기술하시오. (1000)캐나다 몬트리올 유학 때 프랑스어를 처음 접했습니다. 7학년부터 10학년까지 꾸준히 배우면서 조금씩 실력이 향상되었습니다. 그러다 프랑스어를 쓰는 학생들이 많은 학교로 전학하게 되었습니다. 프랑스어로 나누는 대화에 쉽게 끼지 못한 저는 소외감과 한계를 느꼈고 어학 공부에 온 힘을 쏟겠다고 결심하였습니다. 쓰기, 읽기에 비해 말하기와 듣기가 부족했던 저는 선생님의 추천으로 가수 Stromae의 노래들을 끊임없이 듣고 따라 부르며 회화 능력을 높이기 위해 노력했고 프랑스어로 표현된 인간의 감정까지 이해할 수 있었습니다. 또한 팀 과제로 어린 시절을 설명하는 가사를 직접 써서 trois direction이라는 그룹명으로 앨범 포스터와 뮤직 비디오를 만들고 노래로 불러 발표하면서 점차 프랑스어에 자신감을 갖게 되었습니다. 이를 통해 프랑스어권 문화를 즐기고 사랑하는 경험을 해볼 수 있었습니다.또한 퀘벡 역사를 배우면서 프랑스어가 퀘벡의 공식 언어가 되는 유래와 배경을 알게 되었습니다. 캐나다는 프랑스 탐험가에게 발견되며 프랑스 식민지가 되지만 Seven Years' War에서 영국에게 패배한 후 캐나다를 영국에게 넘겨줍니다. 영어는 자연스럽게 캐나다의 공식 언어가 되었지만, 퀘벡의 Francophone들은 프랑스 문화와 언어를 보존하기 위해 시위까지 하면서 언어를 지켜내려 노력하였고, 1969년에 프랑스어는 캐나다의 공식 언어가 되었습니다. 처음 프랑스어를 배울 때는 왜 캐나다의 두 번째 공식 언어가 되었는지 몰랐습니다. 하지만 퀘벡의 역사를 배운 뒤 프랑스어가 공식 언어가 되기까지 걸린 시간과 힘든 과정을 알고 나니 프랑스어와 그 영향에 대해 남다른 관심이 생겼습니다. 또한 프랑스의 유서 깊은 전통과 역사, 찬란한 문화 예술과 국제 사회에서의 위상에 대해서도 지적 안목을 넓히고 싶었습니다. 그런 점에서 적극적인 교환학생 제도와 프랑스어권 학생들과의 다양한 문화교류 활동을 제공하는 아주대를 통해 저의 소망을 이룰 수 있다고 생각하여 지원하게 되었습니다. (993)
고대 생명과학과해당 모집단위 지원 동기 및 졸업 후 진로와 계획을 기술하시오 1000가족사진을 보면서 인간은 왜 늙는지 의문을 갖게 되면서 세포노화에 관심을 갖고 Denham Harman이 제안한 ‘유리 라디칼 이론’에 대해 알아보았고, 데이비드 싱클레어 박사의 ‘노화의 종말’을 읽으며 아보카도와 브로콜리 등에 존재하는 NMN 물질이 미토콘드리아 질환 등을 억제해준다는 사실도 알게 되었습니다. 이를 바탕으로 식이 항산화제의 중요성을 이해하고 항산화제가 포함된 음식이 기름 산패에 미치는 영향에 대해 연구해보았습니다. 이 외에도 나무젓가락에 포함된 화학물질이 식물 성장에 미치는 영향, 다이어트 약이 지방 분해 효소에 주는 영향, PCR을 이용해 한국 해변에 거주하는 두 동물 종의 유사성 분석 연구를 했습니다. 다양한 탐구 활동을 바탕으로 자연과학 분야로 진로를 희망였으나 진학은 어문 계열로 하게 되었습니다. 그러나 진학 후 자연과학분야에 대한 열정과 관심은 더욱 더 확고해졌고 좋은 환경에서 교수님들께 지도받고 싶어 고려대학교 생명과학과로의 편입을 결심하게 되었습니다. 자연과학분야에 대한 관심과 열정으로 현재 전공 과목은 물론 화학과와 생물과학과의 전공 기초 과목들도 매 학기 수강하였고, 현재도 생물학 수업을 들으며 과학 지식을 쌓고 있고, 지난 2년 동안 전공 공부와 함께 생물학과와 화학과 수업도 열심히 한 덕분에 타 전공자임에도 수강과목마다 우수한 성적까지 받을 수 있었습니다. 또한, 생물학 수업을 통해 유전학뿐만 아니라 면역학, 동식물의 행동, 진화 등의 연구에도 유전자가 기초가 되는 것을 볼 수 있었습니다. 그래서 제 몸 안에서, 그리고 주위에서 일어나는 생명현상들의 이유에 대해 더 궁금증을 품게 되었고 이들을 자세히 이해하기 위해서 활성산소종 발생 수준 조절에 관여하는 단백질과 유전자를 찾아보는 연구를 더 하고 싶다는 생각을 하게 되었습니다. 고려대학교는 다른 대학교들에 비해서 생명과학에 관련된 다양한 학과들이 있었고 따라서, 생명과학 학문에 대한 스펙트럼다.본인의 가치관을 기술하고 그 가치관을 형성하는데 중요했던 경험과 성장과정을 기술하시오 1000나의 도움이 필요하다면, 부족하지만 나의 것을 나누고 베풀어주어야 한다고 생각합니다. 과거에 저는 낯선 환경에서 새로운 언어를 사용해야하는 상황으로 인해 적응하기 어려워했던 경험이 있습니다. 낯선 환경에서 사람들에게 먼저 도움을 요청하기도 매우 어려웠고 대부분의 사람들도 저를 도와주지 않았습니다. 하지만 한 친구는 제가 어려움에 처해있다는 사실을 먼저 알아차리고 스스럼없이 저를 도와주었습니다. 그 당시 친구의 작은 관심과 도움은 너무 소중하고 고마웠습니다. 평소 낯가림도 심하고, 새로운 사람들과의 적응도 쉽지 않았던 저는, 친구의 배려와 도움으로 새로운 환경에 적응할 수 있었고, 저 또한 어려운 상황에 놓인 사람들에게 먼저 손을 내밀어주는 사람이 되어가겠다고 다짐했습니다. 이런 다짐을 가지고 있던 저는 저처럼 새로운 환경에서 어려움을 겪고 있는 우리 학교에 다니고 있는 외국인 친구들을 도와주고 싶다는 생각을 하게 되었고, 학교에서 교환학생 친구들의 한국 생활과 학교 생활을 도와주는 국제학생 대사로 참여하였습니다. 국제학생대사로 활동하며 캠퍼스 안내도 해주었고, 친구들이 우리나라에서 가볼만한 관광지를 추천해주고, 친구들이 가보고 싶어했던 관광지도 함께 방문해 직접 우리나라 역사와 문화에 대해 설명해주기도 했습니다. 처음에는 외국인 친구들에게 도움을 주고 싶다는 생각으로 참여했는데, 다양한 나라에서 온 친구들을 통해 접해보지 못한 다른 나라의 문화도 배울 수 있었고 함께 소통하며 저의 언어실력까지 향상시킬 수 있었습니다. 이렇게 저는 저에게 내밀어준 친구의 작은 도움 덕분에 그리고 외국인 친구들과 함께한 다양한 봉사를 통해서 이제는 give and take가 아니라 도움이 필요한 모두에게 먼저 다가가 사람이 되었습니다. 우리 사회는 혼자 살아갈 수 없습니다. 따라서 서로를 도와주고 협력하며 함께 살아가야 한다고 생각합니다. 그래서 고려대학교에 편입하게 된다면 고려대학교장하고 싶습니다.학업이외 대학시절 중요한 활동과 결과를 기술하고 그 경험이 지원 전공을 공부하는데 어떤 의미를 갖는지 기술하시오1000중,고등학교 시절부터 다양한 봉사활동에 참여했습니다. 대학에 입학 후 봉사팀 봉사 단장으로 활동하며 함께 활동하는 부원들의 의견을 수용하며 봉사팀을 이끌어 나갈 수 있는 능력을 기를 수 있었고, 배움을 원하는 어르신들에게 영어를 가르쳐드리는 교육 봉사를 하면서 다양한 어르신들과 소통하며 겪고 계신 어려움을 이해하고 문제점에 대해 생각해 볼 수 있는 기회를 가질 수 있었습니다. 그 중 치매 진단을 받으신 어르신을 만나면서 저의 관심 분야인 세포노화와 이에 관련된 질병에 대해 더 관심을 갖게 되었습니다. 그 어르신은 치매로 인해 배운 내용을 잘 기억하지 못하셨고, 여러 번 반복 학습을 해도 오래 기억하는 데 어려움을 겪으셨습니다. 이 모습을 보며 알츠하이머병에 대해 더 알아보고 싶었던 저는 알츠하이머 세미나에 다녀오게 되었습니다. 연령, 성별, 인종이 apolipoprotein E 유전자형과 알츠하이머병의 연관성에 미치는 영향, 알츠하이머병 및 경미한 인지 장애에서 혈액의 산화 스트레스, 그리고 알츠하이머병과 후각의 관계 등에 대한 논문들을 읽어보고 설명을 들으며 더 자세하게 배울 수 있었습니다. 그리고 직접 뇌를 해부해보며 뇌의 위치와 뇌 위치에 따른 각각의 기능에 대해 알아보는 시간도 가졌습니다. 병증에 대한 정확한 원인과 치료 방법이 명확하지 않지만 세미나와 같은 활동을 통해 사람들에게 병에 대해 알려주고, 병증에 대해 적극적인 인식개선이 필요하다고 느꼈습니다. 또한, 최근에 미국에서 신경세포를 손상시키는 베타 아밀로이드 단백질을 제거하는 약물인 aducanumab이 개발되었다는 사실을 접하게 되었고 고려대학교 생명과학과에서 진행되었던 자식 작용에 관여하는 새로운 단백질 연구와 세포사멸을 억제하는 단백질 CIA의 발견에 대한 연구도 접하게 되었습니다.편입 하게 된다면 세포사멸을 연구하기 위해 세포 신호전달 연구가 우선적으로 다께 연구를 진행해보고 싶다는 목표를 가지게 되었습니다.입학 후 학습 목표 및 학업 계획을 기술하시오 1000저의 최종 목표는 제가 배우고 습득한 지식을 사람들에게 전달하고 가르쳐주는 것입니다. 이 목표를 이루기 위해 입학 후에 저의 관심 분야인 세포분자생물학과 세포신호전달학에 관련된 수업을 들으며 활성산소종과 세포노화에 관련된 지식을 쌓을 예정입니다. 그리고 이외에 제가 항상 관심을 갖던 분야인 식물생명과학에 대한 수업을 들으며 식물이 하는 광호흡, 호르몬에 의해서 조절되는 개화 등에 대해서도 연구해보고 싶습니다. 현재 재학중인 학교에서 생물학과와 화학과의 기초과학 과목을 이수하며 기본적인 부분에 대해 이론적으로 배웠지만 실제 실험으로 구현해본 경험이 많지 않습니다. 그래서 입학 후에는 기초 실험과목을 포함해 다양한 실험과 연구를 진행해보는 시간을 충분히 갖고 싶습니다. 따라서 생명의 다양한 분야에 대해 실험 수업을 제공하는 고려대학교의 커리큘럼이 저에게 필요한 부분을 충족시켜 줄 것이라 기대됩니다.또한, 산화 스트레스의 노출이 증가하면 항산화제 영양소 섭취가 필수라는 사실을 접하고 항산화제가 들어있는 양파, 당근 등과 같은 음식이 기름 산패를 막아주는지 알아보기 위해 실험을 했습니다. 실험을 통해 항산화제가 우리 인체에서 원치 않는 염증 반응을 억제하며 당뇨병, 암 등 다양한 만성질환의 억제에 영향을 준다는 사실을 알게 되었습니다. 이 경험을 바탕으로 인간세포 노화과정에서 활성산소종의 생성을 촉진하는 세포노화 메커니즘에 대해 연구와 세포 노화과정을 억제할 수 있는 천연 항산화에 대해서도 연구해보고 싶습니다. 그리고 기회가 된다면, 바이오시스템의과학부를 복수전공하여 생명과학부에서 배운 내용들을 연결시켜 유전 및 환경적 요인에 의한 유발인자를 찾고 그에 맞는 세포 치료제나 식품을 개발하며 인류의 질병을 예방하고 폭넓은 시야에서 연구하기 위해 SEP 프로그램에 참여해서 각국에서 온 친구들과 함께 공부도 하고 세포노화를 조절하는 전사인자를 발견한 연구 사례가 있는 해서 연구해보고 싶습니다.표현하지 못한 타인과 구별되는 본인의 강점을 기술 1000언어활동은 모든 분야에 기본이라고 생각합니다. 남들에 비해서 언어에 대한 관심과 재능이 있습니다. 또한, 다양한 언어와 문화를 접할 수 있는 환경에 자연스럽게 노출되어 있었기에 영어를 비롯해 불어와 스페인어 등 다양한 언어를 자유롭게 구사할 수 있는 능력을 가지고 있습니다. 이에 다양한 나라에서 발간된 원서를 쉽게 읽을 수 있고 관심이 있는 학문에 대한 여러 나라 연구진들의 논문을 통해 폭넓게 과학적 지식을 쌓을 수 있습니다. 또한, IB diploma 수료도 하였는데 이 과정을 통해서 자연과학 분야에 대한 관심과 학문에 대한 흥미를 가지게 되었고, 다양한 실험과 탐구 활동을 해 보았습니다. 그러나 대학을 진학하는 과정에서 희망하던 자연과학 분야 쪽으로 진학하지 못하였으나 자연과학 분야에 대한 관심과 열정은 해당 전공생들에 뒤지지 않습니다. 매 학기 생물학과와 화학과의 기초과목을 수강하였고, 모든 과목에서 우수한 성적도 받았습니다. 또한 자연과학 분야의 다양한 실험과 탐구생활을 하였습니다. 그 중에서도 소셜 미디어에서 쉽게 접할 수 있는 다이어트 약의 효과에 대해 알아보기 위해 ‘orlistat이 리파아제 활동에 미치는 영향'에 대한 탐구가 기억에 남습니다. 이를 통해 orlistat을 넣은 화학물은 통제 변인보다 중성지방을 지방산으로 덜 분해해서 pH가 더 적은 크기로 변화하는 것을 관찰할 수 있었습니다. 그리고 orlistat은 리파아제의 활성 부위에 공유 결합하는 경쟁적 저해제이기 때문에 일정수준에 도달하면 포화상태를 나타내는 것을 발견할 수 있었는데 그 일정 수준이 약의 권장량보다 적게 섭취해도 지방산의 흡수를 방지하는데 도움을 줄 수 있다는 결론을 내렸습니다. 다이어트 약은 끊임없이 개발되고 있고 대부분은 다량 영양소 흡수, 식욕, 체지방 및 체중을 줄이고 신진 대사 및 열 생성을 증가시키는 메커니즘을 촉진하는 제품들입니다. 기회가 된다면 췌장에서의 인슐린 방출을 증가시.
해당 모집 단위에 지원한 동기와 이를 위한 학업적 노력 600항산화제가 포함된 음식이 기름의 산패에 주는 영향, PCR을 이용해 한국 해변에 거주하는 두 가지 동물 종 유사성을 분석 등 다양한 연구를 진행해 보았습니다. 또한, 일본과 한국에서 키조개의 미토콘드리아 유전적 변화, 항산화제와 기능성 식품에 관련된 논문 등도 읽어보았습니다. 앞선 활동들을 바탕으로 자연과학 분야로의 진로를 희망하였지만, 대학 입학은 어문 계열로 진학 하게 되었습니다. 그러나 자연과학분야에 대한 관심과 열정으로 지난 2년 동안 현재 전공하는 전공 과목과 함께 화학과와 생물과학과의 전공 기초 과목들을 매 학기 수강하며 과학 지식을 쌓을 수 있었고, 타 전공자임에도 수강과목마다 우수한 성적까지 받을 수 있었습니다. 또한, 생물학 수업을 통해 유전학 뿐만 아니라 면역학, 동식물의 행동, 진화 등의 연구에도 유전자가 기초가 되는 것을 알게 되었고, 우리의 신체와 그리고, 주위에서 발생되는 생명현상들이 일어나는 이유들에 대해 더 궁금증을 품게 되었습니다. 그래서 이런 현상들을 자세히 이해하기 위해서 활성산소종 발생 수준 조절에 관여하는 단백질과 유전자를 찾아보았고, 관련 연구를 하고 싶다는 목표가 생겨서 연세대학교 생화학과에 지원하게 되었습니다.학업 이외 대학 시절 다양한 활동을 기술하고 그 경험이 지원하고자 하는 전공에 어떤 의미를 갖는지 기술 600중,고등학교 시절부터 다양한 봉사활동에 참여하였습니다. 대학 입학 후에도 봉사팀에서 봉사 단장으로 배움을 원하는 어르신들에게 영어를 가르쳐드리는 교육 봉사에 참여했습니다. 다양한 어르신들과 소통하며 겪고 계신 어려움을 이해하고 문제점에 대해 생각해볼 수 있는 기회를 가질 수 있었습니다. 그 중 치매 진단을 받으신 어르신을 만나면서 저의 관심분야에 대해 더 확신을 갖게 되었습니다. 그 어르신은 치매로 인해 배운 내용을 잘 기억하지 못하셨고, 여러 번 반복 학습을 하여도 오래 기억하는 데 어려움이 있으셨습니다. 그래서 알츠하이머 병에 대해 더 알아보고 싶어 알츠하이머 세미나에 다녀오게 되었고, 직접 뇌 해부 실험에 참여하며, 뇌의 위치와 기능에 대해 알아보는 시간도 가졌습니다. 최근에 미국에서 신경세포를 손상시키는 베타 아밀로이드 단백질을 제거하는 약물이 개발되었다는 사실을 접하게 되었습니다. 또한 연세대학교에서 파킨슨병, 알츠하이머 병 등에서의 자가소모 반응과 세포 자살 활성화 기전에 대한 구체적인 연구가 진행되고 있는 것을 알게 되었습니다. 기회가 된다면 자가소모 신호에 의한 세포 자살 활성화 기전과 이를 파킨슨 모델에 적용해서 연구해보고 싶습니다.본교 편입학 후 학업 계획 및 졸업 후 진로 계획을 기술 600저의 최종 목표는 제가 배우고 습득한 지식을 사람들에게 전달하고 가르쳐주는 것입니다. 이 목표를 이루기 위해서 입학 후에 저의 관심 분야인 분자생물학과 유전학 관련된 수업을 들으며 활성산소종과 세포노화에 관련된 지식을 쌓을 예정입니다. 그리고 이외에 제가 항상 관심을 갖던 분야인 식물분자생리학에 대한 수업도 들으며 식물이 하는 광호흡, 호르몬에 의해서 조절되는 개화 등에 대해서 연구해보고 싶습니다. 과거에 산화 스트레스의 노출이 증가하며 항산화제 영양소 섭취가 필수라는 사실을 접하게 되어, 항산화제가 들어있는 양파, 당근 등과 같은 음식이 기름의 부패를 막아주는지 궁금해 실험을 한 경험이 있습니다. 이 실험을 한 후에 항산화제가 우리 인체에서 원치 않는 염증 반응을 억제하며 당뇨병, 암 등 다양한 만성질환의 억제에 영향을 준다는 사실을 알게 되었고 연세대학교에서 인간세포 노화과정에서 활성산소종이 발생하는 새로운 메커니즘에 대해 연구한 사례를 보게 되었습니다. 지난 경험과 교수님들의 가르침을 받아 세포 노화과정을 억제할 수 있는 천연 항산화에 대해서 연구해보고 싶고, 활성산소증의 생성을 촉진하는 다른 세포노화 메커니즘에 대해서도 연구해보고 싶습니다.기타 특이사항 400소셜 미디어 광고에서 많이 접한 다이어트 약의 효과 실험을 통해 ‘orlistat이 lipase 활동에 미치는 영향'에 대해 탐구해봤습니다. 이를 통해 orlistat을 함께 넣은 triglyceride는 지방산으로 덜 분해되서 pH가 더 적은 크기로 변화하는 것과 일정수준에 도달하면 포화상태를 나타내는 것을 발견할 수 있었습니다. 일정 수준은 약의 권장량보다 적게 섭취해도 지방산의 흡수 방지에 도움을 줄 수 있다는 결론을 내리게 되었고, 다이어트 약은 끊임없이 개발되고 대부분 식욕, 체지방 및 체중을 줄이고 신진 대사 및 열 생성을 증가시키는 메커니즘을 촉진하는 제품들입니다. 기회가 된다면 췌장에서의 인슐린 방출을 증가시키고 포만감을 더 오랫동안 느끼게 해주는 호르몬에 대해서 많은 연구에 참여하고싶습니다.
실험 제목: PAGE를 이용한 단백질의 검정실험 목적단백질의 기능과 구조를 이해한 후 PAGE를 이용해서 단백질을 검정한다.실험 원리모든 단백질은 아미노산이라는 작은 구성인자의 중합체이다. 20가지의 아미노산들이 펩타이드결합을 통하여 서로 연결이 되어 있으며 같은 아미노산 중합체를 폴리펩타이드라고 부른다. 단백질은 하나 또는 그 이상의 폴리펩타이드가 모여서 독특한 3차원 구조를 형성하고 생물학적 기능을 수행한다.아미노산은 중심에 알파탄소가 있고 그 탄소에 아미노기, 카르복실기, 수소원자 그리고 곁사슬 R기가 결합되어 있다. 아미노산은 곁사슬의 성질에 따라 분류가 된다. 비극성 곁사슬을 가지면 소수성 아미노산이며 글리신, 알라닌, 발린, 루신, 아이소루신, 메싸이오닌, 페닐알라닌, 트립토판, 프롤린이 있다. 극성 곁사슬을 가지고 있는 아미노산은 친수성이며 세린, 트레오닌, 시스테인, 타이로신, 아스파라진, 글루타민이 있다. 전하를 띤 곁사슬 중 음전하인 곁사슬은 산성이다. 산성 아미노산은 세포내 pH조건에서 보통 이온화된 카르복실기의 존재로 일반적으로 음전하를 띤 곁사슬을 갖는다. 염기성 아미노산은 일반적으로 양전하를 띤 곁사슬을 가지고 있다. 산성 아미노산은 아스파트산과 글루탐산이 있고 염기성 아미노산은 라이신, 아르지닌과 히스티딘이 있다. 그리고 전하를 띠고 있기 때문에 모두 친수성 아미노산이다.한 아미노산의 카르복실기가 다른 아미노산의 아미노기에 가까이 놓이게 되면, 물분자가 제거되는 탈수 반응에 의해서 두 아미노산이 연결된다. 이 결과로 두 아미노산은 펩타이드 결합으로 연결이 된다. 폴리펩타이드 한 쪽은 자유 아미노기가 존재하는데 이 쪽은 N말단이라고 하고 다른 한쪽에 카리복실기가 존재하는 부분은 C말단이라고 한다.생명체의 거의 모든 역동적인 기능은 단백질에 의존한다. 단백질은 단백질은 8가지의 기능을 가지고 있다.첫번째로는 효소로서 세포내의 모든 화학 반응 속도를 높이는 화학 촉매 역할을 한다. 예시로는 음식물 분자에 있는 결합의 가수분해를 촉매하는 소 단백질은 동물의 결합조직에서 섬유상 구조를 제공한다.많은 단백질은 거의 구형이지만 어떤 단백질은 긴 섬유상 구조를 갖는 선형 단백질도 있다.단백질 구조를 네 단개로 나눌 수 있다. 먼저 1차 구조는 아미노산의 서열로 단백질의 형태와 기능을 결정한다. 1차 구조의 작은 변화에도 단백질 형태와 기능에 영향을 줄 수 있다. 1차 구조는 아미노산의 무작위적 연결로 결정되는 것이 아니라 물려받는 유전적 정보에 의해서 결정된다. 또한 1차 구조는 사슬에 위치한 아미노산의 곁사슬과 골격의 화학적 성질에 의해서 2차 구조와 3차 구조에 영향을 주기 때문에 매우 중요하다. 예를 들어 적혈구 세포에서 산소를 운반하는 헤모글로빈 1차 구조의 특정 위치에 있는 정상 글루탐산이 발린으로 바뀌게 되며 유전적 혈액 질환인 낫모양적혈구빈혈증을 일으킨다. 정상 적혈구는 원반 모양이지만, 낫모양적혈구빈혈증의 비정상 헤모글로빈 분자는 낫모양으로 변형되며 소수성 결합을 통하여 섬유상으로 결집하여 산소 운반 능력이 현전히 떨어지게 된다. 또한 좁은 혈관을 막아 혈류를 방해하게 된다.2차 구조는 아미노산 사슬의 질소와 산소의 음전화와 수소의 양전하에 의한 수소결합으로 생성되는 구조이다. 2차 구조는 두개의 구조, 알파 나선 구조와 베타 병풍 구조로 구분할 수 있다. 알파 나선 구조는 네번째 아미노산 사이에 형성되는 수소 결합에 의해서 유지되는 정교한 나선이다. 대부분이 알파 나선 구조를 가지고 있고 하나의 예시로는 머리카락의 구조 단백질인 케라틴과 같은 몇 몇의 섬유상 단백질이 대부분 나선 구조로 되어 있다. 베타 병풍 구조는 폴리펩타이드 사슬 두 가닥 이상이 나란히 놓여 있어 두 개의 평행하는 폴리페타이드들이 수소 결합에 의해서 연결되어 있는 경우이다. 예시로 거미줄의 실크 단백질이 있다.3차 구조는 아미노산사슬이 접혀서 만들어지는 전체적인 삼차원 구조이다. 다양한 아미노산의 곁사슬간의 상호작용에 의해서 만들어진 폴리펩타이드의 총체적인 형태이다. 3차 구조를 이루는 결합에는 수소 결합, 이황화 상호작용이 파괴되어 단백질의 고유한 형태를 잃으며 변성 denaturation된다. 변성요인으로써 먼저 에테르나 클로로포름과 같은 유기용매가 있고 유기 용매로 단백질이 옮겨지게 되면 폴리펩타이드 사슬이 다시 접히면서 사슬의 소수성 부위가 유기용매 쪽으로 향하게 되며 변성된다. 두번째로 변성제는 단백질의 형태를 유지하는 수소 결합, 이온 결합 그리고 이황화결합을 깨뜨린다. 마지막으로 과도한 열은 단백질 구조를 안정화시키는 약한 상호작용을 없앨 수 있어 폴리펩타이드 사슬을 망가뜨릴 수 있다. 예를 들어 달걀 흰자는 요리 하기 전에는 투명이지만 열에 의해서 불투명해진다. 하지만 이렇게 변성된 단백질이 용해된 상태로 남아 있을 경우, 환경의 화학적 물리적 상태가 다시 정상적으로 되덜아가면서 다시 재생되는 경우도 있다.전기영동은 단백질과 같은 큰 분자들을 전기적인 힘을 이용해 gel에서 이동시켜 크기에 따라 서로 분리하는 기술이다. 전기영동은 전기적 힘에 의해 전하를 띤 입자가 이동하는 것을 가르킨다. 그래서 전기적 전하의 차이를 이용하여 분자량에 따라 분리한다.단백질을 분리할 때는 polyacrylamide 등을 굳혀 gel을 만든다. 구조나 크기 등 입자의 성질에 따라서 gel을 통과하여 이동하는 속도가 달라지게 된다. 작은 분자는 큰 분자에 비해 빠른 속도로 이동하기 때문에 결과적으로 서로 다른 크기의 분자들을 gel 상에서 서로 다른 위치에서 띠 모양을 나타내게 된다. 각 각의 띠를 이루고 있는 분자들의 크기는 이미 크기를 알고 있는 분자들을 나란하게 전기영동하여 gel 상에 나타난 띠의 상대적인 위치를 비교함으로써 그 크기를 측정할 수 있다.SDS PAGE는 SDS와 polyarylamide를 이용한 protein electrophoresis로 단백질을 분석하고 정제하기 위한 전기영동법 중 하나이다. Polyacrylamide는 촘촘한 다공성 물질이기 때문에 분자량이 작고 크기 차이가 작은 시료들을 분리할 때 이용한다. 따라서 핵산에 비해서는 그 크기가 작은 로 정렬하게 만드는 gel이다. pH가 6.8로 running gel에 비해 낮고 이 낮은 pH가 단백질을 정렬하게 만드는 결정적인 요인이다. Buffer 안에 존재하는 이온 glycine과 Cl- 중 glycine 이온은 net charge가 0이 되는 pI 값이 6.2인데 gel은 6.8이기 때문에 Cl-가 가장 빠르게 내려가고 glycine 이 Cl-보다 느리게 내려가게 된다. 이때 이동속도는 Cl-, 단백질, glycine 순이 되고 두 이온 사이의 높은 전압이 생기게 되며 두 이온 사이의 단백질들 이동속도 차이가 점점 낮아져 단백질들이 일직선으로 내려가게 되는 것이다.Running gel 은 pH가 8.8이기 때문에 glycine이 완전히 이온화된다. 이로 인해 이동속도가 Cl-,glycine,단백질로 바뀌게 되어 두 이온 사이에 형성되었던 높은 전압이 거의 사라지게 되며 다시 속도 차이가 생기게 되는 것이다. 속도 차이와 acrylamide로 인해 생긴 그물 구조로 인해 stacking gel에서 일자로 정리된 단백질은 분리되어 차이를 보이며 내려가게 된다.실험 재료전기영동 kit & Power supply & polyacrylamide gel, pipette & 20 μL tip, coomassie brilliant blue solution, Marker, 말의 혈청, human serum, hemoglobin, FBS, Eppendorf tube, Tris-glycine buffer (running buffer, pH 7), sample buffer (loading buffer), β-mercaptoethanol, 전자레인지, 염색, D.W실험 방법Sample buffer는 sample과 동량의 volume비로 섞어 사용한다. Sample buffer는 β-mercaptoethanol을 buffer 950 μL 당 50 μL 를 넣어 사용한다.전기영동으로 분리시킬 sample 만든다.Gel에 sample loading 준비한다. Polyacryl에 옆을 비틀어 gel을 떼어낸다.전기영동이 끝난 gel은 분리하여 D.W가 담긴 tray에 넣고 조심스럽게 wash한다.D.W를 버린 후, Coomassie brilliant blue에 gel이 잠기도록 한 다음 30초씩 2번 전자레인지에 돌려 염색한다.Coomassie blue제거 후, 뜨거운 물을 붓고 전자레인지로 30초 돌리면서 wash한다.물을 버리고 다시 더운물을 붓고 전자레인지로 30초 돌려 탈색시킨다. 이 탈색 과정을band가 선명해질 때까지 반복한다.Band가 선명하게 보이면 카메라로 gel 사진을 찍고 결과를 기록한다.실험결과실험에 대한 고찰SDS PAGE gel을 제조시 구성 성분들의 역할을 살펴보면, Tris HCl buffer는 실험을 진행할 때 단백질과 반응을 잘 하지 않아 샘플을 변성시키지 않고 안정적인 pH값을 갖도록 한다. SDS는 약 100도로 가열되었을 때 단백질을 코팅하여 다양한 전하기 있는 모든 부분이 (-) 전하로 바뀌게 한다. β-mercaptoethanol은 이황화 결합을 끊어주어 단백질이 형성하고 있는 구조를 선형 구조로 바꾸게해준다. Glycerol은 단백질에 무게를 줘 갈아앉게 만들어서 로딩이 잘될 수 있도록 도와준다. 또한 촘촘한 젤을 구성하여 물질을 분리하기 위해서 Stacking gel보다 running gel에서 acrylamide함량이 더 높다.전에 DNA를 전기 영동할 때에는 agarose를 사용하였는데 이번 단백질을 전기영동할 때에는 polyacrylamide를 사용하였다. 둘의 차이는 pore의 사이즈가 다르다는 것이다. 주로 polyacrylamide gel은 pore가 작아서 저분자량용으로 사용되고 agarose gel은 pore가 크기 때문에 고분자량용으로 사용된다.왼쪽부터 size marker, hemoglobin, FBS, 말 혈청, human serum, hemoglobin, FBS, 말 혈청, human serum, size marker 이 순서로 시료 샘플을 넣었다. Hemoglobu7)
실험 제목: PCR, DNA 전기영동실험 목적PCR로 DNA 다량 복제하고 PCR결과 물질을 분리 분석하는 DNA 전기 영동을 이해한다.실험 원리DNA 복제는 복제기점이라는 뉴클레오타이드 서열을 가진 짧은 DNA 서열에서 시작된다. 복제기점에 DNA 복제개시에 관여하는 단백질이 결합하면 DNA 이중나선이 분리된다. DNA 중합효소는 딸가닥의 한쪽 말단에 뉴클레오타이드를 붙여주는데 이 효소는 가닥의 3’ 말단에만 새로운 뉴클레오타이드를 붙일 수 있다.DNA 복제 과정을 따라하고 싶었지만 문제점이 많았다. 효소 추출의 어려움, 효소 활성 유지의 어려움 그리고 반복적인 반응을 유지하는 것이 불가능했다. 헬리카제를 대체하기 위해 수소결합으로 이루어진 DNA 이중가닥을 열로 분리했고 짧은 가닥의 DNA 를 합성할 수 있는 프리마제를 대체 할 수 있었다. 원래 PCR에 사용되었던 중합효소는 E coli의 DNA 중합효소 1인 Klenow fragment이었는데 이 효소는 DNA를 단일 가닥으로 풀기 위해 온도를 높이게 되면 파괴가 되어버려 매 cycle마다 효소를 다시 넣어주어야 했다. 그래서 열을 견디는 DNA 중합효소가 필요했다. 그렇게 발견된 것이 Taq 중합효소이다. 이는 온천이나 열수공 근처에서 서식하는 호열성 미생물로부터 분리되어 고온의 열변성 조건에서도 활성을 유지하는 고온성 DNA 중합효소이다.PCR ( polymerase chain reaction), 중합효소연쇄반응은 실험실에서 DNA 분자의 특정 부분을 표적으로 하여 빠르게 증폭하는 기술이다. 몇시간 안에 1개의 DNA 분자로 1000억개에 이르는 DNA 분자를 만들어 낼 수 있어서 DNA 감식에 사용할 수 있는 충분한 양의 DNA 를 얻을 수 있다. 주기가 한번 반복될때마다 동일한 DNA 분자집단을 두배로 만든다.PCR은 세 단계의 과정을 반복하는데 그 결과 동일한 DNA의 분자 수가 기하급수적으로 증가한다. 첫 단계인 변성단계에서는 반응 혼합물의 DNA 가닥을 분리하기 위해서 95도인 높은 온도에 수소결합이 제거된다. 두번째 단계인 결합단계는 목적 DNA의 양쪽 말단에 상보적인 서열을 가지는 짧은 단일가닥의 DNA 시발체가 결합할 수 있도록 45도인 낮은 온도에 방치한다. 마지막 단계인 중합단계에서는 DNA 중합효소가 대상 서열과 결합한 시발체를 5’3’ 방향으로 연장시켜준다. 일반적인 DNA 중합효소가 사용되었다면 그 단백질은 처음 열을 가하는 단계에서 DNA 와 함께 변성되기 때문에 각 순환 과정 후에 교체가 되어야한다. 그래서 높은 온도에도 안정적인 활성을 보이는 Taq 중합효소가 존재한다. 이 효소는 온천에서 사는 원핵생물인 thermus aquaticusㄹ부터 처음 분리되었는데 PCR 첫 단계의 95도 이상의 높은 온도에서도 기능을 하도록 진화적으로 적응되었다.많은 DNA 연구에서 젤 전기 영동이 사용된다. 전기 영동 electrophoresis에서 물질들이 전기장의 영향을 받아 유동성 매체 내에서 이동한다. 젤은 해초에서 추출한 젤리 같이 생긴 탄수화물 중합체인 아가로스로 만든 얇은 판 모양의 구조물이다. 아가로스는 전기 줄 같은 실이 촘촘하게 엮여 있어서 젤을 첼처럼 사용하여 단백질이나 핵산과 같은 거대 분자를 분자 크기나 전하에 의해 물리적으로 분리하는 방법이다. 납작한 직사각형 모양의 젤 한쪽 끝에 각 DNA 혼합액 시료가 들어갈 홈을 만들고 홈에 각 시료를 넣는다. 이어서 DNA 시료가 들어간 젤 쪽에 음극을 연결하고 반대편 끝에 양극을 연결한 후 전류를 걸어주면, DNA는 인산기를 가지고 있어서 전기적으로 음성을 띠므로 양극으로 이동한다. 젤을 구성하는 다당류의 복잡한 망구조에서 길이가 긴 DNA 조각이 작은 조각보다 천천히 이동하기 때문에 DNA가 길이에 따라 분리되고 길이가 짧은 분자일수록 양극 쪽으로 빠르게 이동해 젤의 바닥 쪽에 위치하게된다.DNA나 RNA는 PCR로 증폭을 했다고 해도 워낙 작기 때문에 눈으로 확인하기 어려움이 있어 DNA나 에티듐브로마이드EtBr이라는 시약으로 염색해서 확인한다. 이는 실험실에서 가장 많이 광이 나와 눈에 보이도록 해주는 역할을 한다. 연속되는 염기쌍의 간격을 증가시키고 규칙적인 당-인산 골격을 일그러뜨리며 나선의 꼬임을 감소시킨다. 하지만 에티듐브로마이드는 DNA에 끼어드는 것으로 짐작할 수 있듯이 매우 위험한 발암물질지다 돌연변이원으로 알려져 있다. 그리고 이는 DNA의 이동속도를 10-15% 감소시키며, 왠만해서는 제거가 잘 되지 않는다고 한다. 그리고 호흡기 자극, 피부 자극, 눈 자극 이 올 수 있으며 피부에 단기간 노출시에도 자극이 있기 때문에 반드시 취급시 마스크 및 고무장갑을 착용을 해야한다.DNA 감식은 수십개의 반복된 DNA 조각을 확인하는 것이다. 반복 DNA는 유전체에서 여러 벌로 존재하는 염기서열이며 사람에서 대부분 유전자들 사이에 위치한다. DNA 감식에 사용되는 반복 DNA 는 여러번 반복된 짧은 염기서열이 일렬로 배열되어있어서 이러한 염기서열을 짧은 반복서열, short tandem repeat (STR) 이다. STR은 인간의 30억쌍의 DNA 중 일정한 순서의 짧은 염기배열로 반복되는 부위를 말한다. 사람마다 반복회수가 다르며 상염색체의 한 쌍은 아버지와 어머니에게서 각각 하나씩 유전되므로 한 개인은 한 STR 부위에 각각 다른 STR유전자를 하나씩 갖게 된다.현대 DNA 기술은 범죄현장을 조사하고 법적 절차를 위해 증거들을 과학적으로 분석하는 분야인 법의학 영역을 빠르게 변화시키고 있다. 특정한 DNA 조각이 누구의 것인가를 결정하는 작업인 DNA 감식이 있다. 범죄 현장이나 용의자, 피해자 또는 수집한 증거에서 DNA 표본을 채취한다. 그리고 각 DNA 표본에서 선택한 유전자 표지를 증폭해서 검사에 필요한 충분한 양의 DNA를 생산한다. 그리고 증폭된 DNA 표지를 비교한다.강간과 살인 죄명으로 사형이 잘못 선고되었던 워싱턴 사건에서 STR 분석에 의해 무죄로 결론이 났다. 범인의 정액에서 얻은 것과 워싱턴의 것과 사건과 관련이 없는 다른 사건의 범인의 3개의 샘플에서 STR 표지의 반복된 횟수를 비교해보았는데유전병 진단, 항공기 버드스트라이크 유발 조류 종 확인 등에서 응용될 수 있다.실험 재료PCR premix (Taq polymerase, dNTPs, buffer, MgCl2) , DNA template, primers, 증류수, IX TAE buffer, Agarose, 6X DNA loading buffer, DNA gel staining dye, 마이크로 피펫 20P , 피펫 팁 (yellow 2-200 µL), 소형 원심분리기, PCR thermal cycler, LED transluminator, 메스실린더, 저울, 전자레인지, DNA electrophoresis 장비 set실험 방법PCR premix tube에 주형 DNA 2 µL, primer 2 µL와 증류수 162 µL를 피펫을 이용하여 넣어준다.PCR cycler에 Rxn mixture 를 넣고, 95°C 1분, , 95°C 15초, 50°C 15초, 72°C 30초, 72°C 5분을 31번 반복한다.PCR이 진행되는 동안 1% agarose gel을 만든다.PCR cycle이 끝나면 rxn에 6X loading buffer 4 µL을 넣고, 피펫으로 잘 섞어준다.다 굳은 gel에서 comb을 제거하고 전기영동 탱크에 gel을 넣고 1X TAE buffer를 gel이 잠기게 부어준다.Loading buffer를 섞어준 PCR rxn과 DNA size marker를 각각 5 µL씩 well에서 loading한다100 volt로 전기영동을 수행한다전기영동이 끝난 gel을 staining solution에 넣어 20분 정도 염색한 후에 LED transluminator로 관찰한다.실험 결과실험에 대한 고찰PCR 반응의 주요 구성 성분은 증폭하려는 DNA외에 primer 쌍, dNTP, Mg2+, loading buffer, primer 등이 필요하다. 먼저 deoxynucleotide triphosphates, dNTP는 핵산의 구성 성분으로 중합효소가 DNA를 합성할 때 기질 역할을 한다. 또한 높아지며, 사용하는 Mg2+농도에 따라 dNTP의 최적 농도가 달라진다. 다음으로 Mg2+는 효소활성, primer의 annealing 등에서 사용된다. Loading buffer는 PCR된 DNA 시료를 well바닥에 가라앉혀주고, 전기 영동을 하는 동안 대략 DNA 가 어디까지 이동했을 지를 알 수 있게 해주는 용도이다. 30% glycerol, 0.25% Xylene cyanol, 0.25% bromophenol blue로 만들어졌다. 여기서 glycerol은 DNA용액을 무겁게 해서 agarose 의 홈으로 잘 가라앉히게 하는 역할을 한다. 그리고 bromophenol blue 는 색깔을 나타내는 염색약으로 DNA와 같이 전기영동이 되어서 DNA의 흘러간 정도를 나타나게 해준다.DNA 추출과 PCR을 통하여 실제 전기영동으로 우리가 제대로 검출했는지에 대해서 가시적으로 확인할 수 있었다. 다 같은 정도의 거리를 이동하였고 size marker와 대조해볼 수 있었다.또한 PCR 실험을 할 때 마이크로 피펫을 올바르게 사용하는 것이 중요했다. 먼저 필요한 부피에 맞는 피펫을 선택한 후에 피펫의 volume adjustment knob를 돌려 원하는 양으로 조절한다. 피펫 끝에 멸균된 피펫 팁을 꽂은 후에 피펫의 버튼을 1st stop까지 천천히 누른 상태로 채취할 시료 용액에 피펫팁을 담근 후에 원 위치까지 천천히 올린다. 용액을 옮길 용기에 피펫의 1st stop까지 피펫의 버튼을 눌러 용액을 분배한다. 팁에 남아있는 용액을 2nd stop까지 눌러 남아있는 시료를 빼낸다. 피펫을 사용할 때 여러가지 주의사항이 있는데 먼저, 피펫을 거꾸로 들어 오염되지 않도록 주의해야한다. 그리고 피펫을 기울이게 되면 정확한 양의 시료가 흡입되지 않기 때문에 항상 수직으로 세워서 사용해야했다 마지막으로 샘플에서 샘플로의 오염을 방지하기 위해서 양을 초과해서 피펫동작을 하지 않아야한다.참고문헌Cambell외, Campbell biology in focus 2판, 바이오사.