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기기분석실험 Agarose gel 전기영동 결과리포트

기기분석실험 Agarose gel 전기영동 결과리포트입니다.
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최초등록일 2009.02.19 최종저작일 2008.10
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기기분석실험 Agarose gel 전기영동 결과리포트
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    소개

    기기분석실험 Agarose gel 전기영동 결과리포트입니다.

    목차

    1. 제목
    2. Result
    3. 고찰 및 생각

    본문내용

    1. 제목
    Agarose gel 전기영동

    2. Result
    우리 조는 DNA와 효소반응을 실험 전에 조교선생님께서 미리 해놓으셨기 때문에 실험시간을 단축할 수 있었다(만약 효소 반응을 시킨다면 약 1시간 동안 반응해준다.). 하지만 우리가 직접 효소반응을 시킬 때는 조심해야 되는데 그 이유는 효소를 넣을 때 단백질로 이루어진 효소가 변할 수 있기 때문이다. 37℃에서 효소 반응이 일어나므로 효소를 잡는 손의 체온에 의해서도 변할 수도 있으므로 조심해야 한다.
    겔을 만든 뒤에 뜨거운 상태로 틀에 부으면 굳는데 시간이 너무 많이 걸리기 때문에 적당히 식힌 후에 틀에 부어서 굳힌다. 이때 EtBr을 넣어 준다. EtBr은 UV를 쬐면 형광을 뛰는 성질을 가지고 있고, DNA 이중나선 사이에 끼어들기 때문에 전기영동을 통한 DNA확인에 사용되는 대표적인 DNA염색물질이다.
    여러 DNA 형태를 알아내기 위한 확실한 방법은 ethidium bromide의 양을 증가시켜 전기영동을 시행하는 것이다. Ethidium bromide의 농도가 증가하면 더 많은 ethidium bromide가 DNA와 결합하게 된다. Supercoiled DNA에서 negative superhelical turn은 차차 제거되고 반지름이 증가하게 되어 이동속도는 느려지게 된다. Superhelical turn이 남아있지 않은 적절한 색소의 농도에서 이동속도는 가장 느리다. 여기에 더 많은 ethidium bromide가 첨가되면 positive superhelical turn이 생기게 되고 DNA 분자는 더 치밀해지며 이동속도는 급속도로 빨라진다. Linear와 open circular DNA의 이동은 DNA가 중성의 전하를 띠거나 ethidium bromide에 의해 굳어지는 경우에 이동속도가 느려진다.
    낮은 전압에서 선형으로 된 DNA 조각의 이동속도는 부하되는 전압에 비례한다.

    참고자료

    · 생화학의 이해 . 대표역자 조성호. 월드 사이언스
    · 분자생물학한국분자생물학회편   아카데미서적  1998년
    · http://www.wikipedia.org/
    · 단백질실험노트-월드사이언스. 김승호 장규태역
    · http://202.20.99.17/~jjkim/lab/Restriction/Agarosegel.htm
    · http://kin.naver.com/detail/detail.php?d1id=11&dir_id=110205&eid=t5++JJZJefZv3 pQb8IC+Tt309WWUWlrM&qb=RE5BIGxhZGRlcg==&pid=ful3aloQsDZssa2RBlRsss--378082&sid=SCg3Fm4HKEgAAF2Ud-s
    · http://blog.naver.com/ekdrmsdlfkd?Redirect=Log&logNo=20008133306
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