polymerase chain reaction(분자생물학 레포트)

소개

분자생물학 레포트입니다. 참고하세요.^^

목차

1. Title : polymerase chain reaction, Gel electrophoresis, detection of DNA in Agarose Gel, Agarose Gel Extraction Protocol
2. Date : 2008년
3. Coworker : 경북대 생명공학생
4. introduction
① polymerase chain reaction
2) programming PCR
3) Tm=2(A+T)+4(C+G)
4) primer desing
5) polymerase Chain Reation 의 원리
6) PCR의 적용
7) PCR 에 이용되는 중합효소: Taq 중합효소
② Gel electrophoresis
1) 기본원리
2) main use
3) gel
4) Electrophoresis Buffer
5) Gel-Loading Buffer (Dye)
6) gel 상에서 DNA 분자를 보는 방법
③ Detection of DNA in agarose gel
1) staining DNA in Gels
2) Range of separation in gels
④ transformation
1) 기본원리
2) transformation 균주의 검출, 선택 marker
3) Transformation solution I (pH7.0)
4) -LB liquid media
5) T-easy vector
5. Method
6. Result
7. Discuss

본문내용

1. Title : polymerase chain reaction, Gel electrophoresis, detection of DNA in Agarose Gel, Agarose Gel Extraction Protocol
2. Date : 2007년 3월 24일 금 ~ 3월 26일 일요일
3. Coworker : somebody
4. introduction
(1) polymerase chain reaction
1) essential component
-DNA template
-primer
-thermostable DNA polymerase（thermus aquaticus 의 Taq polymerase)
-dNTP
-buffer: 산과 그 짝염기로 구성되어있으며 약간의 강산이나 강염기를 첨가하여도 pH 변화가 크게 일어나지 않는 용액이다. 반응이 일어날 수 있는 적절한 pH를 제공해준다.
-divalent cation ( Ma²) 효소의 활성화에 필요하며 buffer화 함께 첨가된다.
-Monovalent cation ( KCl )
2)programming PCR
-denaturation: DNA polymerase는 DNA 합성을 위해 single strand에 부착하여 이를 주형으로 하여 이에 상보적인 strand를 합성하게 된다. 그러므로, DNA polymerase가 작용하기 위해서 DNA double strand가 각각 single strand로 풀려야만 한다. DNA double strand를 single strand로 풀어주기 위해서 PCR 에 열을 가해주는 방법을 사용한다.(96도, 1분)
-annealing of primer ( 3-4℃ lower than calculated Tｍ）:DNA polymerase 가 작용할 수 있도로 primer를 single strand에 붙여 주는 과정이다. 상승되었던 온도를 Tm 값보다 1~2도 낮은 온도로 다시 내려주면 된다.

참고자료

· 없음