[고급영양학]단백질 측정

소개

고급영양학, 생화학 - 단백질 측정 방법 입니다.
Lowry method 를 통해 혈청 단백질의 농도를 측정하고 혈청 단백질의 생화학적 역할과 그에 따른 영양학적인 기능을 이해한다.

목차

1 . 실험 목표 (Objectives)
2 . 이론 및 원리 (Theory / Principle)
3. 실험 방법 및 과정 (Methods / Procedures)
▣ 실험 재료 및 기구
▣ 실험 방법
4. 결과
5 . 고찰 ( Discussion )
6. 참고문헌

본문내용

. 이론 및 원리 (Theory / Principle)
1) 단백질 농도 측정 방법
(1) Bradford 법
Lowry 정량법에 비하여 간단하고 빠르고, 보다 감도가 높은 방법이며, 반응에 있어서 비단백질에 의한 방해를 덜 받는다. Bradford법은 Coomassie blue G250과 단백질과의 결합에 의한다. Coomassie blue G250은 4종의 다른 ion 형태를 지니며 산성용액에서는 산성의 적색과 녹색 형태가 우세하게 존재하여 각각 470과 650㎚에서 최대 흡광도를 지닌다. 따라서 단백질의 양은 푸른색의 ion형의 양을 측정함으로서 결정되며 통상 595㎚에서 측정한다. 푸른색의 ion형은 단백질의 arginine이나 lysine 잔기에 결합하여 발색하며, 단백질 중의 arginine이나 lysine의 함량에 따라 다소 차이가 있다. 통상 2가지 분석방법에 이용되며, 표준측정법은 10~100㎍의 단백질 정량에 이용된다.
(2) Lowry 법
단백질 정량에 있어서 Lowry법의 감도는 비교적 넓게 적용되기 때문에 오랫동안 광법위하게 이용되고 있다. 이 방법은 알칼리성에서 단백질의 peptide 결합과 구리가 반응하여 Cu+이온을 생성하는 Biuret 반응의 원리를 이용한 것이다. 발색의 정확한 기작은 밝혀지지 않았지만 Cu+ 이온은 방향족 아미노산의 산화를 유도하여 phospomolybdotungstate를 푸른색의 heteropolymolybdnum으로 환원시킨다. 이러한 반응 결과 강한 푸른색을 생성하며 그 강도는 tryptophan과 tyrosine양에 영향을 받는다. 이 방법은 단백질의 농도가 0.01~ 1.0mg/ml의 경우에 측정가능하다.

2) 간기능을 관찰하기 위한 생화학 지수
① 간 효소 활성의 측정
간에서 아미노산 대사에 관여하는 효소인 GOT (glutamic-oxaloacetic transaminase)와 GPT (glutamic-pyruvic transaminase)의 혈청 내 활성도를 측정하여 간 기능을 평가하는 방법이다.

참고자료

· 없음