[생화학] 단백질정량

소개글

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목차

1. 제목
2. 목적
3. 재료 및 방법:
4. 결과
5. 결과 토의
6. References

본문내용

1제목:Protein Concentration Determination(단백질 농도 결정)

2목적: 생화학 실습의 기본인 단백질 농도 결정의 방법을 이해한다.

5결과 토의
✶ 단백질 정량분석
단백질 검출을 통한 단백질의 정량 분석하는 방법에는 대표적으로 뷰렛반응(칼슘이온이 펩타 이드와 결합하여 색이 변하는 원리를 이용, 감도 1-10mg), 로우리법(Lowry: 금속성 이온이 고리형구조의 잔기를 가진 아미노산과 결합하는 원리, 감도 20-300 μg), BCA 법(Lowry법을 응용, BCA reagent 사용), 브래드포드법(쿠마시블루라는 염색약과 염기성 아미노산(라이신) 의 결합으로 색이 변함, 감도 1-100μg), 그리고 자외선법(고리형 구조의 아미노산이 280nm 의 파장을 가지는 빛을 흡수하는 원리를 이용)이 있다. 단백질을 정량분석하기 위해서는 우선 가수분해시켜야 한다. 단백질을 가수분해하면 Peptide Bond가 끊어져 Amino Acid로 나뉘는 데, 단백질은 보통 6N HCl용액에 단백질을 넣고 공기를 제거하고 밀봉하여 100C에서 8시 간~24시간 동안 가열하여 가수분해 시킨다. 이런 가열조건에서는 모든 Peptide Bond가 파 괴되며 Amino Acid 중 Glutamine과 Asparagine은 Side Chain의 Amino Bond까지 파괴된 다.

참고 자료

한국 생화학회(1999), 실험생화학 개정 3판, pp.171~184,197~206, 탐구당, 서울
http://www.mecasys.co.kr/downloads/Quantitative_06.htm
http://www.shingu.ac.kr/~dolchoi/lc_bc/bc3-3.html