HPLC(.High performance liquid chromatography )의 원리와 적용

소개

hplc를 곧 다루게 되어 탄탄한 이론과 기초 시스템에대해 많은 그림과 함께 알차게 정리했습니다. 전 졸업한지 3개월됐구요~ 이 자료를 레포트로 적용하진 못했지만 분명 A학점짜리입니다^^
저렴하게 공개합니다~ 저렴하다고 내용이 부실할꺼라 의심마시고 모두 A받으세요~

목차

◎ HPLC의 원리
○ HPLC란?
○ HPLC - 분리의 기초
- 전단분석법(Frontal Analysis)
- 치환전개법(Displacement Development)
- 용리법(elution analysis)
○ HPLC의 장점
○ HPLC의 단점
○ HPLC의 종류
◎ HPLC 기기구성
○ HPLC의 기기 구성
○ Pump
- Pump의 종류 및 특징
○ 검출기
- 검출기의 종류 및 특징
- UV/Vis Detector의 원리
○ HPLC의 시스템의 구성
○ solvent(용매)
- solvent reservoir
- solvent inlet filter
- solvent line
○ Pump
○ prime/ purge valve
○ pulse damper
○ injector

본문내용

◎ HPLC의 원리
○ HPLC란?
; HPLC는 ‘고성능액체크로마토그래피’의 약자로, ‘고압액체크로마토그래피’ 라고도 불린다.
일반적으로 시료는 컬럼 앞부분에 주입되어 이동상에 의하여 컬럼안으로 들어가게 된다.
컬럼은 고정상과 이동상으로 구성되어 있고, 이 양자와 시료사이의 화학적, 물리적 상호작용으로 시료는 분리되어 컬럼 뒷부분에서 용출된다.
따라서 시료의 용출은 이동상의 유속과 컬럼 내부에서의 시료 각 성분의 상호 작용 크기에 따라 결정된다. 이동상이 기체라면 이 속도는 매우 빨라 고속분리가 비교적 용이하다. 그러나 이동상으로 액체를 사용하는 컬럼 크로마토그래피는 기체에 비하여 이동상의 점도가 매우 높기 때문에 컬럼을 통과하는 이동상의 저항이 증가하여 분리용출에 장시간이 걸린다.
액체 크로마토그래피를 가능한 신속하게 할 목적으로 개발된 것이 오늘날의 HPLC 이다.

분리시간의 단축 즉 고속를 위해서는 먼저 이동상의 유속을 될 수 있는대로 빠르게 하는 것이 필요하다. 이때, 컬럼의 앞부분의 압력은 매우 높아져 앞부분과 뒷부분에 큰 압력차가 생긴다. 이와 같은 조건에서 컬럼안으로 이동상을 강제로 흘려 보낼 수 있는 고성능 펌프 즉, 고압에서 일정한 운반량을 유지할 수 있는 펌프의 개발 및 공업적 제조가 필요했다.
또 신속하게 시료를 분리하기 위해서는 고정상과 이동상 사이의 평형이 짧은 시간안에 이루어질 수 있는 고분리능 충진제가 필요하게 되는데, 이와 같은 충진제의 개발이 늦었던 것이 펌프와 함께 HPLC의 등장을 지연시킨 원인의 하나였다.

참고자료

· perkinelmer홈페이지
· Nano-Optic Detection Technology블로그
· 대한분석화학