[자연과학]pcr의 dna증폭 원리와 응용

소개

pcr의 dna증폭 원리와 응용내용입니다.

목차

Ⅰ. 서 론
1. PCR(Polymerase Chain Reaction)
2. PCR기계의 종류
Ⅱ. 본 론
1. PCR의 원리
2. PCR의 구성시약과 반응조건
1) 내열성 DNA polymerase와 반응조건
2) primer
3) PCR cycle
3. PCR의 반응 특이성
4. PCR 생성물의 혼입 위험성
5. PCR의 응용
1) 비대칭 PCR에 의한 직접 염기 서열 결정법
2) 경합 PCR에 의한 mRNA 정량
3) RACE법
4) O-157의 검출
5) PCR을 이용한 병원성 효모의 빠른 동정법
6) Pathogen의 검출
7) Human genetics
8) Evolutionary biology
9) Genetic fingerprinting
10) PCR에 의한 닭고기 중 Listeria monocytogenes의 직접 검색
11) PCR에 의한 한국인 혈우병 A 환자의 유전자내 BclⅠ
및 XbaⅠ RFLP양상에 관한 연구
12) 그 밖의 응용분야
6. RT-PCR
1) RT-PCR법의 원리
2) RT-PCR법에 따른 실험예
III. 결 론

본문내용

CR은 polymerase chain reaction의 약자로, DNA의 기지영역을 수 시간 동안 수십만 배로 증폭하는 방법이다. 그 반응은 double stranded DNA의 단일사슬로의 분리, 합성 primer의single strand에로의 annealing, DNA polymerase에 의한 primer의 신장반응(extention)의 3 개의 과정으로 이루어지며, 이 cycle을 반복해서 DNA를 증폭한다. DNA polymerase는 single stranded DNA를 주형으로 해서 그것과 상보적인 DNA를 합성하며, double strand가 되는 반응을 촉매 한다. 반응의 개시에는 DNA와 상보적으로 결합하는 primer가 필요하고 primer의 결합 후 5` 에서 3`의 방향으로 DNA사슬을 합성해 간다. DNA는 통상 double strand로 존재하기 때문에 목적의 영역을 끼우는 2종류의 primer를 첨가하면 그 영역은 2배가되고 그것을 반복하는 것으로 지수 함수적으로 DNA가 증폭된다. 따라서 기지영역의 염기배열을 함유한 genome이 1분자라도 있으면 그 영역의 DNA 단편이 대량으로 얻어질 수 있다. 이 방법이 유전자 연구나 DNA 진단에 준 충격은 대단히 크며, 그 방법론을 크게 변화시켰다. 종래의 분석 기술은 검출 signal의 증폭에 초점이 맞추어져 있지만 PCR은 검출대상의 DNA 자체를 증폭한다는 아주 새로운 발상에 기초하고 있다. 그 때문에 간편한 전기 영동 등으로 충분히 검출 가능하며 복잡한 분석과정을 대폭 간략화 할 수 있다.

참고자료

· 없음