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[생화학실험] Peptide Mass Fingerprinting II (MALDI-TOF)

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최초등록일 2007.04.28 최종저작일 2006.11
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[생화학실험] Peptide Mass Fingerprinting II (MALDI-TOF)
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    소개

    저희 학교 조교의 주문대로 Discussion에 중점을 두며 열심히 썼습니다. (고찰 - 한 장 분량, 글자 point ; 10)
    A+ 받은 보고서이니 참고하시면 도움 되실 겁니다~

    목차

    1. 실험제목
    2. 실험일자
    3. 제출자 및 공동실험자
    4. 목적
    5. 원리
    6. 시료 및 기자재
    7. 실험방법
    8. 실험결과
    9. 고찰
    10. 참고문헌
    11. 숙제

    본문내용

    MALD-TOF(Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization - Time Of Flight) mass spectrometry는 시료에 UV를 흡수하는 매트릭스를 첨가하여 결정화 시킨 후 레이저를 조사하여 이온화 시켜 생성된 이온들의 m/z 에 따른 비행시간의 차이로 질량을 분석하는 분석법으로 GPC/SEC 와는 다르게 고분자의 절대 질량을 측정할 수 있어 단백질 등의 생체 고분자 및 합성 고분자, 첨가제 등의 분석에 아주 유용하게 사용될 수 있는 분석법이다.
    MALDI-TOF는 1988년 독일의 Hillenkamp 등에 의해 개발된 이온화 법으로 200,000 Da 이상의 물질에 대해서도 빠르고 정확 분자량 측정이 가능한 분석법이다. MALDI-TOF MS의 구조는 다음과 같다.
    그림 1) MALDI-TOF MS의 구조

    이온 소스에서 생성된 이온들을 일정한 전위차로 가속시켰을 때 그 속도는 다음과 같이 얻어진다. 전압 V를 걸었을 때 질량이 m 이고 전하가 ze인 이온의 속도(v)는 다음과 같으며 여기서 e는 전자의 전하이다.

    즉v는 (m/z)1/2에 반비례 하고 이온 소스로부터 검출기까지의 비행시간은 (m/z)1/2에 비례하게 된다. 따라서 이온의 비행시간을 측정함으로서 이온의 질량을 분석할 수 있게 되는데 이러한 원리를 이용한 것이 바로 TOF 질량 분석기이다. TOF 질량 분석법은 linear법과 reflectron방식으로 나눌 수 있는 데, linear법은 생성된 모든 이온들이 1m 내외 직선의 비행관을 통과하게 되며, 분해능을 높이기 위해 이온의 생성과 가속사이에 약간의 시간차를 주어 이온들의 초기 운동속도 분포 차를 줄여주는 Time-lag-focusing 기능을 첨가하여 사용할 수 있다. 또한 비행관 끝에 이온 거울을 부착하여 한정된 범위내의 분해능을 증가시킬 수 있는 reflectron법을 사용하기도 한다.

    참고자료

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