생체내에서의 면역반응

목차

목 표:

탐구 1: 면역, 예방주사 (immunization)의 원리
실험내용
실험방법

탐구 2: 항원-항체반응
실험상의 유의점
실험내용
실험방법

탐구 3: 면역조절 유전자의 mRNA 발현
실험상의 유의점
실험내용
실험방법

본문내용

목 표: 면역의 개념과 생체에서 일어나는 면역반응의 주요특성을 이해하고 이의 응용을 습득한다.

탐구 1: 면역, 예방주사 (immunization)의 원리

실험상의 유의점
- 주사기 사용에 유의하여야 한다.
- 수술셋트 사용에 주의한다.
- 휘발성의 ether 사용시 조심한다.
- 실험동물의 취급에 능숙한 조교하에 실시한다.

실험내용

1) 항원주사
준비물: 항원, 주사기 (syringe), BALB/c 생쥐, CFA (complete Freund`s adjuvant)
실험방법
1. 항원 20 µg을 adjuvant와 섞어서 복강에 주사한다.
: 1mg/ml 항원 20 µl에 PBS 80 µl 그리고 CFA 100 µl를 섞어 200 µl가 되게 만든 후, vortex하여 잘 섞어준다.
2. 1주 후, 생쥐의 심장에서 혈액을 채취하여 혈청을 준비한다.

2) 생쥐혈청의 준비
준비물: 면역한 생쥐, ether. microtube, 수술셋트

실험방법
1. 생쥐를 ether로 마취시켜, 심장에서 혈액을 채취하여 ice에서 2시간 정도 방치한다.
2. 10,000 rpm에서 10분간 원심분리 한다.
3. 상등액을 모아서 냉동 보관한다.
* 항원을 주사하지 않은 정상 생쥐 혈청도 준비한다.

참고자료

· 없음