[생리학]High Resolution whole-mount in situ hybridization에 대한 세포생리학 실험보고서

소개

이란 주제를 가지고 있는 실험을 하고 그에 관한 보고서를 썼습니다. 자세한 내용은 본문요약내용과 목차를 참고하세요^^

목차

1. Introduction
실험의 필요한 대략적인 기본지식

2. 2. Materials & Methods
실험재료와 방법, 각 용액이 하는 역할

3. Result
10hr,24hr지난 zebrafish embryo의 발생초기신경세포의 모습.(사진 7장첨부및 설명)

4. Discussion
실험방법과 실험결과에 대한 논의

5. Note & Reference
- Notch Signalling에 대하여

본문내용

1. Introduction
본 실험은 신경, 비신경세포를 만들 수 있는 gene 발현양상을 관찰하여 신경세포(wild type)의 증식과 분화양상에 대해 알아보았다.
야마모또 타다시/센바켄 [공] 편집. 2006년. 세포신호전달 일러스트맵,. 월드사이언스. p189~p231
신경발생이란, 성체의 뇌가 고도의 고차기능을 운영하기 위해서는, 태생기에 다종류의 뉴런이 분화하여 결정된 위치에 배치되어, 그들 사이에 정확한 신경 네트워크가 형성되는 것이 필요하다. 이 복잡한 신경계의 구축은, 유전적인 프로그램에 의해 제어되는 신경발생 초기과정과, 뉴런의 전기적 활동에 의존한 후기 과정에 의해 야기된다. 본 실험에 관련된 신경발생 초기 과정의 메커니즘에는 신경판의 유도, 신경관의 패턴 형성, 뉴런과 글리어세포의 분화, 뉴런의 이동, 뉴런의 축색신장, 시냅스의 형성이 있다.
초기발생이란, 다세포생물에 있어서, 단세포인 난은 수정이라는 신호를 받아 세포분열을 개시하여, 여러 가지 개성을 지닌 세포의 집합체인 개체로 성장한다. 세포는 세포 외에 존재하는 인자에 의해 자극을 받아, 시그널을 핵 내로 전달하고, 정해진 세트의 유전자 발현을 제어함으로써 새로운 개성을 획득한다. 또한 자신 또는 다른 세포에 자극을 주어, 새로운 시그널 전달을 낳는다. 초기 발생은 이러한 일련의 시그널 전달의 고차적인 축적에 의해 진행한다. 초기발생에서의 보디플랜의 결정에는 몇 가지 인자의 편재, 이른바 “morphogen"의 존재가 중요하다. 한 인자는 미수정란에 있어서 이미 편재해 있고, 수정 직후부터 보디 패터닝에 영향을 미친다. 또한 수정 후 배의 일부에 새로이 국한된 인자도 존재한다. 이들 조합에 의해, 우선 최초로 초기 발생에 있어서 중요한 플랜 결정인 3배엽 결정이 이루어진다. 이어서 전후 축의 결정, 특정 조직, 기관 분화 등이 이루어지게 된다. 물론, 이때도 세포 간․세포내 시그널 전달이 중요한 역할을 한다.
http://kin.naver.com/db/detail.php?d1id=11&dir_id=1111&eid=4wMA0YHKAf26aYzFuXLJfnLSo8oLZOec&qb=aHlicmlkaXphdGlvbg==
‘Whole-mount In Situ Hybridization’이라는 실험 주제는 발생학에서 생물학적인 시료를 대상으로 특정 유전자의 발현정도, 위치를 조사하는 방법 중 시료전체를 고정시켜서 특정유전자의 발현양상을 시료 전체에 걸쳐 관찰하는 방법이다. 흔히 생물학 책에서 볼 수 있는 발생하는 배아 등의 유전자 발현지역이 색깔로 나타나는 사진 중 일부가 이 방법에 의하여 만들어진 것이라 할 수 있다. 더 자세히 말하자면, 병의 원인 유전자나 어떤 형질을 코드하는 유전자가 발견된 경우, 이들 유전자 자리를 염색체 상에 특정하는 것이 가능해진다. 먼저, 분열 중기 염색체를 슬라이드글라스 위에 도말 후, 변성시켜 한가닥 사슬로 해둔다. 이 염색체에 isotope나 형광색소로 표식한 바 유전자(표식 probe)를 올려 반응시키면, 표식 probe는 상보성이 있는 영역에 결합(hybridize)한다. 그리고 현미경으로 관찰하면, 표식 probe가 결합한 염색체 번호 및 영역을 특정 할 수가 있다.

참고자료

· 없음