[생물공학] FISH

최초 등록일
2002.11.30
최종 저작일
2002.11
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*기본원리, 시행방법 및 응용
*FISH의 응용

본문내용

-기본원리, 시행방법 및 응용
in situ hybridization (ISH)은 염색체, 세포분열 간기 혹은 중기의 세포 및 조직절편에서 특정 DNA 혹은 RNA sequence를 검색 하는 기법이다. 이 기법에 의해 DNA, mRNA 및 단백질 수준에서 유전자 활동에 관한 현미경적 정보를 제공받을 수 있다. 이 기법은 약 20년전 Gall과 Purdue (1969) 및 John 등 (1969)에 의해 각각 개발되었다. 이 시기엔 단지 방사선 동위원소를이 용하여 핵산을 label할 수 있었으며 autoradiography만이 hybridized sequences를 확인할 수 있는 유일한 수단이였다. 게다가 mo lecular cloning이 불가능하였으므로 고전적인 생화학 방법에 의하여 sequences를 분리정제 하였다. 핵산의 molecular cloning과 개선된 radiolabelling 기법에 의해 ISH는 급진전하게 되었다. 예를 들면, 단지 수백 base pair의 DNA sequence를 염색체에서 autoradiography에 의해 검색할 수 있게 되었으며 여러세포에서 적은 수의 mRNA 분자를 검색할 수 있 게 되었고 십여년전 부터 화학적으로 합성된 radioactively labeled oligonucleotides를 이용한 직접 mRNA의 검색이 가능하게 되었다. 높은 민감도와 폭 넓은 응용범위에도 불구하고 ISH의 이용은 제한적 이였다.

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없음

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