형질전환(transformation) 실험보고서

소개

E.coli transformation 실험 보고서 입니다.
형질전환의 원리. 저항상이 나타나는 원리, 형질전환 방법,competent cell에 대해 자세히 정리 되어 있습니다.

목차

1. Transformation의 원리
(1) 형질전환의 시작
(2) 형질전환의 메커니즘
(3) E.coli의 형질 전환(transformation)

2. 실험재료

3. 실험방법
(1) competent cell 제조
(2) transformation 방법

4. 실험결과

5. 실험고찰

6. 참고문헌

본문내용

1. Transformation의 원리

(1) 형질전환의 시작

형질전환은 외부로부터 주어진 DNA에 의하여 생물의 유전적인 성질이 변하는 일을 말한다. 형질전환은 1928년 영국의 F.그리피스가 폐렴쌍구균(肺炎雙球菌)을 이용하여 실시한 실험이 계기가 되어 발견되었다. 다당류로 이루어진 두꺼운 막, 즉 협막(莢膜)을 가진 S형균으로부터 DNA를 추출하여 이것을 다당류성 협막을 가지지 않은 R형균에 작용시키면 R형균의 일부가 S형균으로 변한다. 이것은 S형 세균의 DAN가 R형 세균 속에 들어가서 유전자 발현을 하기 때문이다. 전환을 일으키는 데 필요한 DNA의 최소량은 약 10만분의 1 mol이며, DNA의 single strand를 주는 것보다도 double strand를 주는 쪽이 전환을 일으키기 쉽다. 형질전환 실험에 의하여 유전자의 본체가 DNA라는 것이 밝혀졌다. 그러나 고등생물에 있어서도 세균류에서 볼 수 있는 것 같은 형질전환이 일어나는지 어떤지는 아직 밝혀지지 않았다.

(3) E.coli의 형질 전환(transformation)

① Competent cell

DNA를 받아들일 수 있는 능력을 가진 cell을 말하며, E.coli strain을 0.1M CaCl2 처리를 통하여 얻을 수 있다. 보통 사용하는 E.coli 균주는 M13 phage DNA 경우 XLI-Blue가 사용되며 plasmid transformation을 위한 균주는 DH5α 또는 XLA-Blue 등이 사용된다.

참고자료

· 일반미생물학, 분자생물학