[생물실험, 의학, 자연과학, 생물, 화학]세균의 형질전환
*영*
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소개글
1. Introduction미생물학 실험을 수행하는 데 있어서 가장 기본이 되는 재료가 DNA이므로 많은 양의 DNA를 확보하는 것이 무엇보다 중요하다. 이를 수행하기 위해 외부 DNA를 숙주 세포 내로 도입시키는 방법인 형질전환(Transformation)을 이용하는데 이 방법은 박테리아 세포에 물리적 내지는 화학적 자극을 주어 Plasmid DNA를 받아들일 수 있는 상태로 만들어, DNA가 세포 내로 들어가게 한 다음, 이들 형질 전환된 세포들을 배양함으로써 이루어진다. 이처럼 DNA를 다량으로 얻는 것 이외에도 Library DNA나 실험실에서 조작된 Recombinant DNA plasmid를 형질 전환하여 여러 가지 실험에 이용할 수 있다. 이번 실험을 통해서 형질전환의 원리에 대해 알아보고, 이 때 필요한 Plasmid 의 특성, 용도에 대해 조사하여 본다. 그리고 실험을 위해서 E. Coli 를 배양할 수 있어야 하고, 형질 전환된 균과 형질전환이 되지 않은 균들을 구분하여 형질 전환된 균의 Plasmid를 분리해 전기영동을 할 수 있어야 한다.
(1) Transformation
형질전환. 이 말은 수용하는 세포가 외래 DNA를 받아들여 복제하는 것을 의미한다. 형질전환으로 세포가 원래 갖지 않는 성질, 즉 형질을 부여할 수 있다.
형질전환을 야기하는 물질을 형질전환요소(Transforming Principle)라 부르는데, 바로 DNA가 형질전환요소임이 규명되었다.
형질전환의 방법에는, ① Trans gene을 가진 바이러스를 숙주세포 흡착시키는 방법, ②Projectile gun을 이용하는 법, ③바늘 injection(동물세포의 경우 크기가 크므로 가능) 등이 있다. ④화학적인 방법(chemical method)이 있다.(이번실험에서는 chemical method를 사용한 것 같다.)
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목차
Abstraction1. Introduction
2. Material and Procedure
3. Result
4. Discussion
본문내용
1. Introduction미생물학 실험을 수행하는 데 있어서 가장 기본이 되는 재료가 DNA이므로 많은 양의 DNA를 확보하는 것이 무엇보다 중요하다. 이를 수행하기 위해 외부 DNA를 숙주 세포 내로 도입시키는 방법인 형질전환(Transformation)을 이용하는데 이 방법은 박테리아 세포에 물리적 내지는 화학적 자극을 주어 Plasmid DNA를 받아들일 수 있는 상태로 만들어, DNA가 세포 내로 들어가게 한 다음, 이들 형질 전환된 세포들을 배양함으로써 이루어진다. 이처럼 DNA를 다량으로 얻는 것 이외에도 Library DNA나 실험실에서 조작된 Recombinant DNA plasmid를 형질 전환하여 여러 가지 실험에 이용할 수 있다. 이번 실험을 통해서 형질전환의 원리에 대해 알아보고, 이 때 필요한 Plasmid 의 특성, 용도에 대해 조사하여 본다. 그리고 실험을 위해서 E. Coli 를 배양할 수 있어야 하고, 형질 전환된 균과 형질전환이 되지 않은 균들을 구분하여 형질 전환된 균의 Plasmid를 분리해 전기영동을 할 수 있어야 한다.
(1) Transformation
형질전환. 이 말은 수용하는 세포가 외래 DNA를 받아들여 복제하는 것을 의미한다. 형질전환으로 세포가 원래 갖지 않는 성질, 즉 형질을 부여할 수 있다.
형질전환을 야기하는 물질을 형질전환요소(Transforming Principle)라 부르는데, 바로 DNA가 형질전환요소임이 규명되었다.
형질전환의 방법에는, ① Trans gene을 가진 바이러스를 숙주세포 흡착시키는 방법, ②Projectile gun을 이용하는 법, ③바늘 injection(동물세포의 경우 크기가 크므로 가능) 등이 있다. ④화학적인 방법(chemical method)이 있다.(이번실험에서는 chemical method를 사용한 것 같다.)
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참고 자료
․Garrett & Grisham(1997) Biochemistry 1st, p.256-264, Sauders College Publishing, Virginia․George M. Malacinski(2004) 분자생물학 4th, p.100-109, Worldscience, Seoul
․저자 공저(1994) 生物科學 4th, p.360,368, academicbook, Seoul
․Ulrich Ketting; Andre Koltermann; Retra Schwille; Manfred (1997) Real-time enzyme kinetics monitored by dual-color fluorescence cross-correlation spectroscopy : vol 95 pp 1416-1420 BIOCHEMISTRY
․YANG-GYUN KIM AND SRINIVASAN CHANDRASEGARAN (1994) Chimeric restriction endonuclease : vol 91 pp 883-887 BIOCHEMISTRY
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