[미생물실험]그람염색법

소개

세균동정, 분류의 중요한 지표인 그람 양성균과 그람 음성균을 구분, 형태학적 특성을 조사하고 동시에 분별 염색의 원리와 조작법을 습득한다.
- Hucker의 변법 사용

목차

실 험 제 목
실 험 목 적
실 험 재 료
실 험 방 법
실 험 결 과
고 찰

본문내용

실험 제목
Gram Staining ( 그람염색법 )

실 험 목 적
세균동정, 분류의 중요한 지표인 그람 양성균과 그람 음성균을 구분, 형태학적 특성을 조사하고 동시에 분별 염색의 원리와 조작법을 습득한다.
- Hucker의 변법 사용

실 험 재 료
균주 - 배지에서 24시간 배양한 균주
광학 현미경, 무균대, 알콜램프, 백금이, Sild glass, Cystal violet, Gram`s iodine, 95% alcohol, Safranin, ceder oil, 증류수, lens paper

실 험 방 법


1. Slide glass를 alcohol로 깨끗이 닦아 지방을 제거한다.

2. Slide glass위에 멸균 생리수를 한 방울 떨어뜨린다.

3. 균주를 도말 , 열 고정 시킨다.

4. Crystal violet 염색시약을 가하여 1분간 염색시킨다.
→ 흐르는 물로 염색액을 씻어내고(뒷면 세척) 건조시킴.

5. Gram`s Iodine 용액을 가하여 1분간 고정 →간접세척→건조

6. 95% Ethanol에서 30초간 탈색 → 건조

7. Sfranin O 용액을 가하여 10초간 염색(대조염색)→간접세척→건조

8. 검경
- 현미경 관찰
① 프레파라트를 재물대 위에 올려놓고 재물대 클립으로 고정시킨다.
② 염색부분이 맞도록 상하조절나사나 좌우조절나사를 조절한다.
③ 조동나사와 미동나사를 조절하여 물체의 초점에 맞추어 관찰한다.
조동나사를 움직여 상이 나타나면 미동나사를 이용하여 선명한 상을
찾는다.
④ 유침의 경우(1000배 이상)에는 cedar oil 한 방울을 떨어뜨려 ③과
같이 조절한다.

참고자료

· 없음