[분자생물학]분자세포생물학 관련 실험에 대하여

소개

분자세포생물학 관련 실헙법 소개

목차

#Cell culture

#동결보존(Cryopreservation)

#ELISA(Enzyme linked Immunosorbant Assay)

#Agarose gel Electrophoresis

#SDS Page

#Western Blotting

#Northen Blotting

#PCR(polymerase chain reaction)

#RT(reverse transcription)-PCR

#DNA Chip

본문내용

#Cell culture
cell line(세포주)은 현재 모든 생명과학 분야의 연구에 있어서 필수적으로 요구되는 가장 기본적인 실험소재이다. 분자세포생물학에 관련된 실험을 하기 위해선 in vitro에서 실험할 수 있도록 동물세포의 배양이 필수적이라 할 수 있다. cell culture에 앞서 배양에 사용되는 플라스크, 시약, 배지 등 거의 모든 도구들은 항상 무균적으로 유지되어야한다. cell culture를 통해 배양된 세포는 여러 가지 실험에 사용할 수 있고 필요시 동결보존을 통해 cell을 보관할 수 있다.

#동결보존(Cryopreservation)
세포 배양 및 유지의 어려움을 극복하고 세균이나 mycoplasma 등으로부터의 오염을 방지하며 세포의 형질전환을 방지하기 위해 cell을 필요시 동결보존 한다.
또한 동결보존은 실험의 재현성을 확립하는데 중요하다. 동결보존시 주의할 점은 세포의 파괴를 방지하기 위해 동결 속도는 천천히하고 해동시에는 급속히 해야하는 것이다.

#ELISA(Enzyme linked Immunosorbant Assay)
효소반응을 이용하여 특정 항원이나 항체의 존재와 양을 측정할 수 있다. 높은 특이성과 민감도로 정성,정량분석에 이용된다. 항체나 항원에 동위원소, 형광물질, 효소 등을 결합 시켜 항원-항체반응을 관찰하면 극소량의 항원이나 항체도 검출할 수 있다. 에이즈 반응 검사도 이 방법을 이용한다.
#Agarose gel Electrophoresis
아가로스 겔에 DNA와 loading dye를 넣고 전기를 걸어주면 DNA는 인산기 때문에 음전하를 띠므로 겔을 타고 양전하 방향으로 움직이게 된다. 이때 움직이는 속도는 DNA의 크기, 모양에 따라 다르므로 매질내에서 종류에 따라 분리하게 되면 전기영동은 DNA의 크기, 분리, 양의 확인이 가능하다. 이때 겔 맨 좌측에 size marker를 같이 걸어주어 DNA의 크기를 알 수 있게 된다.

참고자료

· 없음