transformatin 예비, 결과레포트

소개

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목차

1) 실험 목적
2) 실험 이론
3) 실험 시약 및 기구
4) 실험방법
5) 참고사항
6) 참고문헌

본문내용

1) 실험 목적
- 재조합된 DNA를 competent cell에 삽입하여 형질전환 후, ampicillin과 x-gal이 들어 있는 LB plate에서 배양하여 colony를 형성시키고 색깔로 재조합 DNA를 판별한다.
- 형질전환 기술을 익힌다.
- Lac Operon의 Mechanism을 이해한다.

2) 실험 이론
① 형질전환
세포 또는 organism에 외부 유전자를 도입시키는 것으로 외부 DNA를 숙주세포(Host cell)에 넣어 세포가 원래의 성질과 다른 새로운 유전형질을 갖는 것을 말한다.

박테리아의 형질전환(Transformation)이란 유전자가 삽입된 플라스미드 vector를 대장균 세포 속으로 도입하는 과정이다. 형질전환은 가능한 한 효율적인 방법을 찾는 것이 중요한데, Large DNA는 small DNA보다 형질전환 효율이 떨어지며 DNA의 양이 너무 많아도 좋지 않으므로 적당한 길이와 적당한 양의 DNA를 사용하는 것이 중요한 요소이다.

자연계에서 형질전환은 박테리아가 유전자 정보를 얻는 주요 과정은 아닌데 이것은 실험실에서 몇 가지 종(Bacillus와 Streptococcus종)만이 쉽게 형질전환 될 수 있다는 사실에서 알 수 있다. 대장균을 포함한 대부분의 박테리아는 일반적인 조건에서 제한된 양의 DNA만을 도입한다. 이러한 종을 효과적으로 형질 전환하기 위하여 DNA 도입 능력을 강화하는 물리적, 화학적 처리를 거쳐야만 한다.

한 박테리아에서 다른 박테리아로의 DNA 이동을 위한 형질전환이 일어나기 위해서는 수용자 박테리아가 일시적으로 수용 가능한 상태(a state of competence)로 존재해야 하는데 자연계에서는 기아(starvation)나 세포 밀도와 같은 환경적 변화로 인해 유도될 수 있고, 혹은 실험실에서 인위적으로 만들 수도 있다.

유전자 일부를 동일한 세대의 이웃 박테리아에 전달하는 수평적 유전자 전달 방식은 공여자 세포의 DNA 일부를 수용자 세포의 유전자로 통합한다. 수평적 유전자 전달 방식은 크게 형질전환, 접합, 그리고 박테리오파지에 의한 형질도입으로 크게 3가지로 나뉜다.

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