[생화학] 흰쥐의 장기의 석출과 총 지질의 추출 및 확인

목차

1. Title
2. Date
3. Principle
4. Apparatus & Reagents
5. Procedure
6. Result
7. Discussion
8. Reference

본문내용

지질의 생화학적 특성을 이해하고 이를 이용해 지질을 분리하고 정량하는 방법과 사람의 지질 대사 상태를 이해한다.
① 흰쥐 조직에서 지질 추출
② 박층 크로마토 그래피의 원리 이해
③ TLC를 이용해 지질의 분리, 동정
④ 각 인산 지질의 Rf값
⑤ 각 장기별로 인산지질의 종류와 구성비의 차이를 이해

4. Principle
인지질은 모든 생체막의 주요 구성성분이고, 세포 밖의 신호를 세포 안으로 전달하는 신호전달 체계에서 중요한 역할을 담당하고 있다. 이러한 인산지질은 동물의 각 장기마다 그 분포가 다르며, 생체막의 외측막과 내측막의 인산지질의 종류와 구성비도 다르다.
이 실험에선 흰쥐의 여러 장기에 존재하는 총 지질을 추출한 후 특히 인지질만이 TLC로 분리해 나가고 각 장기별 그 분포 양상을 살펴본다.

1) 흰쥐의 장기의 추출과 총 지질의 추출
지질을 물과 같이 극성도가 높은 용매에는 녹지 않으므로 극성도가 낮거나 비극성인 유기용매를 사용해 추출한다. 이들 유기 용매는 휘발성이 높아 취급할 때에 흡입하지 않도록 주의하며 chemical hood 안에서 다룬다.
chloroform은 발암제로 알려져 있고, 비지질 성분도 많이 추출하기 때문에 이 실험에선 hexane-isoproply alcohol을 이용한 추출법을 사용한다. 이 추출용매는 비극성과 극성 지질을 모두 녹이며 인체의 해가 적고 비지질 성분은 거의 추출하지 않으므로 시료를 여과하지 않고 원심분리하여 추출액을 얻을 수 있다.

참고자료

· ① Cell Biol.「The role of lipid signaling in constitutive membrane
· traffic」, 1997년, p519-526.
· ② 채범석 역, 「생화학」, (주) 서울외국서적, 1987년, p277~279
· ③ Larry G. Scheve, 「기본 생화학」, 학문사, 1996년, p371~376
· ④ 두산세계대백과사전
· ⑤ 브리태니커 백과사전