[미생물] Gram staning & 3% KOH test (미생물 염색)

소개

이번학기 미생물 첫 실험레포트 입니다..
미생물을 배양해서 Gram 염색을 통해
양성 음성의 여부를 확인하는...
많은 도움 되시길..

목차

1. Instroduction
1) Serial dilution & CFU
2) Gram Staining 원리

2. Materials & Method
1) Materials
(1) 기자재
(2) 시약
2) Method

3. Result

4. Discussion

5. Reference

본문내용

1. Instroduction

1) Serial dilution & CFU
(1) Serial dilution
- Serial dilution(계단 희석, 계열 희석)은 생균수를 측정하는데 이용되 는 방법으로, 원리는 하나의 싱글콜로니는 하나의 세포 즉, 하나의 세 균에서 형성된 것이므로 싱글 콜로니 하나는 균 하나라고 볼 수 있다.
이 콜로니가 자란 것은 하나의 세포에서 시작된 것으로 보면된다. 페트 리디쉬(평판배지)에서 액체배양액에서 자란 균을 마이크로 파이펫으로 떨어뜨려서 Spreading 도말방법으로 도말을 한 뒤 자란 싱글콜로니의
수를 세는 것이 생균수측정법이자 평판배양법이다. 하지만 원액을 도말
하게 되면 굉장히 많은 세균이 자라게 되므로 콜로니간의 뭉침으로 콜
로니 카운트를 할 수 없게 된다. 그래서 희석을 통해 알맞은 수의 콜로 니를 생성하게 하는 것이 희석평판배양법이다. 원리는 원액을 saline용 액(0.8% 생리식염수)에 희석을 시키는 것으로 10배, 100배, 1000배 그 이상을 하게 된다. 예를 들면 원액 1㎖을 saline용액 9㎖에 넣게 되면
10배가 희석이 된다. 다시 이 희석액 1㎖을 saline용액 9ml에 넣게 되
면 총 100배 희석이 되는 것이다. 이러한 과정을 반복해서 희석배수를 늘려간다. 마지막으로 균수를 도출하는 방법은 예를 들어 균이 들어있 는 원액을 1000배 희석한 균액 0.1ml을 평판배지에 도말하여 콜로니 카 운트를 하였더니 50개가 나왔다면, 50(콜로니수) x 103(희석배수) x 10 (단위환산) = 50만CFU/㎖ 이다. 평판배지에 나타나는 적정 콜로니수는 30～300개가 된다.

참고자료

· - 송홍규,오계현 공저 “최신환경미생물학” 동화기술 1994, 93～124page
· - 이정일,한영환 공저 “실험생물학” 광림사 1998, 39～41page