[생물,화학,유전] 단백질전기영동(크로마토그래피)

소개

젤 전기영동과 여러가지 크로마토그래피에 대해서 조사해 놓았습니다. 전기영동의 실험적 순서(protocol)을 참고로 첨부해 놓았습니다. 많은 도움 되세요.

목차

* 단백질 분리와 전기영동
* 단백질의 분리와 정제에 이용되는 크로마토그래피.
* 2D-electrophoresis
1) SDS-PAGE
2) IEF

* Peptide mass fingerprints : MALDI-TOF MS
1) Trypsin digested peptides
2) MALDI-TOF MS의 원리

* 전기영동의 원리
* 전기영동법의 종류
1) CELLULOSE ACETATE지 전기영동
2) 한천젤 전기영동
3) 녹말젤 전기영동
4) 폴리아크릴 아마이드젤 전기영동
5) SDS 폴리아크릴 아마이드젤 전기영동
6) ISOELECTRIC FOCUSING

-실 험-
A. 배양세포로부터 단백질의 분리
B. 단백질의 정량
C. 단백질의 전기영동(SDS-PAGE)

본문내용

* 단백질 분리와 전기영동

단백질을 분리하는 방법은 분리하고자 하는 단백질이 무엇인가에 따라서 매우 다양하다. 단백질이 핵에 존재하는지 세포질에 존재하는지에 따라서, 또 단백질의 성질에 따라서 적당한 방법을 선택하여 써야 한다. 가장 처음에는 조직이나 세포로부터 핵단백질이나 세포질단백질 또는 전체단백질을 분리하는 것으로 시작하며, 이로부터 수많은 정제과정을 거쳐야 원하는 단백질을 분리할 수 있다. 이 과정은 대단히 노력, 끈기, 자본을 요하는 것으로써 평생동안 한가지 단백질을 정제하는 과학자도 있음을 생각해야 한다. 여기에서는 정제되지 않은 전체단백질(whole cellular protein)을 분리하는 방법만을 소개하기로 한다. 물론 여기에도 수많은 방법이 있을 수 있다. 그 전에 단백질의 분리 이전의 3차구조 풀림과 단백질의 크기를 측정하는 법을 알아보도록 한다.


* 단백질의 분리와 정제에 이용되는 크로마토그래피.

단백질은 크로마토그래피(chromatography)에 의해 분리 정제될 수 있다.
일반적으로 단백질의 원료는 조직이나 미생물이다. 어떤 단백질이든 정제과정의 첫 번째 단께는 이러한 세포들은 깨트려서 그들의 단백질을 유리시켜 조추출액(crude extract)이라 부르는 용액상태로 만드는 일이다. 필요하면 세포하 분획을 준비하거나 특정 소기관을 분별하기 위해 분별 원심분리법(Differential centrifugation)응 사용할 수도 있다.

참고자료

· 본문에 소개되어 있음.