[A+ 결과보고서_조교채점완료]생화학실습_유전자 증폭 실험(pcr)

소개

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목차

1. 실험 목적
2. 이론
3. 실험 시약 및 기구
4. 실험방법
5. 실험결과
6. 고찰
7. 참고문헌

본문내용

1. 실험 목적
PCR 을 이해하고 PCR machine 을 사용하여 DNA 증폭 후 전기영동을 통해 원하는 부분의 증폭이 잘 진행되었는지 확인한다.

2. 이론

1) PCR
PCR 은 DNA 중합효소를 이용해 특정한 DNA 서열을 시험관 내에서 반복적으로 복제하여, 짧은 시간 안에 수백만 배로 증폭하는 분자생물학 기술이다. 이 기술은 매우 적은 양의 DNA 만으로도 원하는 부위를 정밀하게 증폭할 수 있어, 유전자 분석, 질병 진단, 유전자 클로닝, 법의학 등 다양한 분야에서 활용된다. DNA 증폭을 위해 PCR 기기를 사용하였다. 이 장치는 온도를 주기적으로 조절하여, PCR 반응을 자동으로 수행하므로 thermal cycler 라고도 부른다.[24] PCR 반응을 수행하기 위해서는 다음의 네 가지 주요 구성요소가 필수적으로 포함되어야 한다.
Template DNA (주형 DNA)
증폭하고자 하는 특정 DNA 서열이 포함된 DNA 로, 이번 실험에서는 역전사 과정을 통해 얻은 GAPDH 유전자의 cDNA 가 사용되었다. 역전사과정은 mRNA 를 주형으로 하여 상보적인 DNA(cDNA)를 합성하는 과정으로, 이때 반드시 역전사효소(reverse transcriptase)의 작용이 필요하다. GAPDH(Glyceraldehyde 3_phosphate dehydrogenase)는 해당과정에 관여하는 효소이다.[25]

참고자료

· thermofisher, Nuclease-Free Water (not DEPC-Treated)
· Wikipedia, Parafilm
· 위키백과, 비커
· Wikipedia, Buffer solution
· Wikipedia, Centrifuge
· Wikipedia, RNA
· Wikipedia, Ethanol
· Wikipedia, Deoxynucleotide triphosphates (dNTPs)
· Wikipedia, Reverse transcriptase
· Wikipedia, Complementary DNA (cDNA)
· Wikipedia, Thermal cycler
· 위키백과, 피펫
· Wikipedia, Microcentrifuge tube
· Wikipedia, Primer
· Wikipedia, DNA polymerase
· Wikipedia, Agarose gel electrophoresis
· Wikipedia, gel electrophoresis
· Wikipedia, TAE buffer
· Wikipedia, DNA ladder
· Wikipedia, Erlenmeyer Flasks
· Wikipedia, Agarose
· Nippongenetics, MIDORI Green Advance
· Wikipedia, Quantitative PCR
· Wikipedia, Polymerase Chain Reaction (PCR)
· Wikipedia, Glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase
· Wikipedia, Base pair