(A+레포트)[화공생물공학단위조작실험1] 5.단백질 정량법 비교(BCA, Bradford)(예비)

소개

화공생물공학실험단위조작실험1 A+ 받은 레포트입니다.
열심히 썼던 레포트인만큼 타인과 공유는 자제 부탁드립니다.

레포트 채점 기준은 해당 학기의 담당 조교에 따라 달라질 수 있으며, 주관적인 평가가 들어갈 수 있습니다.
사실과 다른 내용이나 계산 오류 등이 있을 수 있습니다.
구매한 자료를 검토 없이 그대로 사용하셔서 발생하는 불이익(표절률 등 포함)은 책임질 수 없습니다.

*참고사항
현재 예비 레포트는 만점 2000원, 그외 1500원/ 결과 레포트는 만점 2500원, 그외 2000원에 판매하고 있으니 참고 부탁드립니다!

목차

1. Introduction
2. Materials
3. Methods
4. References

본문내용

1-1. 실험 목적
Bicichoninic Acid(BCA)와 Bradford를 이용한 단백질 정량법을 이용하여 미지 시료의 단백질 농도를 측정하고 두 방법의 결과를 비교분석한다. 또한 미지시료를 분석함에 있어 어떤 방식이 적절한지 판단한다.
1-2. 실험 원리
단백질 정량이란 sample 내에 포함된 단백질의 양 또는 농도를 확인하는 과정이다. 세포 또는 조직에서 추출한 sample에는 다양한 단백질이 서로 뒤엉켜 있기 때문에 실험하고자 하는 특정 단백질의 양을 비교 및 확인하기 위해서는 sample간의 단백질 총량을 맞춰주어야 한다. 이때 단백질 정량 과정을 통하여 총량을 맞출 수 있으며 단백질을 정량하는 방법에는 여러 가지가 있다. 단백질을 정량하는 법에는 대표적으로 비색법과 전기영동이 있다.
▶ BCA Assay
(1) 원리
BCA Assay는 Lowry Assay를 개량한 것으로, Folin 시약 대신 BCA 시약을 사용한다. 단백질이 구리 이온(Cu2+)을 1가 양이온(Cu1+)으로 환원(reduction) 시킬 수 있는 성질을 이용한다. 환원된 구리 이온은 Bicinchoninic Acid(BCA) 분자 2개와 반응하여 보랏빛의 착물을 형성하게 된다. 이 화합물은 파장이 562 nm인 빛 흡수율이 반응 전 BCA나 구리 이온이 담긴 용액에 비해서 높기 때문에 spectrophotometer를 사용해서 흡광도 차이를 측정할 수 있다. 보랏빛 착물이 더 많이 생성이 되면서 흡광도 값이 커지기 때문에 흡광도 값과 단백질 양은 비례한다.
(2) 장점
- 일반적인 버퍼물질에 간섭을 덜 받는다.
- 높은 온도에서 한다면 아주 민감하고 빠른 반응을 할 수 있다.
- 계면활성제와 같이 사용할 수 있다.
- 반응시약이 안정적이다.

참고자료

· 동국대학교 화공생물공학과, “화공생물공학 단위조작실험1”, 2023, pp.39-41.
· - 류승훈 외 3인, “화공기초실험”, 휴먼싸이언스, 2012, pp.126~132.
· - 박철호 외 9인, “생명공학실험서”, 강원대학교 출판부, 2009, pp. 34-38