[서울대학교 화학실험 A+] HPLC에 의한 아데닌과 카페인 분리 결과보고서

소개

"[서울대학교 화학실험 A+] HPLC에 의한 아데닌과 카페인 분리 결과보고서"에 대한 내용입니다.

서울대학교 24학년도 1학기 화학실험 보고서이며, 해당학기 A+를 받았습니다.

해당 자료를 그대로 작성할 시, 표절 문제가 발생할 수 있으므로 참고용으로만 사용하시길 바랍니다.

목차

1. Introduction
2. Raw data & data analysis
3. Discussion
4. Assignment
5. Reference

본문내용

1. Introduction
크로마토그래피는 혼합물을 분리하는 방법으로, 시료를 주입하면 시료는 이동상에 의해 운반된다. 이때, 시료 물질과 정지상 간 상호작용이 발생하며, 속도 차이가 발생하고, 각기 다른 retention time을 가지게 된다. Retention time은 시료를 주입하고 용리되기까지의 시간 간격을 의미한다. [1]
HPLC (High-Performance Liquid Chromatography)는 액체 크로마토그래피의 한 종류로, 펌프를 이용하여 높은 압력으로 이동상을 흘려보내 시료를 분리해내는 방법이다. HPLC는 주로 역상 크로마토그래피의 원리를 이용하는데, 이는 정지상보다 이동상의 극성 정도가 더 높아, 무극성 물질이 나중에 용리된다. 역상 크로마토그래피는 주로 이동상에 유기 용매를 포함하는 완충 수용액을 사용하고, 정지상에는 silica 기반의 C18 물질을 사용한다. 시료를 분리하고 검출하면 용리 시간을 x축, 검출 신호의 사이즈를 y축으로 하는 크로마토그램을 얻을 수 있다. 시료의 농도에 따른 크로마토그램의 peak 면적을 이용해 검량선을 그릴 수 있고, 농도를 모르는 미지시료의 peak 면적을 계산하고 검량선 식에 대입하여 농도를 구할 수 있다. [1]
Beer-Lambert 법칙은 용액의 농도(C)와 빛 사이의 관계식..

<중 략>

2. Raw data & data analysis
*수업시간에 진행했던 실험에서, 시료를 올바르게 제작하였음에도 기기로 분석을 했을 때, 크로마토그램이 잘 나오지 않아, 조교님께서 제공해주신 데이터를 분석하였다.
실험 1. 아데닌과 카페인의 분리
300 μM 아데닌 용액과 500 μM 카페인 용액을 HPLC로 260 nm 파장에서 5분간 수집해 얻은 크로 마토그램을 각각 그림 1, 그림 2에 나타냈다.

각 시료에서의 Retention time(min)과 peak의 높이(mV)를 표 1에 나타냈다.

참고자료

· Lundanes, E., Reubsaet, L., & Greibrokk, T. (2014). Chromatography: Basic principles, sample preparations and related methods. Wiley-VCH. pp. 2, 17, 47, 68-69, 192-193
· 김희준. (2010). 일반화학실험. 자유아카데미. pp. 67-68
· Bakalyar, S. R., Bradley, M. P. T., & Honganen, R. (1978). The role of dissolved gases in high - performance liquid chromatography. Journal of Chromatography A, 158, 277–293.
· https://doi.org/10.1016/s0021-9673(00)89973-2
· 5 degassing methods. Shimadzu. (n.d.). https://www.shimadzu.co.kr/service-support/technicalsupport/analysis-basics/lib/lctalk/s5/05.html