생화학 실험 보고서 - 형광현미경으로 세포 관찰

소개

생화학 실험 보고서입니다.
DAPI를 이용하여 DNA 염색 후 형광현미경으로 세포를 관찰하였음.

목차

1. 실험목적
2. 이론
3. 실험 시약 및 기구
4. 실험 방법
5. 실험 결과
6. 고찰
7. 참고 문헌

본문내용

1. 실험목적
DAPI를 이용한 DNA 염색으로 MCF-7 cell을 염색한 뒤, 형광현미경으로 세포를 관찰한다.

2. 이론
형광염색은 세포 내 소기관 같은 것을 검출하기 위해 형광 stain을 사용하여 염색시키는 것이다. 형광 stain은 DAPI, Alexa568, FM 1-43 등이 있고, 이번 실험에서 사용할 것은 DAPI이다. DAPI(4’, 6-diamidino-2-phenylindole)의 구조는 다음과 같다.
이 형광 stain인 DAPI는 DNA를 염색하며, 이렇게 DAPI를 이용한 DNA 염색 방법을 DAPI staining이라고 한다. DAPI로 염색하면 푸른색의 형광을 detection하여 염색된 부위를 알 수 있다. DAPI staining은 비교적 높은 해상도의 이미지를 얻을 수 있고, 쉽고 간단하여 핵을 염색하거나 apoptosis를 검출하는데 유용하다. DNA를 염색하여 핵과 chromaitn의 morphology를 확인하거나, 세포 핵으로의 투과성을 빛 세기를 기준으로 비교할 때 사용된다.
DAPI staining 시에는 DAPI가 DNA에 잘 결합할 수 있도록 알맞은 buffer를 사용하고, 빛에 노출되지 않도록 해야한다. 또한 2ug/ml 정도로 메탄올에 희석한 DAPI work solution과 pH7.0 buffer가 필요하다.

참고자료

· 분자세포생물학백과사전, 형광현미경
· 간호학대사전, 파라포름알데하이드
· 생명과학대사전, 트리톤
· 두산백과사전, cover glass