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생화학 실험/실습 보고서 (형광 현미경을 통한 세포의 관찰)2025.01.231. 형광 현미경을 통한 세포 관찰 이 보고서는 생화학 실험/실습 과정에서 형광 현미경을 사용하여 세포를 관찰한 내용을 다루고 있습니다. 실험 목적은 세포를 현미경으로 관찰하기 위해 사용되는 염색의 원리를 알아보고 직접 관찰하는 것입니다. 실험에 사용된 주요 시약과 기구, 실험 방법 및 결과가 자세히 설명되어 있습니다. 2. 세포 염색 기술 이 보고서에서는 세포를 형광 현미경으로 관찰하기 위해 사용되는 다양한 염색 기술이 설명되어 있습니다. FM 1-43, Alexa568, DAPI 등의 형광 염색 시약을 이용하여 세포질, 액틴 단...2025.01.23
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생화학 실험 보고서 - 동물세포 배양 및 관찰2025.01.271. 동물세포 배양 이 실험은 MCF-7 세포를 사용하여 동물세포의 배양 과정을 이해하고 관찰하는 것을 목적으로 합니다. 동물세포는 핵, 세포질, 세포막 등의 세포 내 구조를 가지고 있으며, 세포 간 상호작용을 통해 조직과 기관을 형성합니다. 동물세포 배양을 위해서는 적절한 배지, 온도, pH 등의 조건이 필요하며, 계대배양을 통해 세포를 지속적으로 증식시킬 수 있습니다. 이번 실험에서는 부착성 세포인 MCF-7 세포를 사용하여 배양 과정을 거치고, 현미경으로 세포의 변화를 관찰하였습니다. 2. 세포 배양 기술 세포 배양은 인공적으...2025.01.27
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동결 보존된 세포의 해동2025.01.021. 세포 동결 보존 세포 기반의 생물 실험에서는 동결 보존된 세포 stock을 해동하여 배양하는 것이 중요한 과정이다. 동결 보존 시 동결 보호제를 사용하지 않으면 세포가 손상될 수 있으며, 해동 과정에서도 신속한 진행이 필요하다. 동결 보호제로 자주 사용되는 DMSO는 세포에 독성을 가질 수 있어 주의가 필요하다. 2. MCF-7 세포주 MCF-7 세포주는 유방암 환자의 유선 조직에서 얻어낸 상피세포로, transfection host로 사용하기 적합하며 estrogen과 progesterone receptor를 발현하는 Lum...2025.01.02
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생화학 실험 보고서 - 형광현미경으로 세포 관찰2025.01.271. 형광현미경 형광현미경은 형광 또는 인광을 이용하여 관찰하는 광학현미경이다. 시료에 존재하는 형광 물질이 흡수하는 특정 파장을 비추었을 때, 형광물질이 흡수한 빛이 형광 형태로 나오는 긴 파장의 빛을 감지하여 관찰할 수 있다. 형광현미경 사용 시에는 현미경 자체의 빛을 차단하기 위해 lamp를 꺼주고, 은색의 대물렌즈를 사용하며 배율은 항상 작은 것에서 큰 것의 순서로 관찰한다. 2. DAPI 염색 DAPI(4', 6-diamidino-2-phenylindole)는 형광 stain이며, DNA를 염색시킨다. DAPI로 염색하면 ...2025.01.27
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동물세포의 배양 및 관찰2025.01.231. 동물세포 배양 이 실험의 목적은 동물 세포 배양에 대해 알고 실험을 통해 세포의 계대배양 기술을 익히는 것입니다. 실험 방법에는 현미경으로 MCF-7 세포를 관찰하고, 세포를 계대배양하는 과정이 자세히 설명되어 있습니다. 이를 통해 동물 세포 배양 기술을 습득할 수 있습니다. 1. 동물세포 배양 동물세포 배양은 의학 및 생명공학 분야에서 매우 중요한 기술입니다. 이를 통해 다양한 세포 및 조직을 실험실에서 생산할 수 있어 질병 치료, 신약 개발, 줄기세포 연구 등에 활용할 수 있습니다. 동물세포 배양 기술은 지속적으로 발전하고...2025.01.23
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생화학 실험 보고서 - 단백질 분리2025.01.271. 단백질 분리 이번 실험에서는 MCF-7 세포를 이용하여 동물 세포에서의 단백질 분리 과정을 이해하고 단백질 분석 및 연구를 위한 준비를 하였습니다. 단백질 분리를 위해서는 세포를 깨뜨리고 안정적인 버퍼 환경을 만드는 것이 중요합니다. 다양한 방법으로 세포를 파괴할 수 있으며, 이번 실험에서는 scraper를 사용하여 MCF-7 세포를 깨뜨리고 RIPA 버퍼와 protease 억제제를 첨가하여 단백질을 추출하였습니다. 최종적으로 원심분리를 통해 상층액에 분리된 단백질을 -80°C에 보관하였습니다. 1. 단백질 분리 단백질 분리는...2025.01.27
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단백질의 분리2025.01.231. 단백질 분리 실험을 통해 원심분리를 이용하여 세포 내 단백질을 분리하는 방법을 익혔다. 단백질 분리를 위해 세포를 깨고 RIPA 버퍼에 녹인 후 원심분리하여 상층액을 얻었다. 이 상층액에는 세포에서 추출된 단백질이 포함되어 있다. 2. SDS-PAGE SDS-PAGE는 단백질의 크기에 따라 분리하는 기법으로, 단백질이 SDS에 의해 변성되어 전하/분자량 비율이 동일해지면 전기장 내에서 크기에 따라 이동속도가 달라져 분리된다. 이를 통해 단백질의 분자량을 확인할 수 있다. 3. 세포 용해 세포를 깨는 방법에는 homogeniza...2025.01.23
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생화학 실험 보고서 - 전기영동을 통한 단백질 관찰 (SDS-PAGE)2025.01.271. 단백질 분리 및 분석 이번 실험에서는 SDS-PAGE를 사용하여 단백질을 분리하고 관찰하였습니다. SDS-PAGE는 단백질의 크기에 따라 분리되는 원리를 이용하는 전기영동 방법입니다. 실험 결과 MCF-7 세포에서 추출한 단백질 샘플에서 약 45kDa와 60kDa 크기의 단백질이 관찰되었습니다. 이를 통해 MCF-7 세포에 다양한 크기의 단백질이 존재함을 확인할 수 있었습니다. 2. 전기영동 기술 전기영동은 단백질, 핵산 등 생체 고분자를 분리하고 분석하는 데 널리 사용되는 기술입니다. 이번 실험에서는 SDS-PAGE 기법을 ...2025.01.27
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세포 용해를 통한 단백질 추출2025.01.021. 세포 용해 방법 세포 용해(또는 세포 파괴)에 사용되는 다양한 물리적, 화학적 방법을 살펴보고, RIPA 용해 완충액을 사용하여 세포를 파괴하고 세포 단백질을 얻을 수 있다. RIPA 용해 완충액은 세포막, 핵막, 단백질 결합을 모두 분해할 수 있는 강한 계면활성제를 포함하고 있어 세포질, 핵 단백질 등 다양한 단백질을 추출할 수 있다. 2. 단백질 추출 과정 배양 중인 MCF-7 세포를 DPBS로 세척하고 세포 긁개로 세포를 모아 원심분리하여 세포 펠릿을 얻었다. 이 세포 펠릿에 RIPA 용해 완충액을 처리하여 세포를 용해하...2025.01.02
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Colony formation assay A+레포트2025.01.021. Colony formation assay 이번 실험에서는 crystal violet solution을 이용하여 MCF-7 세포를 염색한 후, dish 상의 colony 형성 정도를 관찰하였다. Colony formation assay는 clonogenic assay라고도 불리며, 단일 세포가 colony로 성장하는 능력에 기반을 둔 생체 외(in vitro) cell survival assay이다. 실험 결과 1조와 2조의 세포양은 비슷했지만, 3조는 두 조에 비해 세포양이 적었고, 4조의 경우 육안으로 관찰 가능한 colon...2025.01.02