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BCA assay 정량

"BCA assay 정량"에 대한 내용입니다.
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최초등록일 2024.10.30 최종저작일 2018.03
BCA Assay 단백질 정량 BCA assay 정량
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BCA assay 정량
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    "BCA assay 정량"에 대한 내용입니다.

    목차

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    본문내용

    1. A solution : B soiution = 50 : 1 로 섞는다.
    Ex) 36well X 90µl = 3240 (넉넉하게 3500 µl) → A: 3431µl + B: 68.62µl mix
    90well X 90ul = 8100 → A: 7941ul + B: 158.82ul
    2. Standard용 tube를 준비하여 < 0, 0.125, 0.25, 0.5, 1, 2 >가 되도록 농도를 맞추어 BSA와 D.W를 섞는다.

    <중 략>

    3. Well에 sample과 standard를 10µl씩 분주 후, solution (A + B) 90µl씩 분주.

    참고자료

    · 없음

  • AI와 토픽 톺아보기

    • 1. BCA assay
      The BCA (Bicinchoninic Acid) assay is a widely used method for quantifying the total protein concentration in a sample. It is a colorimetric detection technique that relies on the reduction of copper ions (Cu2+) to cuprous ions (Cu+) by proteins in an alkaline medium, followed by the chelation of the cuprous ions with bicinchoninic acid to produce a purple-colored complex. This complex exhibits a strong absorbance at 562 nm, which can be measured using a spectrophotometer to determine the protein concentration. The BCA assay is a popular choice for protein quantification due to its high sensitivity, wide linear range, and compatibility with a variety of sample types, including cell lysates, tissue homogenates, and purified protein solutions. It is also relatively simple to perform, making it a versatile and accessible technique for researchers in various fields, such as biochemistry, molecular biology, and cell biology. One of the key advantages of the BCA assay is its ability to tolerate the presence of common interfering substances, such as detergents, reducing agents, and salts, which can often interfere with other protein quantification methods like the Bradford assay. This makes the BCA assay particularly useful for analyzing samples that contain these components, such as those obtained from cell culture or protein purification experiments. Additionally, the BCA assay is compatible with a wide range of protein concentrations, typically ranging from 20 μg/mL to 2,000 μg/mL, allowing researchers to accurately quantify both low and high protein concentrations in their samples. This flexibility makes the BCA assay a valuable tool for a variety of applications, including enzyme activity assays, protein-protein interaction studies, and the optimization of protein purification protocols. Overall, the BCA assay is a robust and reliable method for protein quantification that has become a staple in many biochemical and molecular biology laboratories. Its versatility, sensitivity, and tolerance to common interfering substances make it a valuable technique for researchers working with a wide range of protein-containing samples.

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