이화여대 생명과학실험 A+ 리포트(DNA plasmid transfection, Immunoprecipitation)

소개

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목차

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본문내용

1. Introduction
- 실험 목적, 실험에 필요한 기초 지식(ppt 자료 참고!)
*흐름에 맞는 간단한 기초 지식 설명이 포함되면 됩니다.

DNA plasmid transfection 실험 목적
고분자-유전자 복합체를 이용하여 동물 세포에 plasmid DNA 를 넣어 세포의 형질을 전환한다.
IP (Immunoprecipitation) 실험 목적
여러 단백질이 혼합된 용액에서 항원-항체반응을 이용하여 목적 단백질을 침강시켜 분리한다.

면역침강법이란 항원-항체반응을 이용해서 혼합물에서 특정 항원을 분리하는 데 사용되는 기술이다. 항원-항체의 결합을 기반으로 한 복합체에 항체와 결합하는 비드를 결합시켜 침강시키는 원리를 사용하여 단백질을 분리할 수 있다 우리는 보통 실험실에서 세포 실험을 할 때 단백질을 많이 채취하는데 대부분의 경우 단백질은 구별하기 힘들다.그런 경우에 수많은 단백질이 있는 용액에서 특정한 단백질을 ip를 사용하면 타겟팅 하여 원하는 단백질만 분리할 수 있다.

예를들어 ABC라는 3가지 종류의 단백질이 있는 단백질 용액에서 단백질 A만을 따로 분리하고자 할때 프로틴 A에 대한 항체와 그다음에 항체와 결합하는 비드를 이용하여 분리할 수 있다.( 지금 나오는 프로틴 A는 실험에서 발현시켰던 이 단백질 A랑 다른 것이다)

분리하는 방법은 하나의 항원에 항체가 특이적으로 결합하는 원리를 사용하는데 먼저 단백질 A,B,C가 섞여있는 용액에서 단백질 A만을 분리하고자 할 때 단백질 A에만 특이적 결합을 하는 항체를 넣으면 항원 A에 대한 항체는 단백질 B와 C에는 결합을 하지 않고 항원 A에만 결합을 한다. 그런 다음에 눈으로 보일만큼 큰 비드를 섞게 되면 항체와 비드가 결합을 하고 항체와 단백질 A가 결합을 하기 때문에 항원-항체-비드의 하나의 콤플렉스가 형성이 된다.

참고자료

· 없음