이화여대 생명과학실험 A+ 리포트(catalase enzyme activity)

소개

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목차

I. Title
II. Introduction : all the basic principles required for the experiment, an experimental goal
III. Materials : Materials and their role in assay
IV. Methods:Methods and the meaning of each step
V. Result : shows the graph, the concentration of samples; 1 & 2(The difference in the concentration of samples is twice)
VI. Discussion(30) : Cautions in the assay, Causes of results, etc.

본문내용

이번 실험에서는 H202 농도는 고정하고 catalase 유닛 농도 양을 다르게 할 때 colorimetric assay를 사용하여 catalase의 양이 많아질수록 고정된 H202의 농도가 어떻게 변화하는지 확 인하여 catalase의 효소 활성을 확인한다. 또한 이미 알고 있는 catalse의 농도와 각각의 catalse가 나타내는 오디값을 통하여 가로축은 설계된 catalase의 농도로 세팅하고 세로축은 흡광도 값으로 standard curv를 작성한 후 위 그래프를 사용하여 catalse와 같이 실험을 진 행한 sample의 오디 값을 y에 대입하여 x값을 반대로 알아내어 샘플의 농도를 구하고자 한다.
이번 실험에서는 효소 중 과산화수소를 분해하는 catalase를 사용하여 효소활성을 확인하는 데 실험에 앞서 enzyme이란 무엇인지, 그 중 이번에 우리가 사용하는 catalase는 무엇이고 우리가 사용하는 enzyme assay는 무엇인지 알아본다.

ENZYME: enzyme이란 무엇인가?
효소란 생체 내의 화학반응을 매개하는 단백질 촉매로 각각의 효소는 한 가지 물질에만 작 용한다. 다른 촉매와 마찬가지로 반응 후에도 효소는 변하지 않고 그대로 남아 있기 때문에 재활용을 하여 다시 활용한다.특정 반응물과 결합하여 활성화에너지를 낮춰 반응을 촉진하 는데, 효소와 결합하 는 반응물을 기질이라고 하고 효소에서 기질과 결합하는 특정 부분을 활성부위 또는 기질 결 합 부위라고 한다. 효소의 활성부위에 기질이 결합하여 효소·기질 복 합체를 형성하고 반응 결과 생 성물이 만들어지면 효소는 생성물과 분리되어 또 다른 반응 에 참여한다.효소는 기질특이성을 갖는데 기질 특이성이란 효소의 입체구조와 효 소의 활성 부위가 맞아야만 결합하여 반응할 수 있는 것이다.효소는 단백질이므로 단백질의 3차 구조 에 영향을 주는 여러요인에 의하여 효소의 활성도 영향을 받는다.

참고자료

· 효소: Berg JM, Tymoczko JL, Stryer L (2012) Biochemistry 7th. New York : W. H. Freeman, 219-232
· 카탈레이스: Glorieux, C. and Calderon, P.B. 2017. Catalase, a remarkable enzyme: targeting the oldest antioxidant enzyme to find a new cancer treatment approach. Biol. Chem. 398, 1095–1108
· enzyme activity:검색어 「효소활성측정법」, 『naver 지식백과』, 효소활성측정법 (naver.com)
· colorimetric assay:What Is the Difference Between Colorimetric and Fluorometric Assay.DifferenceBetween.Com.
· https://www.differencebetween.com/what-is-the-difference-between-colorimetric-and-fluorometric-assay/
· 스탠다드 커브-Setting Up an ELISA Standard Curve. (n.d.). Advansta.
· https://advansta.com/wikis/setting-up-a-standard-curve-for-an-elisa-assay/
· 분광광도계- –위키피디아
· https://ko.wikipedia.org/wiki/%EB%B6%84%EA%B4%91%EA%B4%91%EB%8F%84%EB%B2%95