Lowry protein assay(단백질 정량 분석) 결과레포트

소개

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목차

1. Abstract
2. Experiment
3. Result & Discussion
4. Conclusion
5. Reference

본문내용

1. Abstract
Lowry protein assay 실험은 단백질 정량 분석에 대해 이해하고 그중에서 Lowry method로 단백질 정량 분석을 하는 실험이다. 농도를 알고 있는 서로 다른 농도의 BSA sample 5개의 흡광도를 측정하는 실험을 진행하고 두 번째 실험에서는 최적의 파장대(750nm)에서 미지 농도의 단백질 sample 2개와 대조군의 파장을 측정하여 비교하였다. 실험을 통해 구한 흡광도를 이용하여 BSA standard curve를 구하고 그래프를 통해 값과 선형 방정식을 구할 수 있다. 해당 선형 방정식으로 미지 농도 sample의 농도를 구할 수 있다. 또한, 표준 오차를 구해 error bar를 나타낼 수 있다.

2. Experiment
Lowry protein assay의 실험 방법은 서로 다른 농도의 BSA 용액과 미지 농도의 단백질 sample에 Lowry reagent를 넣고 20분간 반응시킨 후, Folin&Ciocalteu‘s Phenol reagent을 넣어 30분 동안 반응시킨다. 반응이 끝나 용액의 색이 파란색으로 변하면, sample의 흡광도를 각 파장에서 측정하여 대조군과 비교해본다.
200의 BSA sample을 각각 200, 150, 100, 50, 0 농도로 희석해 주었다. 이때 BSA sample의 총 부피는 0.2ml가 되어야 한다. 각 sample에 넣은 BSA 용액과 증류수의 양, 총 부피는 Table 1과 같다.

Table 1. BSA sample의 BSA, 증류수의 양

농도를 알고 있는 BSA sample 5개와 미지 농도의 단백질 sample 2개, 대조군(증류수) 1개에 Lowry reagent 1ml씩 넣어주었다. 그 뒤 반응이 일어나도록 20분간 기다려주었다.

참고자료

· Lowry protein assay(단백질 정량 분석) 예비레포트
· 2023 화공기초 이론 및 실험2 실험노트 p. 6~7