[이화여대 생명과학실험1 분반1등 A+ 레포트] SDS-PAGE and Protein Analysis

소개

이화여자대학교 생명과학실험1 과목 A+ 레포트입니다.
정성 들여 작성했습니다. 참고하시어 좋은 결과 있으시길 바랍니다.

목차

I. 제목

II. 요약

III. Introduction
1. SDS의 역할 및 SDS-PAGE 원리
2. Gel에 들어가는 시료의 역할
3. Resolving Gel과 Stacking Gel의 차이
4. Coomassie Blue

IV. Materials

V. Method
1. Polyacrylamide Gel 만들기
2. SDS-PAGE 진행 후 coomassie blue staining 하기

VI. Result

VII. Discussion

VIII. References

본문내용

I. 제목
SDS-PAGE를 통한 단백질 분석

II. 요약
SDS-PAGE에 사용될 polyacrylamide gel을 제조한다. 이후 SDS-PAGE를 진행하고, coomassie blue staining 을 통해 단백질을 검출한다.

III. Introduction
1. SDS의 역할 및 SDS-PAGE 원리
SDS(Sodium Dodecyl Sulfate)는 계면활성제로서 친수성과 소수성 부분을 모두 지니고 있으며, 단백질을 변성할 수 있는 물질이다. 두 개의 아미노산 당 SDS 한 분자가 non-specific하게 결합하고, 이 과정에서 SDS에 의해 아미노산 R기의 전하가 상쇄되어 모든 단백질이 (-) charge로 바뀐다. 따라서 SDS를 처리한 단백질은 linear한 polypeptide로 변성되고, 이 polypeptide 길이에 비례하여 (-) charge를 띠게 된다.
SDS-PAGE는 이러한 SDS의 특성을 토대로 하여 단백질을 분자량에 따라 band 형태로 분리하는 실험이 다. 단백질은 그 구조와 전하, 분자량이 모두 다르다. SDS-PAGE는 분자량으로 단백질을 분석하기 때문에 이외의 특성은 모두 통일하여야 한다. 따라서 SDS를 통해 단백질의 구조와 전하를 모두 일정하게 한 뒤 분자량에 의해서만 분석을 진행한다.

참고자료

· 검색어 「PM2700 marker」, 『(주)동인바이오텍』, https://www.donginbio.com/shop/sub/brand/brand_view.php?pru=11816, 접속일 2024.04.09.
· 검색어 「coomassie blue」, 『Cepham Life Sciences』, https://www.cephamls.com/coomassie-brilliant-blue-r-250-dye/, 접속일 2024.04.09.
· 검색어 「alkaline phosphatase」, 『MCE』, https://www.medchemexpress.com/proteins/alkaline-phosphatase.html, 접속일 2024.04.09.
· 검색어 「smeared band」, 『GOLDBIO,
· https://goldbio.com/articles/article/troubleshooting-sds-page-sample-preparation-issues#_Toc135737596, 접속일 2024.04.09.