세포생물학실험 만점(A+) 실험 보고서(레포트) 10. Immunohistochemistry (IHC)

소개

세포생물학실험 만점(A+) 실험 보고서(레포트) 10. Immunohistochemistry (IHC) 관련 레포트 입니다.

목차

１.   서론
 
２.   실험 목적
 
３.   실험 방법
가.    실험 재료(도구)
1)      샘플
2)      시약
3)      장비
나.    실험 방법
 
４.   실험 결과
 
５.   논의 (고찰)
 
６.   참고문헌

본문내용

１. 서론
면역 염색법(Immunostaining)은 세포 또는 조직에서 특정 분자, 단백질 등을 항체를 이용해 가시화하는 방법으로, 특정 단백질에 선택적으로 결합하는 항체를 세포나 조직에 반응시킨 후, 항체의 결합 반응 후 그 항체의 위치를 관찰하는 생화학적인 방법이다. 면역염색법의 종류로는 면역 조직 화학 염색법 (immunohistochemistry, IHC), 면역 세포 화학 염색법 (immunocytochemistry, ICC), 면역 형광법 (immunofluorescence, IF) 등이 존재한다.

면역 조직 화학 염색법 (IHC)은 특정 타겟 단백질이 고정된 조직 내에서 발현하는지, 발현한다면 어디 위치에서 발현하는지에 대해 조직에 있는 특정 항원에 결합하는 특정 항체를 이용하여 염색하는 방법이다. IHC는 이차항체 염색 이후 발색제인 DAB 등 을 이용하여 발색하는 방법으로 보통 peroxidase에 의해 산화되어 갈색으로 발색된다. 최근에는 갈색으로 반응하는 DAB 반응 말고도 다양한 종류의 kit들이 개발되고 있다.

항원 복원 (Antigen retrieval) 은 조직 절편으로 면역 염색(IHC)을 진행할 때, 가장 중요한 단계로, 조직을 고정할 때 사용했던 포르말린에 의해 교차결합 (cross-link)된 단백질들의 교차결합을 절단하여 숨겨진 항원을 노출시키는 과정이다. 항원 복원 방법으로는 가열에 의한 HIER 방법과, 단백질 분해 효소를 이용하는 PIER 방법이 존재한다.

<중 략>
 
２.   실험 목적
파라핀 블록을 가지고 원하는 두께로 자른 조직 절편을 이용하여, cleaved-caspase3를 항체 염색한 후, DAB 반응을 통해 조직학적인 분석에 대해 학습한다.
cleaved-caspase3를 항체와 Immunohistochemistry (IHC)를 통하여, apoptosis를 관찰한다.

 

참고자료

· 윤선희. "형광염색법을 이용한 drosophila bax inhibitor-1의 세포사멸 조절기전 규명." 국내석사학위논문 고려대학교 생명환경과학대학원, 2011. 서울
· 이종호, “의생명과학 실험서 . 하권 , 분자생물학 실험, 단백체학 실험, 면역학 실험 = Laboratory experiments for biomedical sciences”, 국내서 단행본, 라이프사이언스, 2021 (p.257-265)
· 강전아인(岡田雅人), “단백질실험노트 (하)”, 국내서 단행본, 월드사이언스. 2006 (p.44-48, 127-139)
· 조해준. "알코올 기반 조직 고정제의 H&E 및 IHC 염색에 대한 효과." 국내석사학위논문 고려대학교 대학원, 2024. 서울