세포생물학실험 만점(A+) 실험 보고서(레포트) 03. 마우스 종양 세포 4T1(동물세포) 배양 실험

소개

세포생물학실험 만점(A+) 실험 보고서(레포트) 03. 마우스 종양 세포 4T1(동물세포) 배양 실험 관련 보고서 입니다.

목차

１.서론

２.실험 목적

３.실험 방법
가.실험 재료(도구)
1)샘플
2)시약
3)장비
나.실험 방법

４.실험 결과

５.논의 (고찰)

６.참고문헌

본문내용

１. 서론
동물세포를 배양하는 것은 모든 세포생물학 실험에 있어서 가장 기초적인 실험 방법으로, qRT PCR, MTT assay, Cell Cycle Analysis 등의 In vitro(시험관 내) 수준에서 필요한 실험과 동물에 종양을 이식하는 등의 In vivo (생체 내) 수준의 연구에서도 사용되는 방법이다. 이번에는 아주 기본적인 동물 세포 배양 방법인, 마우스 종양 세포 4T1를 혈청 배지에 배양하는 방법으로 실험을 진행할 계획이다.

２. 실험 목적
In vitro(시험관 내) 수준에서 세포를 배양하는 방법을 익히고, 이를 바탕으로 실험 세팅 방법에 대해 학습한다.

３. 실험 방법
가. 실험 재료(도구)
1) 샘플
- 마우스 종양 세포 4T1(Triple Negative Breast Cancer(TNBC))
마우스 종양 세포 4T1은 진핵세포이자, 상피세포이며, 성장 속도가 빠른 세포이다. 마우스에서 4T1 세포의 종양 성장과 전이 확산은 인간에서의 유방암과 매우 유사하다.

마우스 종양 세포 4T1

2) 시약
- DPBS
PBS는 Phosphate buffered saline의 약자로, nacl을 첨가하여 만든 인산 완충용액이다. 기존 PBS에 포유류 세포 배양에 좀 더 유용하도록, 2가이온(Ca2+, Mg2+)을 제거하여 만든 용액이 DPBS (Dulbecco's Phosphate Buffered Saline)이다. 포유류 세포 배양에서 DPBS는 pH와 삼투압을 유지하고, 세포대사에 필수적인 무기이온을 제공하는 역할을 수행하고, 또한 실험에서 washing buffer 등의 용도로 사용된다.
- 1X trypsin-EDTA
세포는 부착되어 증식하는 Adherent 세포와 혈액 등에 떠다니면서 증식하는 Suspension 세포로 나뉜다. Adherent 세포를 배양하기 위해서는, 세포와 세포, 세포와 배양용기와의 접착을 떨어뜨려, 단일 세포로 된 현탁액으로 만드는 과정이 필요하다.

참고자료

· 정출이헌(井出利憲),”세포배양노트”, 국내서 단행본, 월드사이언스, 2001 (p.9~78)
· 장선일 김강주,”세포학 및 면역학 실험노트= Practical of cell biology and immunology”, 국내서 단행본, 익산: 원광대학교 출판국, 1996 (p.15~100)
· 정재명. "무혈청 배지에서 transferrin 대체 성분 첨가에 따른 CHO-DG44 세포별 배양 특성." 국내석사학위논문 한양대학교 대학원, 2012. 서울