역상 HPLC/UV를 이용한 indomethacin 분석. 특이성과 직선성 분석 및 미지농도 구하기

소개

이화여대 약대 약제학 실습 보고서 입니다.

역상 HPLC/UV를 이용한 indomethacin 분석.
특이성과 직선성 분석 및 미지농도 구하기

목차

1. 제목 & 실험 목적
2. 방법
3. 결과
4. 고찰

본문내용

1. 제목 & 실험 목적
역상 HPLC/UV를 이용한 indomethacin 분석. 특이성과 직선성을 분석하고 미지농도 구하기
약물 peak와 retention time을 통해 indomethacin과 docetaxel 의 특이성을 확인하고, 샘플을 계열 희석시켜 직선성을 구하고 미지 약물의 농도를 구하는 것이 실험의 목적이다.

2. 방법
- Standard samples의 준비
Indomethacin 원액(stock solution, 1 mg/mL)을 희석용매 100% acetonitrile를 이용하여 적절히 계열 희석하여 2, 5, 10, 20, 50, 100 μg/mL 농도를 준비했다. <표1>

<표1> 계열희석 방법 (순서는 왼쪽부터 오른쪽으로)
100 ug/ml 50 ug/ml 20 ug/ml 10 ug/ml 5 ug/ml 2 ug/ml
IND or 전단계 계열희석한 IND(uL) 10 50 40 50 50 40
ACN(uL) 90 50 60 50 50 60

이 standard samples은 다음 단계에서 HPLC 분석용 samples (drug in rat plasma)을 만들 때 사용되었다. Internal standard로 사용하는 docetaxel(1 mg/mL)은 사용 전 1/10로 희석하여 최종농도 100 μg/mL로 사용했다.

-HPLC 분석을 위한 Sample의 준비(drug in rat plasma)
EP tube에 200p, 20p pipette을 이용하여 Rat plasma 90 μL + 계열 희석한 indomethacin 10μL + docetaxel (IS, 100μg/mL) 10μL + ACN 90 μL를 순서대로 넣어줬다. (넣는 순서는 혈장→약물→ACN순).따라서 혈장에 들어간 indomethacin의 최종농도는 계열 희석한 농도의 1/10인 0.2, 0.5, 1 ,2, 5, 10μg/mL

참고자료

· 없음