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생물공정실험 결과보고서_Gene Expression Analysis by RT-PCR

"생물공정실험 결과보고서_Gene Expression Analysis by RT-PCR"에 대한 내용입니다.
4 페이지
어도비 PDF
최초등록일 2024.02.12 최종저작일 2023.09
아주대 생물공정실험 응화생 응용화학생명공학과
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생물공정실험 결과보고서_Gene Expression Analysis by RT-PCR
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    소개

    "생물공정실험 결과보고서_Gene Expression Analysis by RT-PCR"에 대한 내용입니다.

    목차

    1. 실험목적
    2. 실험방법
    3. 실험결과
    4. 고찰

    본문내용

    -실험 목적
    reverse transcription PCR을 얻어진 cDNA sample을 real time PCR을 통해 증폭 시킨다. 이때 들어 가는 reagent들 특히 cancer cell과 ADSC cell의 gene에 각각 다른 primer를 처리함에 따라 Housekeeping gene인 GAPDH에 비해 Thy-1 gene의 발현의 증감을 알아보며, 이들의 원리 및 real time PCR분석에 따른 나타난 결과 값들을 정제하며 분석한다.

    -실험 방법
    1. 위의 시약들을 10% overage하게 넣어 pipetting loss를 방지한다. cDNA는 5~50ng을사용한다.
    2. briefly vortexing한다음 briefly centrifuge한다. PCR mixture가 잘 섞였는지 확인한다.

    참고자료

    · House Keeping Gene - https://www.genomics-online.com
    · Jin Sup Jung, M.D. Department of Physiology, School of Medicine, Pusan National University, Busan, Korea, Adipose Tissue Derived Mesenchymal Stem Cells, J Korean Soc Transplant
    · Real- Time PCR- https://www.thermofisher.com/kr

  • AI와 토픽 톺아보기

    • 1. Reverse Transcription PCR (RT-PCR)
      Reverse Transcription PCR (RT-PCR)은 RNA 분자를 cDNA로 역전사하고 이를 증폭하는 기술로, 유전자 발현 분석, 바이러스 검출, 병원체 진단 등 다양한 분야에서 널리 사용되고 있습니다. RT-PCR은 매우 민감하고 정확한 분석 방법으로, 극미량의 RNA 시료에서도 타깃 유전자를 검출할 수 있습니다. 또한 실시간 모니터링이 가능하여 정량적인 분석이 가능합니다. 그러나 RNA 시료 준비, 역전사 효소 선택, 프라이머 및 프로브 디자인 등 다양한 요인들이 결과에 영향을 미칠 수 있어 실험 설계와 최적화가 중요합니다. 최근에는 원격 진단, 신속 진단 등 다양한 응용 분야로 확장되고 있으며, 지속적인 기술 발전을 통해 더욱 편리하고 정확한 분석이 가능해질 것으로 기대됩니다.
    • 2. Real-time PCR 분석
      Real-time PCR은 PCR 증폭 과정을 실시간으로 모니터링하여 정량적인 분석이 가능한 기술입니다. 이 기술은 유전자 발현 분석, 병원체 검출, 유전자 변이 분석 등 다양한 분야에서 널리 활용되고 있습니다. Real-time PCR은 형광 프로브나 염료를 사용하여 증폭 산물을 실시간으로 검출하므로, 기존의 end-point PCR에 비해 정량성이 높고 민감도가 우수합니다. 또한 실험 시간이 단축되고 오염 위험이 낮아 신뢰도 높은 결과를 얻을 수 있습니다. 그러나 실험 설계, 프라이머/프로브 디자인, 형광 신호 분석 등 다양한 요인들이 결과에 영향을 미칠 수 있어 전문적인 지식과 경험이 필요합니다. 최근에는 디지털 PCR, 멀티플렉스 PCR 등 더욱 발전된 기술들이 등장하고 있어, 향후 real-time PCR 분석 기술은 더욱 다양한 응용 분야로 확대될 것으로 기대됩니다.
    • 3. cDNA 합성 시약 비교
      cDNA 합성은 RNA 분자를 DNA 상으로 역전사하는 과정으로, 유전자 발현 분석, 유전체 연구, 바이러스 검출 등 다양한 분자생물학 실험에서 필수적인 단계입니다. 다양한 cDNA 합성 시약들이 시중에 출시되어 있으며, 각각의 특성과 장단점이 있습니다. 예를 들어 랜

  • 자료후기

      Ai 리뷰
      생물공정 실험 결과보고서로, reverse transcription PCR과 real time PCR 분석을 통해 cancer cell과 ADSC cell의 Thy-1 gene 발현 양상을 확인하고 분석한 내용을 정리하였습니다.

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