서울대 생물학실험_DNA technology(Transformation, PCR)_A+리포트

소개

"서울대 생물학실험_DNA technology(Transformation, PCR)_A+리포트"입니다.

2020년도 2학기에 코로나가 한창인 시절 수강을 하여서 A+를 받았습니다.

생명과학 전공이 아니었기에 순전히 제 스스로 작성하였고 그 과정에서 정말 많은

참고자료와 참고서적을 참고하였기에 내용이 더욱 풍부하고 다양합니다.

또한 코로나 시절 실험을 대면으로 진행하기가 어려웠기 때문에 조교 선생님들께서 실험을 하시고 제공해주신 사진으로 리포트를 진행하여서 결과 사진이 가장 정확합니다.

잘 참고하시어 A+ 받으시길 기원합니다.

목차

1. 초록

2. 서론

3. 재료 및 방법
1)실험1 : Transformation
2)실험2 : Colony PCR
3)실험3 : Restriction enzyme cut and gel electrophoresis

4. 결과 및 분석

5. 토의

6. 참고문헌

본문내용

초록
DNA cloning은 DNA를 재조합하고 숙주 안에서 이를 복제하는 과정이다. 이에 숙주 박테리아를 형질전환 시키기 위해 먼저 competent한 상태로 만드는 것이 중요하다. 그래야만 형질전환 후 필요한 유전자를 대량으로 얻을 수 있기 때문이다. 첫 번째 실험에서는 colony의 색에 기반하여 어떠한 대장균이 형질전환되었는지를 탐구하였으며 흰색의 colony가 이에 부합함을 알게되었다. 두 번째 실험에서는 각 배지에서 colony picking을 한 후 PCR을 진행하였으며 마지막 실험에서는 PCR 생성물에 제한효소를 처리하고 전기영동을 진행하였다. 결과로서 관찰된 DNA의 band를 통해 절편의 길이를 비교함으로써 어떠한 유전자가 플라스미드와 관련되어 있는지 탐구해보았다.
Ⅰ. 서론
클로닝이란 관심이 있는 DNA 절편을 벡터에 넣어 세포에 도입한 후 세포를 증식해서 충분한 양의 DNA를 얻는 것이다. 대장균 형질전환을 위해 먼저 게놈 DNA에서 관심 있는 염기 서열 절편을 PCR로 증폭해서 확보한 후 알맞은 벡터를 골라서 제한효소를 처리해 MCS를 자른다. 그리고 절편과 벡터를 섞은 후 리가아제를 처리해 연결한 후 이렇게 절편이 연결된 벡터를 대장균에 형질전환한다. 그후 항생제가 들어있는 고체 배지에 대장균을 뿌려서 벡터를 지닌 대장균만 선별한다.

참고자료

· Taketoshi Taniguchi.『PCR 실험노트』. 월드사이언스. 2002.
· Watson, Gilman, Witkowski, Zoller.『유전공학 제2판』. 탐구당. 1994.
· T.A. Brown.『유전자 클로닝과 DNA 분석 제7판』. 월드사이언스. 2017.
· D.Peter Snustad, Michael J. Simmons.『유전학원론 제6판』. 월드사이언스. 2008.
· 김영희.『분자 생물학 실험서 제3판』. 월드사이언스. 2018.
· David P. Clark.『분자생물학 유전혁명의 이해』. 월드사이언스. 2006.
· 유민, 김병오, 이혜영.『미생물실험서』. 보문각. 2007.
· Craig et al.『분자생물학 유전체 기능의 원리』. 홍릉과학출판사. 2014.
· Sayers et al. Identification and Eradication of a Denatured DNA Isolated during Alkaline-Based Plasmid Purification Procedures. Anal Bioch, 241:186-189. 1996.