Cell seeding & Crystal violet assay 보고서(아주대 전공실험2)

소개

아주대학교 생명과학전공실험2 만점 보고서입니다

목차

1. 실험목적
2. 실험원리
3. 실험재료 및 방법
4. 실험결과
5. 실험고찰
6. 참고문헌

본문내용

Primary cell은 자발적이거나 modification (virus나 mutagen 처리) 인해 정상세포로 무한 증식할수 있는 immortalized cell이 될 수 있다.Immortalized cell, 즉 cell line (세포주)은 생화학, 동물세포생물학연구에서 복잡한 생물 시스템의 모델을 결정하는 데에 유용하게 쓰인다. (1) 세포가 항상성을 지니며 죽지 않기 때문에 생물학적 분석이 유용하고, (2) 증식을 통해 발생된 자손들이 동일한 유전정보를 지니기 때문에 높은 재현성에 따른 신뢰를 요구하는 과학적 연구에 적합하다는 것이 장점이다. 생명공학 분야에서 cell line은 저비용으로 다양한 목적에 활용되는데, 암이나 바이러스 연구,독성 물질 테스트, 진핵생물에서 의학용 단백질을 대량으로 뽑는 데에 사용된다.
Adherent cell(부착세포)이란 비장세포나 복강세포를 배양할 때 유리나 플라스틱 또는 나일론의 표면에 부착하는세포이다. 이 세포는 소식세포에 속하며, T와 B림프구의 상호작용에 의한 항체 생산에는 불가결한 세포로서 1967년에 처음으로 발표되었다. 최근 도움-T림프구 활성화에 필수적인 이 항원 공급세포는 그 활성화에 공헌하는 것으로 생각되는 Ia항원이 세포막에서 발견되었다. 부착세포의 전부가 Ia항원 양성에서는 없는 것으로 알려져 있다. 부착세포는 성장하기 위해 표면에 부착되어야한다. 일반적으로 대부분의 현탁세포는 원래 부착되어 있으며, 현탁 배양에서 작동하도록 조정되어있다. 일반적으로부착 세포를 계대 배양할 경우에 배지를 제거하고 단층세포를 탈착하기 위해서trypsin을 처리하며 일부 부착 정도가 약한 세포는 shaking함으로써 탈착할 수 있다. 세포의 탈착 후 세포를 모아서 적합한 배양 배지에 희석하여 배양한다. 그러나 예외적으로 일부 단층 세포들은 trypsin 처리로 충분히 탈착되지 않는다. 이러한 단층 세포에는 pronase, dispase, collagenase와 같은 강력한 protease를 처리하여야한다.

참고자료

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