서울대 생물학실험-모듈2(대장균 형질전환과 클로닝, Colony PCR, 제한효소 절단)

소개

2021학년도 2학기 수강, A+
여러 족보에서 좋은 내용만 뽑아 작성한 보고서입니다.

목차

I. Abstract
II. Introduction
III. Materials and Method
IV. Results
V. Discussions
VI. References

본문내용

1. Abstract
모듈2에는 생명공학의 기본 원리와 분석 방법을 이해하며 생명공학이 의학과 법의학 등의 여러 분야에 영향을 주고 있다는 사실을 인식해보았다. 첫번째 실험에서는 대장균에 서로 다른 3개의 플라스미드를 도입했고, 형질전환된 대장균들을 각각 배양시켰다. 두번째 실험에서는 대장균에 플라스미드가 잘 도입됐는지 확인하고 플라스미드의 사이즈를 확인하기 위해 PCR과 전기영동 과정을 포함한 colony PCR을 진행하였다. 마지막 실험에서는 대장균의 플라스미드를 추출해 제한효소 반응을 거치고, 젤 전기영동을 진행하여 플라스미드에 각각 도입한 유전자의 존재 여부를 확인하였다.

2. Introduction
첫번째 실험에서는 DNA 클로닝을 통해 서로 다른 3개의 플라스미드 A, B, C를 넣어준 대장균의 클론들을 얻어냈다. 이때 DNA 클로닝이란, 증폭하고자 하는 DNA를 세포에 도입하여 복제하는 방법을 통해 수많은 DNA 사본을 얻는 기법이다. DNA 클로닝을 하기 위해선, 증폭하고자 하는 DNA 조각을 운반 DNA 분자인 벡터(vector)에 연결시킨 후, 이를 세포에 도입해야 한다. 그럼 원하는 DNA를 지니게 된 세포가 분열하며 클론(clone)을 생성하게 된다.(1) 클론 내의 세포들은 도입된 DNA를 포함하는 모두 동일한 세포이므로, 이 클론에서 DNA를 추출하면 원하는 DNA를 원하는 만큼 얻을 수 있다.
DNA 클로닝을 하기 위해서는 먼저 대장균 세포가 생장하고 분열하게 해야 한다. 미생물을 배양할 때 사용하는 배지는, 생명체를 증식시키기 위해 만들어진 액체나 젤 형태의 영양원이다. 증식시킬 세포의 종류에 따라 필요로 하는 영양소가 다르기 때문에 세포마다 각기 다른 종류의 배지를 사용한다.(2) 배양 전 거쳐야하는 단계인 접종(inoculation)이란, 미생물이 증식할 수 있는 배지에 시료를 심는 것이다. 이때 시료란 배양하고자 하는 미생물 개체를 뜻한다. 각각의 미생물들은 잘 자라는 환경이 다르기 때문에 시료를 성공적으로 배양을 위해서는 접종 시 배지와 주변 환경을 적절히 조절해야 한다.

참고자료

· David L. Nelson, Michael M. Cox., Lehninger Principles of Biochemistry(6th edition.) (2013), W.H. Freeman.
· Kathleen Park Talaro, Barry Chess, Foundations in Microbiology(10th edition.) (2017), McGraw-Hill Higher Education.
· Bruce Alberts, Alexander Johnson, Julian Lewis, Martin Raff, Keith Roberts, Peter Walter, Molecular Biology of the Cell (2002), Garland Science.