Agarose gel 제작 및 DNA 전기영동 실험 레포트 (A+)

소개

"Agarose gel 제작 및 DNA 전기영동 실험 레포트 (A+)"에 대한 내용입니다.
1. Agarose gel 제작
2. 전기영동 진행
위 두 가지 실험을 진행하였습니다.
실험결과에 관한 고찰과 DNA 겔의 농도에 따른 DNA 분획 범위, SDS-PAGE에 관한 내용을 기재하였습니다.
Project 내용으로는 PCR의 정의 및 과정과 Tm (Melting Temperature), DNA 전기영동 원리와 특성에 관한 내용, Loading dye, EtBr 및 대체제, 등에 관한 내용을 기재하였습니다.

목차

1. Title
2. Date
3. Name
4. Purpose
5. Material
6. Method
7. Results
8. Discussion
9. Projects
10. Reference

본문내용

Ⅳ. Purpose : 전기영동의 의미를 이해하고 DNA의 크기 및 구조에 따른 결과차이를 이해한다. Agarose gel에 DNA와 loading dye를 넣고 전기를 걸어주면 DNA는 인산기 때문에 매질을 타고 양전하 방향으로 움직이게 된다. 이때 움직이는 속도는 DNA의 크기에 다라 다르므로 매질 내에서 종류에 따라 분리하게 되며 전기영동은 DNA의 크기에 따른 분리를 한다.

Ⅴ. Material
PCR product, 6X dye, TAE buffer, micro pipette, tip, tank, agarose, EtBr, steriler, magnetic bar, 플라스크, DW, 1X TAE buffer, size marker.
Ⅵ. Method
< Agarose gel 만들기 >
① 1× TAE 용액으로 희석하여 350㎖에 3.5g을 섞어서 1%로 만든다.
② 전자레인지를 사용하여 열을 가해서 완전 용해시킨다. (or magnetic bar와 steriler를 이용하여 녹인다.)
③ 뜨거운 것을 약간 식힌 후 틀에 부어준다.
④ 바를 끼워준다.
⑤ 완전하게 굳으면 틀에서 떼어내고 1× TAE 용액에 담궈 보관한다.

< 전기영동 내리기 >
① gel에 ladder와 loading dye+DNA를 주입한다.
② 전기를 50mV-100mV를 걸어준다
③ DNA를 확인한다.



Ⅶ. Results
몇 번 lane의 band가 자신의 것인지 확인하세요.

참고자료

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· PCR 실험의 원리와 응용 / 최용락 외 2인 / p. 1~5, 27~29, 231~233 / 세종출판사 / 2002
· → PCR의 정의, "T" _"m" 의 정의 및 계산식, 전기영동 분석
· http://www.doopedia.co.kr/doopedia/master/master.do?_method=view&MAS_IDX=1010130008
· 24276 / 두산 백과 (doopedia) → PCR 원리 및 특징
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· → "T" _"m" 의 정의 및 특징, 원리
· 전기영동 최신 프로토콜 / 강호일 / p. 14~ 18, 24~25 / 월드 사이언스 / 2006
· → 전기영동 Agarose 겔, 검출 시약, 겔 염색 시약, 전기 영동 과정에서 발생하는 문제점, 원인
· http://www.doopedia.co.kr/doopedia/master/master.do?_method=view&MAS_IDX=1711300015
· 55719 / 두산 백과 (doopedia) → 브로민화 에티듐 (EtBr)
· 실험기기 이론과 실제 / 김옥진 / p. 116~117 / 문운당 / 2013
· → EtBr의 이용, 장점과 단점, 특징