개인 맞춤형 유전자 변형 T세포 (CAR-T 연구에 있어서 필요한 공학기술을 중심으로)(생명공학과,의예과,약학과)

목차

1. CAR-T 제작
2. 면역항암제에 사용된 다양한 공학기술
3. 개인 맞춤형 유전자변형 T세포

본문내용

CAR-T 세포를 제작하기 위해서는 몇 가지 단계가 필요하다 (그림1). 첫 번째, 백혈구분리반출법을 이용하여 환자 혹은 기증자의 몸에서 백혈구를 분리한다. 두 번째, 충분한 수의 백혈구를 모은 후, T 세포를 농축하는 과정을 거친다. 이때, 백혈구분리반출법에서 사용한 완충액에 혈액응고 방지제가 들어있기 때문에 이를 제거하기 위하 여 세포를 세척하는 과정을 거친다. 세 번째, T 세포는 CD4/ CD8 구성 수준에서 특정 항체 비드 결합체나 마커를 사용하 여 분리된다. 이 과정에서 환자나 기증자로부터의 항원제시 세포 (antigen presenting cell, APC), anti-CD3/anti-CD28 단일 클론항체로 코팅된 비드나 anti-CD3 항체 단독 또는 배양보조세포와 IL-2와 같은 성장인자가 조합된 비드를 정제하는 과정이 필요하다.
분리한 T 세포를 확보한 다음, CAR를 환자의 T 세포에 발현시킨다. CAR는 바이러스 벡터에 인코딩 되어있다. 바이러스 벡터는 T 세포에 처리해서 세포 내 유전자 전달 과정을 거 친다. 이 때, 바이러스 벡터는 환자 T 세포에 부착되어 들어 갈 때, RNA의 형태로 CAR가 인코딩 되어있는 유전물질을 도입한다. RNA는 DNA로 역전사효소 (reverse transcriptase)에 의해 역전사되고, 환자 T 세포의 게놈에 통합되므로, 세포가 분열하면서 CAR 발현이 유지되고 늘어난다. 그 후 환자 세포에 의해 CAR가 전사, 번역되어 세포 표면에서 CAR가 발현된다. 이 때, 임상 시험에서 주로 감마 레트로 바이러스보다 렌티 바이러스 벡터를 이용하는데, 이는 렌티 바이러스 벡터의 안전한 통합 부위 프로파일 때문이다. 그 다음, 제 작한 CAR-T 세포를 배양한 후, 환자에게 주입한다. 이때 CAR-T 세포 주입 전, 환자는 백혈구 수치를 낮추기 위해 림프구 제거 조절 화학요법 (사이클로포스파미드, 플루다라빈 등을 이용)을 받는다.

참고자료

· 없음